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大腸桿菌
#細菌# 0 0
大腸桿菌主要傳染源是因為在胃腸道感染患者的糞便中有大量大腸桿菌病原菌排至體外構成的,它們是動物腸道中的正常寄居菌,其中很小一部分在一定條件下引起疾病,大腸桿菌的血清型能夠引起人體或動物胃腸道感染,主要是由特定的菌毛抗原、致病性毒素等感染引起的,除胃腸道感染以外,還會引起尿道感染、關節炎、腦膜炎以及敗血型感染等,大腸桿菌還是造成產品召回的最常見細菌之一。
詳細(xi)介(jie)紹 PROFILE +

大腸桿菌(Escherichia coli),又叫大腸埃希氏菌,Escherich在1885年發(fa)(fa)現的。大腸桿菌是條件致病(bing)菌,在一(yi)定條件下可以(yi)引起人(ren)和多種動物發(fa)(fa)生胃腸道感染或尿道等(deng)多種局(ju)部組織器官(guan)感染。

簡介

大(da)(da)腸(chang)桿(gan)菌是動物腸(chang)道(dao)中的(de)正常寄居菌,其中很小一部分在一定條件下引起(qi)(qi)疾病(bing)。大(da)(da)腸(chang)桿(gan)菌的(de)血清型能夠引起(qi)(qi)人體或動物胃腸(chang)道(dao)感(gan)染,主要(yao)是由特(te)定的(de)菌毛抗原、致病(bing)性毒素(su)等感(gan)染引起(qi)(qi)的(de),除胃腸(chang)道(dao)感(gan)染以(yi)外(wai),還會(hui)引起(qi)(qi)尿道(dao)感(gan)染、關節(jie)炎(yan)、腦(nao)膜炎(yan)以(yi)及(ji)敗血型感(gan)染等。

種類

按致病作用

目前國際公認的(de)(de)分類,主要(yao)有六個種類的(de)(de)大(da)(da)(da)腸(chang)(chang)(chang)(chang)(chang)(chang)桿(gan)菌(jun),即能夠致(zhi)(zhi)使(shi)胃腸(chang)(chang)(chang)(chang)(chang)(chang)道(dao)(dao)(dao)感(gan)染的(de)(de)腸(chang)(chang)(chang)(chang)(chang)(chang)道(dao)(dao)(dao)致(zhi)(zhi)病性(xing)的(de)(de)大(da)(da)(da)腸(chang)(chang)(chang)(chang)(chang)(chang)桿(gan)菌(jun)(EPEC)、腸(chang)(chang)(chang)(chang)(chang)(chang)道(dao)(dao)(dao)產(chan)毒素性(xing)的(de)(de)大(da)(da)(da)腸(chang)(chang)(chang)(chang)(chang)(chang)桿(gan)菌(jun)(ETEC)、腸(chang)(chang)(chang)(chang)(chang)(chang)道(dao)(dao)(dao)侵襲性(xing)的(de)(de)大(da)(da)(da)腸(chang)(chang)(chang)(chang)(chang)(chang)桿(gan)菌(jun)(EIEC)、腸(chang)(chang)(chang)(chang)(chang)(chang)道(dao)(dao)(dao)出血性(xing)的(de)(de)大(da)(da)(da)腸(chang)(chang)(chang)(chang)(chang)(chang)桿(gan)菌(jun)(EHEC)、腸(chang)(chang)(chang)(chang)(chang)(chang)集(ji)聚(ju)性(xing)的(de)(de)大(da)(da)(da)腸(chang)(chang)(chang)(chang)(chang)(chang)桿(gan)菌(jun)(EAEC)以(yi)及近年來發現(xian)的(de)(de)腸(chang)(chang)(chang)(chang)(chang)(chang)產(chan)志賀樣毒素同時具有一(yi)定侵襲力的(de)(de)大(da)(da)(da)腸(chang)(chang)(chang)(chang)(chang)(chang)桿(gan)菌(jun)(ESIES),另外(wai),還有能夠致(zhi)(zhi)使(shi)尿(niao)道(dao)(dao)(dao)感(gan)染的(de)(de)尿(niao)道(dao)(dao)(dao)致(zhi)(zhi)病性(xing)的(de)(de)大(da)(da)(da)腸(chang)(chang)(chang)(chang)(chang)(chang)桿(gan)菌(jun)(UPEC),以(yi)及最新命名(ming)的(de)(de)腸(chang)(chang)(chang)(chang)(chang)(chang)道(dao)(dao)(dao)集(ji)聚(ju)性(xing)的(de)(de)黏附大(da)(da)(da)腸(chang)(chang)(chang)(chang)(chang)(chang)桿(gan)菌(jun)(EAggEC)。

