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肉(rou)毒(du)(du)(du)(du)(du)毒(du)(du)(du)(du)(du)素是由厭氧的(de)肉(rou)毒(du)(du)(du)(du)(du)梭菌在(zai)生(sheng)長繁殖過程中(zhong)(zhong)產生(sheng)的(de)一種細菌外(wai)毒(du)(du)(du)(du)(du)素,它能引起死(si)亡率極高的(de)肉(rou)毒(du)(du)(du)(du)(du)中(zhong)(zhong)毒(du)(du)(du)(du)(du)。肉(rou)毒(du)(du)(du)(du)(du)梭菌及其毒(du)(du)(du)(du)(du)素根據毒(du)(du)(du)(du)(du)素抗原(yuan)性(xing)的(de)不(bu)同,將其分為(wei)A、B、C、D、E、F和G7個型(xing)(xing)。其中(zhong)(zhong)A、B、E、F為(wei)人中(zhong)(zhong)毒(du)(du)(du)(du)(du)型(xing)(xing)別,C、D型(xing)(xing)為(wei)動(dong)物(wu)和家禽的(de)中(zhong)(zhong)毒(du)(du)(du)(du)(du)型(xing)(xing)別。C型(xing)(xing)肉(rou)毒(du)(du)(du)(du)(du)梭菌在(zai)自然界(jie)廣泛分布。飲食污染有C型(xing)(xing)肉(rou)毒(du)(du)(du)(du)(du)梭菌特別是C型(xing)(xing)肉(rou)毒(du)(du)(du)(du)(du)毒(du)(du)(du)(du)(du)素的(de)水源或(huo)草料的(de)動(dong)物(wu)有可能發生(sheng)C型(xing)(xing)肉(rou)毒(du)(du)(du)(du)(du)中(zhong)(zhong)毒(du)(du)(du)(du)(du)。動(dong)物(wu)中(zhong)(zhong)毒(du)(du)(du)(du)(du)后, 20小時左右甚至幾小時內(nei)即(ji)可致死(si),死(si)亡率極高,常(chang)常(chang)來不(bu)及用抗毒(du)(du)(du)(du)(du)素進行特異性(xing)治療。
肉(rou)(rou)毒(du)(du)中毒(du)(du)發生后(hou),若不及時采取措施,則會引起其(qi)它(ta)食肉(rou)(rou)動(dong)物因食用中毒(du)(du)動(dong)物尸體(ti)而死(si)亡或攜帶肉(rou)(rou)毒(du)(du)梭菌,造成肉(rou)(rou)毒(du)(du)梭菌在自然界(jie)中的(de)(de)傳(chuan)播與潛伏,有可(ke)能引起范圍更(geng)廣、更(geng)嚴(yan)重的(de)(de)肉(rou)(rou)毒(du)(du)中毒(du)(du),并危害人類健康。用C型(xing)肉(rou)(rou)毒(du)(du)類毒(du)(du)素疫苗進行預防免疫是防止動(dong)物肉(rou)(rou)毒(du)(du)中毒(du)(du)的(de)(de)最有效辦(ban)法之(zhi)一。
肉(rou)毒(du)(du)毒(du)(du)素(su)不耐熱，90℃2分鐘(zhong)可(ke)完全破壞;不耐堿(jian)(jian)，溶(rong)(rong)解在pH11的堿(jian)(jian)性(xing)溶(rong)(rong)液中3分鐘(zhong)就可(ke)滅活(huo)(huo)。肉(rou)毒(du)(du)毒(du)(du)素(su)溶(rong)(rong)液加0.6%的福爾馬林37℃下(xia)作用一個月以上可(ke)失去毒(du)(du)性(xing)，但仍(reng)保持抗原(yuan)性(xing)和免疫原(yuan)性(xing)，成為類毒(du)(du)素(su)。