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大(da)腸(chang)桿菌（Escherichia coli），又叫大(da)腸(chang)埃希(xi)氏菌，Escherich在(zai)1885年發現的。大(da)腸(chang)桿菌是條(tiao)件致病菌，在(zai)一定條(tiao)件下可以引起(qi)人和多種動物發生(sheng)胃腸(chang)道感染或(huo)尿道等多種局部組織器官感染。

簡介

大(da)腸桿菌是動(dong)物腸道中的正常寄居菌，其(qi)中很小一部(bu)分在一定條件下引(yin)(yin)(yin)起(qi)(qi)(qi)疾病(bing)。大(da)腸桿菌的血(xue)清型能(neng)夠引(yin)(yin)(yin)起(qi)(qi)(qi)人體(ti)或動(dong)物胃腸道感(gan)染，主要是由特(te)定的菌毛抗原、致病(bing)性毒(du)素等感(gan)染引(yin)(yin)(yin)起(qi)(qi)(qi)的，除胃腸道感(gan)染以外，還會引(yin)(yin)(yin)起(qi)(qi)(qi)尿道感(gan)染、關(guan)節炎、腦膜(mo)炎以及敗血(xue)型感(gan)染等。

種類

按致病作用

目前國(guo)際公認的(de)(de)分類，主要(yao)有(you)六個種類的(de)(de)大(da)(da)腸(chang)(chang)桿(gan)菌(jun)(jun)，即能(neng)夠致使(shi)胃腸(chang)(chang)道感染的(de)(de)腸(chang)(chang)道致病(bing)性(xing)的(de)(de)大(da)(da)腸(chang)(chang)桿(gan)菌(jun)(jun)（EPEC）、腸(chang)(chang)道產(chan)毒素性(xing)的(de)(de)大(da)(da)腸(chang)(chang)桿(gan)菌(jun)(jun)（ETEC）、腸(chang)(chang)道侵襲性(xing)的(de)(de)大(da)(da)腸(chang)(chang)桿(gan)菌(jun)(jun)（EIEC）、腸(chang)(chang)道出血(xue)性(xing)的(de)(de)大(da)(da)腸(chang)(chang)桿(gan)菌(jun)(jun)（EHEC）、腸(chang)(chang)集(ji)(ji)聚(ju)性(xing)的(de)(de)大(da)(da)腸(chang)(chang)桿(gan)菌(jun)(jun)（EAEC）以(yi)及近年來(lai)發(fa)現的(de)(de)腸(chang)(chang)產(chan)志賀樣毒素同時(shi)具有(you)一定侵襲力的(de)(de)大(da)(da)腸(chang)(chang)桿(gan)菌(jun)(jun)（ESIES），另(ling)外，還有(you)能(neng)夠致使(shi)尿道感染的(de)(de)尿道致病(bing)性(xing)的(de)(de)大(da)(da)腸(chang)(chang)桿(gan)菌(jun)(jun)（UPEC），以(yi)及最新命名的(de)(de)腸(chang)(chang)道集(ji)(ji)聚(ju)性(xing)的(de)(de)黏附(fu)大(da)(da)腸(chang)(chang)桿(gan)菌(jun)(jun)（EAggEC）。

按溶血性

根據大(da)腸(chang)(chang)桿(gan)菌(jun)(jun)的感(gan)染性(xing)(xing)狀能否(fou)產生溶血(xue)素和(he)有無溶血(xue)的能力，可(ke)將大(da)腸(chang)(chang)桿(gan)菌(jun)(jun)分為兩大(da)類：即溶血(xue)性(xing)(xing)的大(da)腸(chang)(chang)桿(gan)菌(jun)(jun)和(he)非溶血(xue)性(xing)(xing)的大(da)腸(chang)(chang)桿(gan)菌(jun)(jun)。