按溶血性

根據(ju)大(da)腸桿(gan)菌(jun)的感(gan)染性(xing)狀能(neng)否產生溶血(xue)素和有無溶血(xue)的能(neng)力,可將大(da)腸桿(gan)菌(jun)分為兩大(da)類:即(ji)溶血(xue)性(xing)的大(da)腸桿(gan)菌(jun)和非溶血(xue)性(xing)的大(da)腸桿(gan)菌(jun)。

按產腸毒素性

根據(ju)大(da)腸(chang)桿(gan)菌(jun)(jun)(jun)在感染(ran)過程中能(neng)(neng)否產(chan)(chan)生(sheng)腸(chang)毒(du)素(su)的(de)(de)能(neng)(neng)力,可將大(da)腸(chang)桿(gan)菌(jun)(jun)(jun)分為兩大(da)類:即產(chan)(chan)腸(chang)毒(du)素(su)性(xing)的(de)(de)大(da)腸(chang)桿(gan)菌(jun)(jun)(jun)和非產(chan)(chan)腸(chang)毒(du)素(su)性(xing)的(de)(de)大(da)腸(chang)桿(gan)菌(jun)(jun)(jun)。產(chan)(chan)腸(chang)毒(du)素(su)性(xing)的(de)(de)大(da)腸(chang)桿(gan)菌(jun)(jun)(jun)是人和多種(zhong)動(dong)物的(de)(de)任何感染(ran)性(xing)腹(fu)瀉的(de)(de)重要(yao)病原,鑒(jian)定(ding)產(chan)(chan)腸(chang)毒(du)素(su)性(xing)的(de)(de)大(da)腸(chang)桿(gan)菌(jun)(jun)(jun)主要(yao)是測定(ding)所(suo)分離(li)大(da)腸(chang)桿(gan)菌(jun)(jun)(jun)分泌的(de)(de)腸(chang)毒(du)素(su)的(de)(de)類型。除(chu)此之外,也可以根據(ju)大(da)腸(chang)桿(gan)菌(jun)(jun)(jun)產(chan)(chan)生(sheng)腸(chang)毒(du)素(su)的(de)(de)能(neng)(neng)力,結合其對不同腸(chang)毒(du)素(su)的(de)(de)敏(min)感性(xing),而將大(da)腸(chang)桿(gan)菌(jun)(jun)(jun)分型,稱為腸(chang)毒(du)素(su)型。

生物學特征

理化特性

大(da)腸(chang)桿(gan)菌(jun)是(shi)短桿(gan)菌(jun),兩端呈(cheng)鈍圓形(xing),革(ge)蘭陰性。有時(shi)因環境不(bu)同,個別菌(jun)體出(chu)現(xian)近(jin)似球桿(gan)狀或(huo)長絲狀;大(da)腸(chang)桿(gan)菌(jun)多(duo)是(shi)單一或(huo)兩個存(cun)在,但不(bu)會排(pai)列呈(cheng)長鏈形(xing)狀;大(da)多(duo)數(shu)(shu)的(de)大(da)腸(chang)桿(gan)菌(jun)菌(jun)株具有莢膜或(huo)微莢膜結構,但是(shi)不(bu)能形(xing)成芽孢;多(duo)數(shu)(shu)大(da)腸(chang)桿(gan)菌(jun)菌(jun)株生長有菌(jun)毛(mao),其(qi)中一些菌(jun)毛(mao)是(shi)針對(dui)宿(su)主(zhu)及其(qi)他的(de)一些組織(zhi)或(huo)細胞具有黏附作(zuo)用的(de)宿(su)主(zhu)特(te)異性菌(jun)毛(mao)。