本毒(du)(du)素(su)對乙醇(chun)穩(wen)(wen)定;但可(ke)被鹵素(su)滅活(huo)(huo)。粗制毒(du)(du)素(su)較精(jing)制毒(du)(du)素(su)穩(wen)(wen)定。毒(du)(du)素(su)溶(rong)(rong)液在pH6.0，4℃下(xia)保存(cun)，效價(jia)可(ke)保持半(ban)年(nian)不變。凍干毒(du)(du)素(su)在低溫條件(jian)下(xia)可(ke)長期保存(cun)，毒(du)(du)性(xing)下(xia)降緩(huan)慢。
生化武器(qi)變成美容秘方
據了(le)解，“肉(rou)毒(du)毒(du)素”實際上是“肉(rou)毒(du)桿(gan)菌(jun)毒(du)素”的俗稱，又名“Botox”和“Myobloc”，是肉(rou)毒(du)桿(gan)菌(jun)在繁殖過程中(zhong)分泌的毒(du)性蛋白質，具有很強(qiang)的神經毒(du)性。
據介紹，肉(rou)毒毒素(su)最早(zao)被用(yong)來(lai)(lai)作為生(sheng)(sheng)化武器，它(ta)能(neng)破壞生(sheng)(sheng)物(wu)的(de)(de)神(shen)經系統，使(shi)人出現頭(tou)暈、呼吸困難、肌肉(rou)乏力等癥(zheng)狀；后來(lai)(lai)，它(ta)被醫學(xue)界(jie)用(yong)來(lai)(lai)治療面(mian)部痙攣和(he)其他(ta)肌肉(rou)運動(dong)紊亂(luan)癥(zheng)。在(zai)1986年，加拿(na)大一(yi)位眼科教授發現肉(rou)毒毒素(su)能(neng)讓患者眼部的(de)(de)皺(zhou)紋消失(shi)，他(ta)向外界(jie)公布，引發了美容史上的(de)(de)所(suo)謂“Botox革命”。此后，整(zheng)(zheng)容界(jie)將(jiang)它(ta)的(de)(de)功能(neng)擴(kuo)大，比如用(yong)它(ta)瘦臉(lian)、塑(su)小腿等。肉(rou)毒毒素(su)具有很強的(de)(de)毒性，注(zhu)射在(zai)人體是否安全？據一(yi)整(zheng)(zheng)形醫院(yuan)的(de)(de)劉姓主(zhu)任(ren)醫師(shi)介紹，用(yong)于整(zheng)(zheng)容的(de)(de)肉(rou)毒毒素(su)比起生(sheng)(sheng)化武器來(lai)(lai)，稀釋了40萬(wan)倍。肉(rou)毒毒素(su)能(neng)阻斷(duan)神(shen)經和(he)肌肉(rou)之間的(de)(de)“信息傳導”，使(shi)過度收縮的(de)(de)肌肉(rou)放松舒展，皺(zhou)紋便(bian)隨之消失(shi)。
對于肉毒(du)(du)毒(du)(du)素在國內(nei)的(de)(de)使(shi)用歷(li)史，很多醫生表示具體開始的(de)(de)年(nian)(nian)份不太清楚，但(dan)在我國使(shi)用已(yi)有10多年(nian)(nian)。資料(liao)顯示，我國是(shi)(shi)繼英國和美國之后(hou)第三(san)個能(neng)自行生產(chan)這種(zhong)美容用途產(chan)品(pin)的(de)(de)國家，并在1999年(nian)(nian)開始運用。據業(ye)內(nei)人士介紹，去年(nian)(nian)，國內(nei)部分肉毒(du)(du)毒(du)(du)素產(chan)品(pin)曾(ceng)經因為提純(chun)過程出現問題(ti)而(er)影響(xiang)產(chan)品(pin)質量，但(dan)是(shi)(shi)后(hou)來生產(chan)廠(chang)家很快就改正了(le)這些問題(ti)。