按產腸毒素性

根(gen)據(ju)大(da)(da)(da)(da)腸(chang)(chang)(chang)桿(gan)(gan)菌(jun)(jun)在(zai)感染(ran)過程中能(neng)否產(chan)生腸(chang)(chang)(chang)毒素(su)(su)的(de)(de)(de)(de)能(neng)力，可(ke)將大(da)(da)(da)(da)腸(chang)(chang)(chang)桿(gan)(gan)菌(jun)(jun)分(fen)(fen)為兩大(da)(da)(da)(da)類：即產(chan)腸(chang)(chang)(chang)毒素(su)(su)性(xing)的(de)(de)(de)(de)大(da)(da)(da)(da)腸(chang)(chang)(chang)桿(gan)(gan)菌(jun)(jun)和非產(chan)腸(chang)(chang)(chang)毒素(su)(su)性(xing)的(de)(de)(de)(de)大(da)(da)(da)(da)腸(chang)(chang)(chang)桿(gan)(gan)菌(jun)(jun)。產(chan)腸(chang)(chang)(chang)毒素(su)(su)性(xing)的(de)(de)(de)(de)大(da)(da)(da)(da)腸(chang)(chang)(chang)桿(gan)(gan)菌(jun)(jun)是人和多種動物(wu)的(de)(de)(de)(de)任何感染(ran)性(xing)腹瀉的(de)(de)(de)(de)重(zhong)要(yao)病原，鑒定產(chan)腸(chang)(chang)(chang)毒素(su)(su)性(xing)的(de)(de)(de)(de)大(da)(da)(da)(da)腸(chang)(chang)(chang)桿(gan)(gan)菌(jun)(jun)主要(yao)是測定所分(fen)(fen)離大(da)(da)(da)(da)腸(chang)(chang)(chang)桿(gan)(gan)菌(jun)(jun)分(fen)(fen)泌(mi)的(de)(de)(de)(de)腸(chang)(chang)(chang)毒素(su)(su)的(de)(de)(de)(de)類型。除此之外，也可(ke)以根(gen)據(ju)大(da)(da)(da)(da)腸(chang)(chang)(chang)桿(gan)(gan)菌(jun)(jun)產(chan)生腸(chang)(chang)(chang)毒素(su)(su)的(de)(de)(de)(de)能(neng)力，結合其(qi)對不(bu)同腸(chang)(chang)(chang)毒素(su)(su)的(de)(de)(de)(de)敏感性(xing)，而將大(da)(da)(da)(da)腸(chang)(chang)(chang)桿(gan)(gan)菌(jun)(jun)分(fen)(fen)型，稱為腸(chang)(chang)(chang)毒素(su)(su)型。

生物學特征

理化特性

大(da)腸(chang)(chang)桿(gan)菌(jun)(jun)是(shi)短桿(gan)菌(jun)(jun)，兩(liang)端呈(cheng)鈍圓形(xing)，革蘭(lan)陰性。有時因環境不同(tong)，個別菌(jun)(jun)體出現近似球桿(gan)狀(zhuang)或(huo)(huo)長(chang)絲狀(zhuang)；大(da)腸(chang)(chang)桿(gan)菌(jun)(jun)多是(shi)單一(yi)或(huo)(huo)兩(liang)個存(cun)在，但不會排列呈(cheng)長(chang)鏈形(xing)狀(zhuang)；大(da)多數的大(da)腸(chang)(chang)桿(gan)菌(jun)(jun)菌(jun)(jun)株具有莢膜(mo)(mo)或(huo)(huo)微莢膜(mo)(mo)結構(gou)，但是(shi)不能形(xing)成芽(ya)孢(bao)；多數大(da)腸(chang)(chang)桿(gan)菌(jun)(jun)菌(jun)(jun)株生長(chang)有菌(jun)(jun)毛，其中一(yi)些菌(jun)(jun)毛是(shi)針對宿主(zhu)及(ji)其他(ta)的一(yi)些組織或(huo)(huo)細胞具有黏(nian)附(fu)作用(yong)的宿主(zhu)特異性菌(jun)(jun)毛。