生化特性

大(da)腸(chang)桿菌(jun)(jun)的(de)生(sheng)化(hua)代謝非常(chang)活(huo)躍。大(da)腸(chang)桿菌(jun)(jun)可(ke)以發酵(jiao)葡萄(tao)糖產酸(suan)、產氣,個別(bie)菌(jun)(jun)株不產氣,大(da)腸(chang)桿菌(jun)(jun)還(huan)能發酵(jiao)多(duo)種碳(tan)水化(hua)合(he)物,也可(ke)以利用多(duo)種有機酸(suan)鹽(yan)。大(da)腸(chang)桿菌(jun)(jun)在常(chang)用的(de)生(sheng)化(hua)特(te)性(xing)(xing)檢測項目中,甲基紅(hong)試驗呈(cheng)陽性(xing)(xing),吲哚(duo)產生(sheng)和乳糖發酵(jiao)是(shi)陽性(xing)(xing)(個別(bie)菌(jun)(jun)株表(biao)現(xian)(xian)陰性(xing)(xing)),維-培(pei)試驗是(shi)陰性(xing)(xing),尿(niao)素酶(mei)和檸檬酸(suan)鹽(yan)利用呈(cheng)陰性(xing)(xing)(極個別(bie)菌(jun)(jun)株表(biao)現(xian)(xian)陽性(xing)(xing)),硝酸(suan)鹽(yan)還(huan)原試驗表(biao)現(xian)(xian)陽性(xing)(xing),氧化(hua)酶(mei)表(biao)現(xian)(xian)陰性(xing)(xing),氧化(hua)-發酵(jiao)試驗表(biao)現(xian)(xian)為F型。

致病作用特性

對(dui)人(ren)(ren)和多種動(dong)物(wu)來(lai)講,由于病(bing)原大腸(chang)(chang)桿菌(jun)常常傾(qing)向(xiang)具有(you)一定的(de)(de)(de)宿主特異性(xing),對(dui)人(ren)(ren)有(you)致病(bing)作用的(de)(de)(de)菌(jun)株常常是(shi)很少引起(qi)動(dong)物(wu)的(de)(de)(de)感(gan)染(ran),反之亦然(ran),據此可將病(bing)原大腸(chang)(chang)桿菌(jun)大致上將其(qi)劃(hua)分為兩種:即(ji)人(ren)(ren)病(bing)原大腸(chang)(chang)桿菌(jun)和動(dong)物(wu)病(bing)原大腸(chang)(chang)桿菌(jun)。動(dong)物(wu)的(de)(de)(de)致瀉(xie)性(xing)大腸(chang)(chang)桿菌(jun)已被明確的(de)(de)(de)特征主要是(shi)類似于ETEC的(de)(de)(de)菌(jun)株。UPEC是(shi)一群能夠引起(qi)人(ren)(ren)的(de)(de)(de)尿(niao)道(dao)感(gan)染(ran)最常見的(de)(de)(de)病(bing)原大腸(chang)(chang)桿菌(jun)。尿(niao)道(dao)感(gan)染(ran)是(shi)很少獨(du)立存(cun)在于動(dong)物(wu)的(de)(de)(de)大腸(chang)(chang)桿菌(jun)病(bing)中(zhong)的(de)(de)(de)感(gan)染(ran)癥狀(zhuang)。