對于其安(an)全性，不少醫生(sheng)表示，肉毒毒素在美容(rong)方(fang)面的運用(yong)非常微量(liang)，不會對人體造(zao)成影響(xiang)，相對于其他除皺產品，它(ta)的作(zuo)用(yong)和安(an)全性是無可替代的，是目前去除動(dong)力性皺紋最好的方(fang)法。
從(cong)1964年由肉毒(du)桿菌中(zhong)(zhong)分離出毒(du)素(su)(su)結(jie)晶(jing)至今已獲得七種(zhong)（A，B，C，D，E，F和(he)G）類型的毒(du)素(su)(su)，能引(yin)起人員中(zhong)(zhong)毒(du)的主要是A、B和(he)E型毒(du)素(su)(su)，其中(zhong)(zhong)以(yi)A型軍(jun)用意義最大，A型結(jie)晶(jing)毒(du)素(su)(su)是由19種(zhong)氨基酸組成(cheng)的單一(yi)蛋白質(zhi)，分子量(liang)為90～120萬，化學結(jie)構目(mu)前尚不清(qing)楚。
SDS-PAGE電(dian)泳結果顯(xian)示有(you)分(fen)子(zi)量(liang)不同的(de)帶(dai),為構(gou)成C型肉毒(du)(du)(du)前體毒(du)(du)(du)素(su)的(de)各(ge)亞基。其中分(fen)子(zi)量(liang)為100kD的(de)帶(dai)是(shi)神(shen)經(jing)(jing)毒(du)(du)(du)素(su)的(de)重鏈(lian)(lian),分(fen)子(zi)量(liang)為50kD的(de)帶(dai)是(shi)神(shen)經(jing)(jing)毒(du)(du)(du)素(su)的(de)輕鏈(lian)(lian),其它分(fen)子(zi)量(liang)不等(deng)的(de)帶(dai)為血(xue)(xue)凝(ning)素(su)各(ge)亞單位和(he)非(fei)血(xue)(xue)凝(ning)素(su)非(fei)毒(du)(du)(du)素(su)成份。它們對保持C型肉毒(du)(du)(du)神(shen)經(jing)(jing)毒(du)(du)(du)素(su)的(de)穩定和(he)毒(du)(du)(du)性作用的(de)發揮起(qi)主(zhu)要作用。
肉毒(du)(du)毒(du)(du)素通常是由(you)神經(jing)毒(du)(du)素和血凝素組成的(de)(de)復(fu)合形式存在。A型(xing)肉毒(du)(du)毒(du)(du)素的(de)(de)純品是一(yi)種(zhong)白色晶體粉末(mo)，易溶于水，但穩定性較差(cha)。受熱、機械力和氧的(de)(de)作用(yong)而(er)(er)降解。粉末(mo)狀的(de)(de)毒(du)(du)素可長期貯存而(er)(er)不(bu)失活性，肉毒(du)(du)毒(du)(du)素染毒(du)(du)的(de)(de)食物和水源，一(yi)般其(qi)毒(du)(du)性可保持數天乃至一(yi)周，肉毒(du)(du)毒(du)(du)素不(bu)被(bei)胃腸液所破壞，易經(jing)消化道(dao)中毒(du)(du)。
A型(xing)肉(rou)(rou)毒(du)(du)(du)(du)(du)毒(du)(du)(du)(du)(du)素(su)(su)的氣(qi)溶膠對(dui)人吸入的致死量為(wei)0.3μg，LCt50為(wei)0.1～0.5mg·min/m3，靜(jing)脈注(zhu)射致死量為(wei)0.15～zaaz0.3μg，口服致死劑(ji)量為(wei)8～10μg，該毒(du)(du)(du)(du)(du)素(su)(su)對(dui)小鼠的毒(du)(du)(du)(du)(du)性(xing)LD50值約(yue)為(wei)3×10–5~3×10–4μg。