一、什么是探針
探針是電測試的接(jie)觸媒介,為高端精密型電子五(wu)金元(yuan)器件。
二、探針是干什么用的
探針(zhen)是一(yi)小段單(dan)(dan)鏈(lian)(lian)DNA或者RNA片(pian)段(大約是20到(dao)500bp),用于(yu)檢測與(yu)(yu)其互補的核(he)(he)酸(suan)(suan)序列。雙鏈(lian)(lian)DNA加熱變性(xing)成(cheng)為單(dan)(dan)鏈(lian)(lian),隨后用放射性(xing)同位素(通常用磷-32)、熒光(guang)染料或者酶(如辣根過氧化物酶)標(biao)記成(cheng)為探針(zhen)。磷-32通常被摻(chan)入(ru)組成(cheng)DNA的四種核(he)(he)苷酸(suan)(suan)之一(yi)的磷酸(suan)(suan)基團中,而熒光(guang)染料和酶與(yu)(yu)核(he)(he)酸(suan)(suan)序列以共價鍵相連(lian)。
當(dang)將探針(zhen)與(yu)樣品雜(za)交(jiao)時,探針(zhen)和與(yu)其互補的(de)核酸(DNA或RNA)序列(lie)(lie)通過氫鍵(jian)緊密相連,隨后,未(wei)被雜(za)交(jiao)的(de)多(duo)余探針(zhen)被洗去。最后,根據(ju)探針(zhen)的(de)標記物種類,可進行放射自顯影、熒光發光、酶聯化學發光等方(fang)法(fa)來(lai)判斷樣品中是(shi)否(fou),或者何(he)位置含(han)有被測序列(lie)(lie)(即與(yu)探針(zhen)互補的(de)序列(lie)(lie))。
三、探針和引物的區別
1、兩者的用途不同:
(1)引物設(she)計的用(yong)途:用(yong)于(yu)PCR擴(kuo)增技術。
(2)探(tan)針(zhen)設計的(de)用(yong)途:用(yong)于標記待定的(de)核苷酸(suan)片斷,用(yong)與特異性(xing)地、定量(liang)地檢測核酸(suan)的(de)量(liang)。
2、兩者的實質不同:
(1)引物設計(ji)的實質(zhi):一(yi)小(xiao)段單鏈(lian)DNA或RNA,在核(he)酸合(he)成反應時,作為每個多核(he)苷(gan)酸鏈(lian)進行延伸的出發點而起(qi)作用的多核(he)苷(gan)酸鏈(lian)。
(2)探針設計的實(shi)質(zhi):在紫(zi)外(wai)-可見-近紅外(wai)區有特征(zheng)熒光(guang),并且(qie)其(qi)熒光(guang)性(xing)質(zhi)(激發和發射波長、強(qiang)度(du)、壽命、偏振等(deng)(deng))可隨所處環境(jing)的性(xing)質(zhi),如(ru)極性(xing)、折射率、粘(zhan)度(du)等(deng)(deng)改變而靈敏地改變的一(yi)類熒光(guang)性(xing)分子。