流行病學特征

區域分布

大腸(chang)(chang)桿菌(jun)的(de)發生(sheng)與流行(xing)感染是(shi)呈世界性(xing)分布的(de),但大腸(chang)(chang)桿菌(jun)的(de)流行(xing)性(xing)還是(shi)存在一(yi)(yi)定(ding)(ding)的(de)區域分布特(te)征的(de)。這些區域分布的(de)特(te)征在人的(de)大腸(chang)(chang)桿菌(jun)感染中(zhong)表現的(de)更(geng)明顯些,最大的(de)可能是(shi)因為與區域間(jian)經(jing)濟條(tiao)件和社會衛生(sheng)狀(zhuang)況(kuang)等有一(yi)(yi)定(ding)(ding)聯系的(de)。

易感宿主

動(dong)物的大腸(chang)桿菌病可以發生(sheng)在多種家畜、家禽、養殖經濟動(dong)物以及其(qi)(qi)他陸生(sheng)動(dong)物和某些(xie)水產動(dong)物,其(qi)(qi)中豬和雞是最為易感的,而且危(wei)害十分嚴重。

發病季節

大腸(chang)桿(gan)菌(jun)在(zai)動(dong)物群(qun)體間的(de)(de)(de)感染(ran)的(de)(de)(de)季(ji)節發(fa)病特(te)征(zheng)不是(shi)(shi)非常明顯。在(zai)一(yi)年四(si)季(ji)豬(zhu)均可發(fa)生,但只要是(shi)(shi)發(fa)生在(zai)豬(zhu)的(de)(de)(de)產仔期至(zhi)斷乳期,這(zhe)與(yu)豬(zhu)的(de)(de)(de)易感日(ri)齡相(xiang)關(guan)聯。犢牛和羔羊多發(fa)生于冬季(ji)和春季(ji)。其他動(dong)物的(de)(de)(de)大腸(chang)桿(gan)菌(jun)感染(ran)在(zai)常年均有發(fa)生,季(ji)節性不明顯。

傳染源與傳播途徑

人(ren)的(de)(de)大腸(chang)桿(gan)菌病(bing)的(de)(de)主(zhu)要(yao)傳(chuan)染源(yuan)是(shi)因(yin)為(wei)在(zai)胃腸(chang)道感(gan)染患(huan)者的(de)(de)糞便中(zhong)有(you)大量大腸(chang)桿(gan)菌病(bing)原(yuan)菌排至體外構成(cheng)的(de)(de)。大腸(chang)桿(gan)菌在(zai)人(ren)之間(jian)的(de)(de)傳(chuan)播途(tu)徑多是(shi)通(tong)過糞-口(kou)這一(yi)傳(chuan)播途(tu)徑,在(zai)一(yi)定的(de)(de)條(tiao)件下可引起大腸(chang)桿(gan)菌病(bing)散發(fa)或(huo)流行(xing)。

檢測方法

食品中(zhong)的(de)(de)大腸桿(gan)菌進行快速準確的(de)(de)檢測已(yi)成為了人(ren)們經(jing)常關注的(de)(de)問題。下(xia)面闡述(shu)食品中(zhong)的(de)(de)大腸桿(gan)菌檢測的(de)(de)方(fang)法及分析(xi)。

發酵法

這種(zhong)方(fang)法(fa)主要是在(zai)44.5℃下的培(pei)養(yang)基(ji)上進行(xing)大腸桿菌的培(pei)養(yang),該培(pei)養(yang)基(ji)含(han)有(you)熒(ying)光(guang)底物(wu),需(xu)要培(pei)養(yang)24h。然后對熒(ying)光(guang)底物(wu)進行(xing)釋放,需(xu)要采(cai)用葡萄糖(tang)醛酸進行(xing),讓培(pei)養(yang)基(ji)能夠(gou)在(zai)紫(zi)外光(guang)的照射下發出熒(ying)光(guang)。采(cai)用這樣(yang)的方(fang)式方(fang)法(fa),還可(ke)以(yi)進行(xing)統計學(xue)估計原(yuan)來樣(yang)品中(zhong)的菌落。主要步(bu)驟包括(kuo)發酵、分離培(pei)養(yang)、二(er)次發酵、顯微鏡觀察(cha)等。