野(ye)外試驗表明，由于大(da)(da)規模施放方法尚(shang)未解決，肉(rou)(rou)毒(du)(du)(du)(du)(du)毒(du)(du)(du)(du)(du)素(su)(su)通過呼吸道(dao)中(zhong)毒(du)(du)(du)(du)(du)的致死效應，并(bing)不比等量神經性(xing)毒(du)(du)(du)(du)(du)劑(ji)大(da)(da)。當(dang)前以污(wu)染(ran)(ran)(ran)食物(wu)和(he)水(shui)源(yuan)通過消化道(dao)染(ran)(ran)(ran)毒(du)(du)(du)(du)(du)為(wei)其主(zhu)要的中(zhong)毒(du)(du)(du)(du)(du)途徑(jing)。另據(ju)報道(dao)，美軍利用肉(rou)(rou)毒(du)(du)(du)(du)(du)毒(du)(du)(du)(du)(du)素(su)(su)污(wu)染(ran)(ran)(ran)小型(xing)武(wu)器(qi)的彈(dan)頭(tou)，以增強殺傷效應，現(xian)已生產這種(zhong)武(wu)器(qi)。平時主(zhu)要是攝入被肉(rou)(rou)毒(du)(du)(du)(du)(du)毒(du)(du)(du)(du)(du)素(su)(su)污(wu)染(ran)(ran)(ran)的肉(rou)(rou)類和(he)罐頭(tou)等食品而中(zhong)毒(du)(du)(du)(du)(du)，死亡率大(da)(da)約(yue)為(wei)25～50%。
業(ye)已闡明，在(zai)體(ti)內(nei)肉毒(du)(du)毒(du)(du)素特(te)異性的(de)(de)(de)與(yu)膽(dan)(dan)堿(jian)(jian)能(neng)神(shen)經(jing)末梢突觸前(qian)(qian)膜(mo)(mo)的(de)(de)(de)表面(mian)受體(ti)相(xiang)結合(he)(he)，然后由于(yu)吸(xi)附性胞(bao)飲而內(nei)轉(zhuan)進入(ru)細胞(bao)內(nei)稱為毒(du)(du)素的(de)(de)(de)內(nei)轉(zhuan)（internalization），使囊泡(pao)不(bu)能(neng)再與(yu)突觸前(qian)(qian)膜(mo)(mo)融合(he)(he)，從而有效地阻抑了(le)膽(dan)(dan)堿(jian)(jian)能(neng)神(shen)經(jing)介質——乙酰膽(dan)(dan)堿(jian)(jian)的(de)(de)(de)釋(shi)放。與(yu)此同時，毒(du)(du)素與(yu)突觸前(qian)(qian)膜(mo)(mo)結合(he)(he)，還阻塞了(le)神(shen)經(jing)細胞(bao)膜(mo)(mo)的(de)(de)(de)鈣離(li)子通(tong)道，從而干(gan)擾了(le)細胞(bao)外(wai)鈣離(li)子進入(ru)神(shen)經(jing)細胞(bao)內(nei)以觸發胞(bao)吐和釋(shi)放乙酰膽(dan)(dan)堿(jian)(jian)的(de)(de)(de)能(neng)力。乙酰膽(dan)(dan)堿(jian)(jian)釋(shi)放的(de)(de)(de)抑制，有效地阻斷了(le)膽(dan)(dan)堿(jian)(jian)能(neng)神(shen)經(jing)傳導的(de)(de)(de)生理功能(neng)，尤(you)其是神(shen)經(jing)一肌(ji)肉接頭部位特(te)別敏感，引(yin)起(qi)全(quan)身(shen)隨意肌(ji)松弛麻痹(bi)，呼(hu)吸(xi)肌(ji)麻痹(bi)是致死的(de)(de)(de)主要原因。
肉(rou)毒毒素經消化(hua)道吸收中毒，一般經過12～72小時的潛(qian)伏期，開始出現(xian)全身中毒癥狀。