生化特性

大(da)腸(chang)桿(gan)菌的(de)生(sheng)化代(dai)謝非常活躍。大(da)腸(chang)桿(gan)菌可(ke)以發酵(jiao)葡萄糖(tang)產酸(suan)、產氣，個別菌株(zhu)不(bu)產氣，大(da)腸(chang)桿(gan)菌還(huan)(huan)能發酵(jiao)多種碳(tan)水化合物，也可(ke)以利用多種有機酸(suan)鹽。大(da)腸(chang)桿(gan)菌在常用的(de)生(sheng)化特性(xing)(xing)(xing)(xing)檢測項(xiang)目中，甲基紅試(shi)驗(yan)呈(cheng)陽(yang)(yang)性(xing)(xing)(xing)(xing)，吲(yin)哚產生(sheng)和(he)乳糖(tang)發酵(jiao)是陽(yang)(yang)性(xing)(xing)(xing)(xing)（個別菌株(zhu)表(biao)現(xian)陰(yin)(yin)(yin)性(xing)(xing)(xing)(xing)），維-培(pei)試(shi)驗(yan)是陰(yin)(yin)(yin)性(xing)(xing)(xing)(xing)，尿素(su)酶和(he)檸檬酸(suan)鹽利用呈(cheng)陰(yin)(yin)(yin)性(xing)(xing)(xing)(xing)（極個別菌株(zhu)表(biao)現(xian)陽(yang)(yang)性(xing)(xing)(xing)(xing)），硝酸(suan)鹽還(huan)(huan)原(yuan)試(shi)驗(yan)表(biao)現(xian)陽(yang)(yang)性(xing)(xing)(xing)(xing)，氧(yang)化酶表(biao)現(xian)陰(yin)(yin)(yin)性(xing)(xing)(xing)(xing)，氧(yang)化-發酵(jiao)試(shi)驗(yan)表(biao)現(xian)為F型。

致病作用特性

對人(ren)(ren)(ren)和多種動物(wu)(wu)來講，由于病(bing)原(yuan)(yuan)大(da)(da)(da)腸(chang)(chang)桿(gan)(gan)菌(jun)(jun)(jun)常(chang)常(chang)傾向具有一定(ding)的(de)宿主特異性(xing)，對人(ren)(ren)(ren)有致病(bing)作用的(de)菌(jun)(jun)(jun)株(zhu)常(chang)常(chang)是(shi)很少(shao)引起(qi)動物(wu)(wu)的(de)感染，反之亦然，據此可將病(bing)原(yuan)(yuan)大(da)(da)(da)腸(chang)(chang)桿(gan)(gan)菌(jun)(jun)(jun)大(da)(da)(da)致上將其劃(hua)分為兩(liang)種：即人(ren)(ren)(ren)病(bing)原(yuan)(yuan)大(da)(da)(da)腸(chang)(chang)桿(gan)(gan)菌(jun)(jun)(jun)和動物(wu)(wu)病(bing)原(yuan)(yuan)大(da)(da)(da)腸(chang)(chang)桿(gan)(gan)菌(jun)(jun)(jun)。動物(wu)(wu)的(de)致瀉性(xing)大(da)(da)(da)腸(chang)(chang)桿(gan)(gan)菌(jun)(jun)(jun)已被明(ming)確的(de)特征主要是(shi)類似于ETEC的(de)菌(jun)(jun)(jun)株(zhu)。UPEC是(shi)一群能夠引起(qi)人(ren)(ren)(ren)的(de)尿道感染最常(chang)見的(de)病(bing)原(yuan)(yuan)大(da)(da)(da)腸(chang)(chang)桿(gan)(gan)菌(jun)(jun)(jun)。尿道感染是(shi)很少(shao)獨立存在于動物(wu)(wu)的(de)大(da)(da)(da)腸(chang)(chang)桿(gan)(gan)菌(jun)(jun)(jun)病(bing)中(zhong)的(de)感染癥(zheng)狀。