濾膜法

該方法主要過(guo)程:加(jia)入10mL左右的(de)無菌(jun)水于濾器中(zhong),然(ran)后摻(chan)入一些無菌(jun)水進行清潔(jie)濾器的(de)內壁,再進行過(guo)濾,將濾膜放在M-FC培養基中(zhong),兩者之間(jian)不能(neng)夠有氣(qi)泡(pao),然(ran)后進行密封,存放溫(wen)度為44.5℃,存放時(shi)間(jian)約(yue)24h,直(zhi)到大(da)腸(chang)桿菌(jun)的(de)菌(jun)群變成(cheng)藍(lan)色或藍(lan)綠(lv)色。然(ran)后記錄數據,估算每一單位的(de)水溶液菌(jun)群數量,然(ran)后進行大(da)腸(chang)桿菌(jun)量值的(de)換算。

平板計數法

用無(wu)菌吸管吸取稀(xi)(xi)釋(shi)度(du)(du)樣品1mL,該樣品與乳糖膽鹽(yan)發酵類似,然(ran)(ran)后(hou)將其放入(ru)(ru)無(wu)菌培(pei)養(yang)皿(min)(min)中(zhong),再加(jia)入(ru)(ru)溫度(du)(du)于45℃下的(de)CDLJJD顯(xian)色培(pei)養(yang)基中(zhong)10mL的(de)量,并進(jin)行培(pei)養(yang)皿(min)(min)中(zhong)溶(rong)液均(jun)勻(yun)混合,可(ke)以通過快速(su)轉動培(pei)養(yang)皿(min)(min)的(de)方式,等溶(rong)液凝固以后(hou),加(jia)入(ru)(ru)5mL左右,然(ran)(ran)后(hou)快速(su)搖晃培(pei)養(yang)基,使其可(ke)以均(jun)勻(yun)覆蓋平板表面(mian),等其凝固以后(hou),翻轉培(pei)養(yang)基,在溫度(du)(du)37℃中(zhong)培(pei)養(yang)24h左右,然(ran)(ran)后(hou)觀察(cha)其形態,顏色等變化。除此之(zhi)外,平行設(she)置兩(liang)個稀(xi)(xi)釋(shi)度(du)(du)培(pei)養(yang)基,步驟是(shi)先稀(xi)(xi)釋(shi)樣本,通過稀(xi)(xi)釋(shi)后(hou),微生(sheng)物可(ke)以分散為(wei)單個細胞,然(ran)(ran)后(hou)進(jin)行一(yi)定環境條(tiao)件下培(pei)養(yang),直到其長成菌落為(wei)止,然(ran)(ran)后(hou)進(jin)行計算大腸桿菌的(de)數量,通過稀(xi)(xi)釋(shi)度(du)(du)和樣本數量進(jin)行計算。

免疫磁珠法

該分(fen)離(li)技術(shu)(shu)的(de)(de)(de)主要(yao)原理(li)是以磁珠為載體(ti)和(he)抗(kang)體(ti),進(jin)(jin)行抗(kang)體(ti)和(he)磁珠的(de)(de)(de)結合,然后(hou)通過磁力技術(shu)(shu)完成力學的(de)(de)(de)移(yi)動,進(jin)(jin)而分(fen)離(li)大腸桿菌(jun)(jun)。與其他分(fen)離(li)細(xi)菌(jun)(jun)的(de)(de)(de)方(fang)式相比,這樣(yang)的(de)(de)(de)方(fang)式方(fang)法(fa)具有(you)一定的(de)(de)(de)優(you)點,該技術(shu)(shu)可以提(ti)升(sheng)樣(yang)本中(zhong)病原性弧菌(jun)(jun)的(de)(de)(de)檢測(ce)成功率,并(bing)且免疫磁珠技術(shu)(shu)可以于(yu)不同菌(jun)(jun)種中(zhong)對(dui)不同的(de)(de)(de)微生(sheng)物進(jin)(jin)行處理(li),進(jin)(jin)而在很(hen)大程度(du)上(shang)提(ti)高檢測(ce)效率。