早期(qi)癥狀(zhuang)有(you)(you)惡心(xin)、嘔吐及(ji)腹瀉等(deng)，繼之出現頭痛、頭昏、眩暈、軟弱無力，中(zhong)毒(du)(du)的重要(yao)特征(zheng)為(wei)視力紊亂：復(fu)(fu)視、斜視、瞳孔散(san)大、視力模糊，同時(shi)伴有(you)(you)眼(yan)球震顫(zhan)，這是眼(yan)內外肌麻痹(bi)的結果(guo)。嚴重病人(ren)有(you)(you)吞噬(shi)、咀嚼、語言、呼吸等(deng)困難，排痰及(ji)抬頭困難，共濟失調等(deng)，神志清楚。癥狀(zhuang)繼續發(fa)展則出現進行性呼吸困難，全(quan)身肌肉(rou)松弛性麻痹(bi)。繼則脈搏加快(kuai)，血壓下降，短時(shi)間(jian)抽搐(chu)，意(yi)識喪(sang)失，最終因呼吸衰(shuai)竭、心(xin)力衰(shuai)竭或繼發(fa)肺炎(yan)等(deng)而(er)死亡。通過呼吸道吸入中(zhong)毒(du)(du)，一般(ban)癥狀(zhuang)發(fa)展迅速且嚴重。其他(ta)途徑中(zhong)毒(du)(du)的臨床癥狀(zhuang)，因毒(du)(du)劑(ji)的劑(ji)量(liang)不同而(er)異。病人(ren)恢復(fu)(fu)較緩(huan)慢，視覺(jue)障礙恢復(fu)(fu)特慢，有(you)(you)時(shi)需數月之久。
肉(rou)毒抗毒素對本病(bing)有特效，必須(xu)盡早給予，根據病(bing)情輕重，靜(jing)肌或肌肉(rou)注射1～2萬單位，必要(yao)時可重復注射。盡早進行催吐、洗(xi)胃、導(dao)瀉、灌腸，以排出尚未吸(xi)收的毒劑。及(ji)時肌肉(rou)或皮下注射新(xin)斯的明、乙酰(xian)膽堿(jian)、毛果云香堿(jian)及(ji)鈣制劑等，可顯著(zhu)減(jian)輕中毒癥狀(zhuang)，呼(hu)吸(xi)困難者(zhe)，給氧及(ji)人工呼(hu)吸(xi)，必要(yao)時行氣管(guan)切開術。
吞咽(yan)困(kun)難者用鼻飼或靜滴葡萄糖生(sheng)理鹽水，發(fa)生(sheng)肺炎等繼發(fa)感染時給與適(shi)宜(yi)的抗生(sheng)素。患者必須(xu)臥床休息、保溫、加強護(hu)理。
肉毒桿菌(jun)毒素/BOTULINUM TOXIN
這種(zhong)毒(du)(du)(du)(du)(du)素(su)(su)起源(yuan)于(yu)肉毒(du)(du)(du)(du)(du)梭菌(jun)(jun)，它(ta)能(neng)引起肉毒(du)(du)(du)(du)(du)中(zhong)毒(du)(du)(du)(du)(du)。純粹(cui)的(de)(de)(de)(de)(de)肉毒(du)(du)(du)(du)(du)桿菌(jun)(jun)毒(du)(du)(du)(du)(du)素(su)(su)是已(yi)知毒(du)(du)(du)(du)(du)性(xing)最強(qiang)的(de)(de)(de)(de)(de)物(wu)質(zhi)，并(bing)且是生化(hua)(hua)恐怖(bu)分子(zi)希(xi)望(wang)使用(yong)(yong)的(de)(de)(de)(de)(de)一(yi)種(zhong)毒(du)(du)(du)(du)(du)素(su)(su)。4克未稀釋的(de)(de)(de)(de)(de)粉末--一(yi)枚五分鎳幣的(de)(de)(de)(de)(de)重(zhong)量--足以使1億人喪命。美國(guo)食品(pin)藥物(wu)管理局(ju)2002年(nian)(nian)4月批(pi)準(zhun)肉毒(du)(du)(du)(du)(du)桿菌(jun)(jun)毒(du)(du)(du)(du)(du)素(su)(su)可用(yong)(yong)于(yu)化(hua)(hua)妝品(pin)中(zhong)。