流行病學特征

區域分布

大(da)腸(chang)桿菌的(de)(de)(de)發生(sheng)與流行感染是呈世界性分(fen)布(bu)的(de)(de)(de)，但大(da)腸(chang)桿菌的(de)(de)(de)流行性還是存在一(yi)定的(de)(de)(de)區(qu)域分(fen)布(bu)特征的(de)(de)(de)。這些區(qu)域分(fen)布(bu)的(de)(de)(de)特征在人(ren)的(de)(de)(de)大(da)腸(chang)桿菌感染中表現(xian)的(de)(de)(de)更明(ming)顯(xian)些，最大(da)的(de)(de)(de)可能是因為與區(qu)域間經(jing)濟條(tiao)件和社會衛生(sheng)狀況等有一(yi)定聯系(xi)的(de)(de)(de)。

易感宿主

動物的大腸桿菌病可以(yi)發(fa)生(sheng)在(zai)多種家畜、家禽、養殖經濟動物以(yi)及其他陸生(sheng)動物和(he)某些水產動物，其中豬(zhu)和(he)雞是(shi)最為易感(gan)的，而(er)且(qie)危害十(shi)分嚴(yan)重。

發病季節

大腸桿菌(jun)在(zai)動(dong)物群(qun)體間的(de)(de)感染的(de)(de)季(ji)(ji)節發病特征不是非(fei)常(chang)明(ming)顯(xian)(xian)。在(zai)一年四季(ji)(ji)豬(zhu)均可(ke)發生(sheng)，但(dan)只(zhi)要是發生(sheng)在(zai)豬(zhu)的(de)(de)產仔期至斷乳期，這(zhe)與豬(zhu)的(de)(de)易感日齡相關聯。犢牛和羔羊多發生(sheng)于冬季(ji)(ji)和春(chun)季(ji)(ji)。其他動(dong)物的(de)(de)大腸桿菌(jun)感染在(zai)常(chang)年均有發生(sheng)，季(ji)(ji)節性不明(ming)顯(xian)(xian)。

傳染源與傳播途徑

人的(de)大(da)腸(chang)桿菌(jun)病(bing)的(de)主要傳(chuan)染源是因為在(zai)(zai)胃腸(chang)道感染患者的(de)糞便中(zhong)有大(da)量大(da)腸(chang)桿菌(jun)病(bing)原(yuan)菌(jun)排(pai)至體外構成(cheng)的(de)。大(da)腸(chang)桿菌(jun)在(zai)(zai)人之間(jian)的(de)傳(chuan)播途(tu)徑多是通過糞-口這一傳(chuan)播途(tu)徑，在(zai)(zai)一定的(de)條件(jian)下可引起(qi)大(da)腸(chang)桿菌(jun)病(bing)散發或流行(xing)。

檢測方法

食品中(zhong)的大腸(chang)桿菌進行快速準確(que)的檢測已成(cheng)為了人們(men)經常(chang)關(guan)注的問題(ti)。下面闡(chan)述食品中(zhong)的大腸(chang)桿菌檢測的方法及(ji)分析。

發酵法

這(zhe)種(zhong)方(fang)法主要(yao)是在44.5℃下(xia)的培養基(ji)(ji)上進(jin)行大腸桿菌的培養，該(gai)培養基(ji)(ji)含有熒光底物，需要(yao)培養24h。然后對熒光底物進(jin)行釋放(fang)，需要(yao)采用葡萄(tao)糖(tang)醛酸進(jin)行，讓培養基(ji)(ji)能(neng)夠(gou)在紫(zi)外光的照(zhao)射下(xia)發(fa)出熒光。采用這(zhe)樣(yang)的方(fang)式方(fang)法，還可以進(jin)行統計學估計原來樣(yang)品(pin)中的菌落。主要(yao)步驟包括發(fa)酵(jiao)、分離(li)培養、二次發(fa)酵(jiao)、顯微鏡(jing)觀察等。

