一、什么是探針
探針是電(dian)測試的(de)接觸(chu)媒介(jie),為高端精密型電(dian)子五金元器件(jian)。
二、探針是干什么用的
探(tan)針是一小段(duan)單鏈DNA或者RNA片段(duan)(大約是20到(dao)500bp),用于(yu)檢測與(yu)其(qi)互補(bu)的(de)核(he)酸序列。雙鏈DNA加熱變性(xing)成(cheng)為(wei)單鏈,隨后用放射性(xing)同位素(通常用磷-32)、熒光染料或者酶(如辣根過氧(yang)化物酶)標記成(cheng)為(wei)探(tan)針。磷-32通常被摻入組成(cheng)DNA的(de)四種核(he)苷(gan)酸之一的(de)磷酸基團中(zhong),而熒光染料和酶與(yu)核(he)酸序列以共價鍵相連。
當將(jiang)探針(zhen)與(yu)(yu)樣(yang)品雜(za)交時,探針(zhen)和與(yu)(yu)其(qi)互(hu)補(bu)的核酸(DNA或(huo)RNA)序列通過氫(qing)鍵緊(jin)密相連(lian),隨后(hou),未被(bei)雜(za)交的多余探針(zhen)被(bei)洗去。最后(hou),根(gen)據探針(zhen)的標(biao)記物種類,可進(jin)行放射(she)自顯影、熒光(guang)(guang)發光(guang)(guang)、酶(mei)聯化學發光(guang)(guang)等方法來判(pan)斷(duan)樣(yang)品中(zhong)是否,或(huo)者何(he)位置含(han)有被(bei)測序列(即(ji)與(yu)(yu)探針(zhen)互(hu)補(bu)的序列)。
三、探針和引物的區別
1、兩者的用途不同:
(1)引物設計(ji)的用途(tu):用于PCR擴增技(ji)術。
(2)探(tan)針設計的用途:用于標記待(dai)定(ding)的核苷酸片斷,用與特(te)異性地(di)(di)、定(ding)量(liang)(liang)地(di)(di)檢測核酸的量(liang)(liang)。
2、兩者的實質不同:
(1)引(yin)物設計的實(shi)質:一小段單鏈DNA或(huo)RNA,在核(he)酸合(he)成反應時,作為每個多(duo)核(he)苷(gan)(gan)酸鏈進(jin)行(xing)延伸的出(chu)發(fa)點而起作用的多(duo)核(he)苷(gan)(gan)酸鏈。
(2)探針設計(ji)的實質:在紫(zi)外(wai)-可(ke)見-近紅外(wai)區有特征(zheng)熒光(guang)(guang),并且其熒光(guang)(guang)性(xing)質(激發和發射(she)波(bo)長、強(qiang)度(du)、壽命、偏振等(deng))可(ke)隨所處環境(jing)的性(xing)質,如極(ji)性(xing)、折(zhe)射(she)率(lv)、粘度(du)等(deng)改(gai)(gai)變而靈敏地(di)改(gai)(gai)變的一類熒光(guang)(guang)性(xing)分子。