用(yong)(yong)于(yu)化(hua)(hua)妝品(pin)的(de)(de)(de)(de)(de)肉毒(du)(du)(du)(du)(du)桿菌(jun)(jun)毒(du)(du)(du)(du)(du)素(su)(su)變體(ti)，比(bi)如肉毒(du)(du)(du)(du)(du)素(su)(su)，目(mu)的(de)(de)(de)(de)(de)是使神經(jing)(jing)遞質(zhi)負責(ze)觸(chu)發(fa)肌肉收縮(suo)，有(you)效麻痹注射(she)的(de)(de)(de)(de)(de)區(qu)(qu)域，抑(yi)制(zhi)皺紋(wen)的(de)(de)(de)(de)(de)出現。通常，把(ba)數(shu)量從0.5～1.0毫升不(bu)等的(de)(de)(de)(de)(de)毒(du)(du)(du)(du)(du)素(su)(su)溶液--大約(yue)一(yi)茶匙--注射(she)到臉部的(de)(de)(de)(de)(de)每一(yi)個(ge)區(qu)(qu)域。神經(jing)(jing)運(yun)動紊(wen)亂的(de)(de)(de)(de)(de)人會發(fa)作并(bing)出現呼(hu)吸困難。美發(fa)師等對(dui)這種(zhong)用(yong)(yong)于(yu)化(hua)(hua)妝品(pin)的(de)(de)(de)(de)(de)毒(du)(du)(du)(du)(du)素(su)(su)變體(ti)的(de)(de)(de)(de)(de)使用(yong)(yong)增加了其被致(zhi)命性(xing)誤用(yong)(yong)的(de)(de)(de)(de)(de)可能(neng)性(xing)。比(bi) 肉毒(du)(du)(du)(du)(du)素(su)(su)更易引起肉毒(du)(du)(du)(du)(du)中(zhong)毒(du)(du)(du)(du)(du)的(de)(de)(de)(de)(de)非(fei)法肉毒(du)(du)(du)(du)(du)素(su)(su)仿(fang)制(zhi)品(pin)，不(bu)時地充斥市場并(bing)每年(nian)(nian)致(zhi)死30人。
1985年(nian)以來，有2,871人(ren)死于肉毒桿菌毒素的使(shi)用。
2009年(nian)4月，國家批準肉毒(du)毒(du)素用(yong)于美容 僅用(yong)于去除皺眉紋。
獲批準進入(ru)正規醫院(yuan)整形(xing)美(mei)容科和皮膚科的肉(rou)毒(du)毒(du)素，僅僅適用于去除皺眉(mei)紋，而且屬于特(te)殊管理的毒(du)麻藥品，須經嚴格(ge)的處(chu)方限制(zhi)才能購買和使(shi)用。此外(wai)，藥品監(jian)管部(bu)門還做(zuo)出“只(zhi)能在有處(chu)方權(quan)的醫生監(jian)護下注射使(shi)用”，“不能在藥店或美(mei)容院(yuan)銷售”等諸多(duo)嚴格(ge)的限制(zhi)規定。
中華醫學會(hui)整形(xing)(xing)外科分(fen)會(hui)副主委祁佐良(liang)昨天說，此前(qian)多年，肉毒毒素(su)雖然已在中國眾多整形(xing)(xing)美容醫院中被(bei)廣(guang)泛應用于(yu)除皺、瘦臉(lian)，但(dan)一(yi)直未經國家(jia)藥監局批準，處(chu)于(yu)尷尬的“非法”狀態。