濾膜法

該方(fang)法主要過程(cheng)：加入(ru)10mL左(zuo)右(you)的無菌(jun)(jun)水(shui)于濾器(qi)中(zhong)(zhong)，然(ran)(ran)后(hou)摻入(ru)一些無菌(jun)(jun)水(shui)進行清潔(jie)濾器(qi)的內壁，再(zai)進行過濾，將濾膜放在M-FC培(pei)養(yang)基中(zhong)(zhong)，兩者之間不能夠(gou)有氣泡(pao)，然(ran)(ran)后(hou)進行密(mi)封(feng)，存(cun)放溫度為(wei)44.5℃，存(cun)放時間約24h，直到大(da)腸桿(gan)菌(jun)(jun)的菌(jun)(jun)群變成(cheng)藍色(se)或藍綠色(se)。然(ran)(ran)后(hou)記錄數據，估算每一單位(wei)的水(shui)溶液菌(jun)(jun)群數量(liang)，然(ran)(ran)后(hou)進行大(da)腸桿(gan)菌(jun)(jun)量(liang)值(zhi)的換算。

平板計數法

用無菌(jun)吸(xi)管吸(xi)取稀釋度樣(yang)品1mL，該樣(yang)品與乳糖膽鹽發酵(jiao)類(lei)似，然后(hou)將其(qi)放入(ru)無菌(jun)培(pei)(pei)養(yang)皿(min)中(zhong)(zhong)，再加入(ru)溫度于(yu)45℃下(xia)的CDLJJD顯(xian)色培(pei)(pei)養(yang)基(ji)中(zhong)(zhong)10mL的量，并進(jin)(jin)行(xing)培(pei)(pei)養(yang)皿(min)中(zhong)(zhong)溶液均(jun)勻混合，可(ke)以(yi)(yi)通(tong)過(guo)快(kuai)速(su)(su)轉(zhuan)動培(pei)(pei)養(yang)皿(min)的方式(shi)，等溶液凝(ning)固以(yi)(yi)后(hou)，加入(ru)5mL左右(you)，然后(hou)快(kuai)速(su)(su)搖(yao)晃培(pei)(pei)養(yang)基(ji)，使其(qi)可(ke)以(yi)(yi)均(jun)勻覆蓋(gai)平板表面(mian)，等其(qi)凝(ning)固以(yi)(yi)后(hou)，翻(fan)轉(zhuan)培(pei)(pei)養(yang)基(ji)，在溫度37℃中(zhong)(zhong)培(pei)(pei)養(yang)24h左右(you)，然后(hou)觀察其(qi)形態，顏色等變化(hua)。除此之外，平行(xing)設置(zhi)兩個稀釋度培(pei)(pei)養(yang)基(ji)，步驟是先稀釋樣(yang)本(ben)，通(tong)過(guo)稀釋后(hou)，微生物可(ke)以(yi)(yi)分散為單個細胞，然后(hou)進(jin)(jin)行(xing)一定環境條件(jian)下(xia)培(pei)(pei)養(yang)，直到(dao)其(qi)長成菌(jun)落為止，然后(hou)進(jin)(jin)行(xing)計(ji)算(suan)大(da)腸桿(gan)菌(jun)的數量，通(tong)過(guo)稀釋度和樣(yang)本(ben)數量進(jin)(jin)行(xing)計(ji)算(suan)。

免疫磁珠法

該分離(li)技術(shu)的(de)主要原理是以(yi)磁(ci)珠為載(zai)體(ti)和(he)(he)抗體(ti)，進行抗體(ti)和(he)(he)磁(ci)珠的(de)結合，然(ran)后通過磁(ci)力技術(shu)完成力學的(de)移動，進而(er)分離(li)大腸(chang)桿菌(jun)。與其他分離(li)細菌(jun)的(de)方(fang)式相(xiang)比，這樣的(de)方(fang)式方(fang)法具有一定(ding)的(de)優點，該技術(shu)可以(yi)提升樣本(ben)中病原性弧菌(jun)的(de)檢測成功率(lv)(lv)，并且免(mian)疫磁(ci)珠技術(shu)可以(yi)于不(bu)(bu)同菌(jun)種中對不(bu)(bu)同的(de)微生物進行處理，進而(er)在很大程度上提高檢測效率(lv)(lv)。

