1996年,馬伊琍與保劍峰、陳龍(long)、高(gao)曙(shu)光、張雅琳(lin)共同出演了電視劇《真空愛情記(ji)錄》,講(jiang)述了一群大學畢業生為了工作和愛情奮斗(dou)的故(gu)事。
1998年(nian),馬伊琍畢業(ye)于(yu)上(shang)海(hai)戲劇學(xue)院,畢業(ye)后參演(yan)了(le)第一部改編自陜西駐滬作(zuo)家李春平同名(ming)小(xiao)說的電(dian)影《玻璃是(shi)透明的》,飾(shi)演(yan)“小(xiao)丫子(zi)”。同年(nian),其出演(yan)了(le)第一部古裝電(dian)影《孔乙己》。
2000年(nian),通過出演(yan)《黑洞(dong)》提升了表演(yan)事業。同年(nian),在電視(shi)劇《前世今(jin)生》中(zhong)飾演(yan)美貌且氣質超凡(fan)的秦婉瑩。
2001年,出演(yan)電視劇《白天睡覺(jue)的女(nv)人》中(zhong)的李秀(xiu)。同年,在電影《西施眼》中(zhong)飾演(yan)施雨,該片(pian)在2002年美國(guo)夏威夷國(guo)際電影節中(zhong)獲評審(shen)團大將(jiang)及亞洲(zhou)最佳電影。
2002年,因出演電(dian)視(shi)劇《還珠格格Ⅲ之天(tian)上人間》中的(de)紫薇一角而(er)被大眾所熟(shu)知。
2004年,出演了由(you)黃(huang)磊指(zhi)導(dao)的《天一(yi)生水》,在劇中飾演一(yi)個混(hun)血(xue)姑娘(niang)明妮。
2005年,在張黎導演的(de)電(dian)視劇《錦(jin)衣(yi)衛(wei)》中出演了傾國美人客(ke)印(yin)月。
2006年,參演的(de)《喬家大(da)院》在央視(shi)熱播,其扮(ban)演的(de)“江(jiang)雪瑛”收獲了更多(duo)的(de)觀(guan)眾和粉絲(si)。
2007年(nian),因出演由趙寶剛指(zhi)導的青春勵(li)志電視(shi)劇《奮斗(dou)》而名聲驟起,同年(nian)6月底,馬伊琍簽(qian)約了內(nei)地影(ying)視(shi)巨擎橙天娛樂。
2008年(nian),因拍攝(she)電視(shi)劇(ju)《為誰心動》無(wu)悔剃光了(le)頭(tou)。同年(nian),其憑(ping)借影(ying)片(pian)《江北好(hao)人》,戰(zhan)勝(sheng)了(le)李(li)冰(bing)(bing)冰(bing)(bing)、范(fan)冰(bing)(bing)冰(bing)(bing)兩位候(hou)選(xuan)人,成為了(le)長春(chun)電影(ying)節(jie)影(ying)后。
2009年(nian),馬(ma)伊琍與佟(tong)大為共同出(chu)演了電(dian)視(shi)劇《婚(hun)姻保衛戰》。同年(nian),出(chu)演的(de)(de)首部反映豫商(shang)故(gu)事的(de)(de)電(dian)視(shi)劇《經(jing)緯天地》在(zai)CCTV-8播出(chu),這(zhe)也是她繼《喬家大院》之后首次登陸(lu)央視(shi),劇中扮演尚達志(zhi)的(de)(de)妻(qi)子順兒。
2010年,與涂松巖合作主演(yan)都市題材電視劇(ju)《雙(shuang)城生活》,她在(zai)劇(ju)中塑造的北京(jing)大妞郝京(jing)妮,受到了網友的普遍好評。憑借該(gai)劇(ju),馬伊琍獲得國劇(ju)盛典2011年度(du)最佳女(nv)演(yan)員(yuan)。
2013年(nian)(nian)年(nian)(nian)初,馬(ma)伊琍(li)與杜淳、劉(liu)莉(li)莉(li)、陳思(si)斯等(deng)合作出演電視劇《青春(chun)期撞上更年(nian)(nian)期2》,此外(wai),還(huan)客串了(le)電影(ying)《不二神探》,并(bing)且徹(che)底(di)顛覆(fu)以(yi)往的形象痛罵文章,成為了(le)影(ying)片一大看點(dian)。
2013年,首(shou)當制(zhi)片人的(de)馬(ma)伊(yi)琍與首(shou)次(ci)當導演的(de)丈夫文章合作了電(dian)視劇(ju)《小爸(ba)爸(ba)》。
2015年,出演了(le)公路(lu)(lu)犯罪片(pian)《未(wei)擇之路(lu)(lu)》。11月7日,在(zai)電視(shi)劇《北上廣不相信眼淚》中飾演潘蕓,憑該(gai)劇獲得第19屆華鼎獎中國百(bai)強電視(shi)劇最(zui)佳女(nv)主角。
2016年9月,與陳建斌合作主(zhu)演(yan)都市幽默(mo)劇《中國式(shi)關系》,飾(shi)演(yan)美女建筑設(she)計師江一楠。
2017年,主演文章執導的諜戰劇《剃刀(dao)邊(bian)緣》,劇中(zhong)飾演關海丹(dan)。同年參演《建(jian)軍大業(ye)》,飾演向警予角色。