自動化儀器檢測法

主要是運(yun)用免疫自(zi)(zi)動化(hua)(hua)分析儀(yi),該(gai)技(ji)術產生并(bing)運(yun)用于1970年。隨著科技(ji)的(de)發(fa)展(zhan)和進步(bu),自(zi)(zi)動化(hua)(hua)儀(yi)器檢(jian)測(ce)(ce)技(ji)術應用非(fei)常廣(guang)泛(fan),并(bing)且(qie)操作起來非(fei)常方(fang)便(bian),可以(yi)節約很(hen)多時間,其受干擾(rao)的(de)程度較小(xiao),可以(yi)節省人(ren)力(li)物(wu)力(li)的(de)投(tou)入,也可以(yi)提高檢(jian)測(ce)(ce)的(de)精(jing)確(que)度。在(zai)現階段的(de)發(fa)展(zhan)過程中,自(zi)(zi)動酶的(de)免疫檢(jian)測(ce)(ce)體系(xi)的(de)應用非(fei)常廣(guang)泛(fan)。

ATP生物發光法

在(zai)(zai)近些年的(de)(de)發展過程(cheng)(cheng)中(zhong),生(sheng)物(wu)(wu)發光(guang)(guang)(guang)技(ji)(ji)術(shu)應用(yong)很廣泛,是(shi)一(yi)種比較快速(su)的(de)(de)檢測(ce)微生(sheng)物(wu)(wu)的(de)(de)技(ji)(ji)術(shu)。在(zai)(zai)活性細(xi)胞中(zhong),ATP是(shi)其(qi)常(chang)見(jian)的(de)(de)能量代謝產,可(ke)以提供細(xi)胞生(sheng)理(li)活動過程(cheng)(cheng)中(zhong)所需的(de)(de)能量。并且,該(gai)技(ji)(ji)術(shu)可(ke)以在(zai)(zai)生(sheng)物(wu)(wu)體(ti)內(nei)可(ke)以在(zai)(zai)一(yi)定范圍內(nei)保持一(yi)定的(de)(de)含量。食品中(zhong)的(de)(de)大腸(chang)桿菌檢測(ce)技(ji)(ji)術(shu)可(ke)以采(cai)用(yong)熒(ying)光(guang)(guang)(guang)光(guang)(guang)(guang)度的(de)(de)方法,因(yin)(yin)為生(sheng)物(wu)(wu)體(ti)發光(guang)(guang)(guang)的(de)(de)原因(yin)(yin)是(shi)有熒(ying)光(guang)(guang)(guang)素酶的(de)(de)作(zuo)用(yong),產生(sheng)了發光(guang)(guang)(guang)的(de)(de)效果(guo)。該(gai)物(wu)(wu)質來源于(yu)北美的(de)(de)螢火蟲體(ti)內(nei),可(ke)以催(cui)化熒(ying)光(guang)(guang)(guang)素的(de)(de)氧化作(zuo)用(yong),不過,該(gai)物(wu)(wu)質性質不穩定,可(ke)以對熒(ying)光(guang)(guang)(guang)進行快速(su)分(fen)解。另外,該(gai)檢測(ce)技(ji)(ji)術(shu)結(jie)果(guo)獲得(de)過程(cheng)(cheng)是(shi)非常(chang)快的(de)(de),并且該(gai)設備(bei)攜帶方便,十分(fen)適用(yong)于(yu)現(xian)場檢測(ce)。

高溫消毒

可引起腹(fu)瀉的致(zhi)病性大(da)腸桿(gan)菌、傷寒桿(gan)菌、霍(huo)亂弧菌等(deng)普(pu)通細菌繁殖體,80℃熱(re)水(shui)需(xu)要5-10分(fen)(fen)鐘、沸水(shui)需(xu)要2-5分(fen)(fen)鐘才能殺滅。

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