自動化儀器檢測法

主要是運(yun)用免疫自(zi)(zi)動(dong)化分析儀，該技(ji)術產(chan)生(sheng)并運(yun)用于1970年。隨著科技(ji)的(de)發展和進步，自(zi)(zi)動(dong)化儀器檢測(ce)(ce)技(ji)術應用非(fei)常廣泛，并且操(cao)作起來非(fei)常方(fang)便，可以節約很(hen)多(duo)時間，其受干(gan)擾的(de)程度較小，可以節省(sheng)人力物(wu)力的(de)投入，也可以提高(gao)檢測(ce)(ce)的(de)精確度。在現階(jie)段的(de)發展過程中，自(zi)(zi)動(dong)酶的(de)免疫檢測(ce)(ce)體(ti)系的(de)應用非(fei)常廣泛。

ATP生物發光法

在近些年的(de)(de)(de)發(fa)展過程(cheng)(cheng)中，生(sheng)物(wu)發(fa)光(guang)(guang)技術(shu)(shu)應用很(hen)廣(guang)泛，是一種比(bi)較快速的(de)(de)(de)檢(jian)(jian)測微生(sheng)物(wu)的(de)(de)(de)技術(shu)(shu)。在活性細胞中，ATP是其常見的(de)(de)(de)能量(liang)代(dai)謝產(chan)(chan)，可(ke)(ke)(ke)以(yi)(yi)提供細胞生(sheng)理活動(dong)過程(cheng)(cheng)中所需的(de)(de)(de)能量(liang)。并(bing)且(qie)，該技術(shu)(shu)可(ke)(ke)(ke)以(yi)(yi)在生(sheng)物(wu)體內(nei)可(ke)(ke)(ke)以(yi)(yi)在一定范(fan)圍(wei)內(nei)保持一定的(de)(de)(de)含量(liang)。食品(pin)中的(de)(de)(de)大腸桿菌(jun)檢(jian)(jian)測技術(shu)(shu)可(ke)(ke)(ke)以(yi)(yi)采用熒光(guang)(guang)光(guang)(guang)度(du)的(de)(de)(de)方法(fa)，因(yin)為生(sheng)物(wu)體發(fa)光(guang)(guang)的(de)(de)(de)原因(yin)是有熒光(guang)(guang)素酶的(de)(de)(de)作用，產(chan)(chan)生(sheng)了發(fa)光(guang)(guang)的(de)(de)(de)效果。該物(wu)質(zhi)來源于北美的(de)(de)(de)螢火蟲體內(nei)，可(ke)(ke)(ke)以(yi)(yi)催化熒光(guang)(guang)素的(de)(de)(de)氧(yang)化作用，不過，該物(wu)質(zhi)性質(zhi)不穩(wen)定，可(ke)(ke)(ke)以(yi)(yi)對(dui)熒光(guang)(guang)進行快速分解。另(ling)外，該檢(jian)(jian)測技術(shu)(shu)結(jie)果獲得過程(cheng)(cheng)是非常快的(de)(de)(de)，并(bing)且(qie)該設備攜帶(dai)方便，十(shi)分適用于現場檢(jian)(jian)測。

高溫消毒

可引起(qi)腹(fu)瀉的致病性大腸(chang)桿菌(jun)、傷寒(han)桿菌(jun)、霍亂弧菌(jun)等普通細菌(jun)繁(fan)殖(zhi)體(ti)，80℃熱水(shui)需要5-10分(fen)鐘(zhong)、沸水(shui)需要2-5分(fen)鐘(zhong)才能殺滅。