肉(rou)毒(du)(du)(du)毒(du)(du)(du)素(su)中毒(du)(du)(du)的臨(lin)床診(zhen)斷(duan)主要(yao)依據臨(lin)床體癥和(he)(he)(he)主述分析。實驗(yan)室檢(jian)測(ce)肉(rou)毒(du)(du)(du)毒(du)(du)(du)素(su)及(ji)定型(xing)對確(que)診(zhen)和(he)(he)(he)治療具有重要(yao)意義，預防中毒(du)(du)(du)最重要(yao)的是(shi)加強監測(ce)。到(dao)目前為止經典(dian)的小鼠(shu)致死及(ji)中和(he)(he)(he)試(shi)驗(yan)仍是(shi)最敏(min)感(gan)、最可(ke)信的肉(rou)毒(du)(du)(du)檢(jian)測(ce)方(fang)法，該方(fang)法經過不斷(duan)完善，甚至可(ke)以對很微(wei)量(liang)的毒(du)(du)(du)素(su)作到(dao)定量(liang)檢(jian)測(ce)。但該方(fang)法比較繁(fan)瑣和(he)(he)(he)耗(hao)時，不易推廣(guang)，因此人(ren)們不斷(duan)探索一些(xie)更簡便、快(kuai)捷(jie)、靈敏(min)的新方(fang)法。
免(mian)(mian)疫血清(qing)學方法(fa)的優勢是可以直接從病人的食物(wu)、糞(fen)便、嘔吐物(wu)及血清(qing)等臨床樣品中檢測(ce)出肉毒(du)毒(du)素，用血清(qing)學方法(fa)測(ce)定肉毒(du)毒(du)素主要有放射(she)免(mian)(mian)疫技(ji)術(RIA)、反向間接血凝法(fa)(RPHA)、反向乳膠凝集(ji)實驗(yan)(RPLA)、酶(mei)聯免(mian)(mian)疫吸附(fu)實驗(yan)(ELISA)及其擴展的酶(mei)聯凝集(ji)實驗(yan)(ELCA)等。
聚合(he)酶鏈(lian)反(fan)應(ying)(PCR)技術是(shi)近(jin)年來發展的(de)一類(lei)快速診斷(duan)(duan)及定(ding)型肉(rou)毒(du)毒(du)素的(de)實驗方法(fa)。其步(bu)驟(zou)主要(yao)是(shi)將檢樣(糞便、內臟、胃腸內容物、食物等)的(de)研碎物或離心沉(chen)渣(zha)接種(zhong)于厭(yan)氧庖肉(rou)培養基進行增菌(jun)(jun)及產毒(du)培養。然后將菌(jun)(jun)體裂解，提取DNA模板(ban)以作PCR試驗，通過電泳圖(tu)譜判斷(duan)(duan)是(shi)否(fou)存在肉(rou)毒(du)梭菌(jun)(jun)。
類(lei)毒(du)(du)(du)素疫(yi)(yi)苗：傳(chuan)統BoNT類(lei)毒(du)(du)(du)素疫(yi)(yi)苗因存在一定(ding)的(de)副作用(yong)，臨床使用(yong)受到了限制。利用(yong)分子(zi)生物(wu)學方法脫毒(du)(du)(du)構建的(de)全長BoNT突變體疫(yi)(yi)苗，可以(yi)有(you)效地刺激(ji)機體產(chan)生高效免疫(yi)(yi)保護抗體，作為(wei)新一代類(lei)疫(yi)(yi)苗具有(you)良(liang)好(hao)的(de)開(kai)發(fa)潛力。
Hc亞(ya)單位疫(yi)苗：最理(li)想的亞(ya)單位疫(yi)苗應(ying)該(gai)是無(wu)毒(du)的最小蛋白片段，并且能顯著引起機體(ti)保護性免疫(yi)應(ying)答。
短肽疫苗：隨(sui)著噬菌(jun)體展(zhan)示肽庫、重疊肽合成、計算機模擬預測(ce)表(biao)位(wei)等(deng)技(ji)術(shu)的(de)發展(zhan)，識別鑒定特異性(xing)短肽片段作為候(hou)選疫苗可(ke)以被(bei)快速準確地完成。通過比較不同(tong)的(de)研究報道發現，某(mou)些(xie)肽段表(biao)位(wei)可(ke)以在不同(tong)型的(de)毒素間引(yin)起交叉(cha)反應(ying)，據此(ci)構建的(de)多肽疫苗可(ke) 刺激(ji)獲(huo)得(de)較好(hao)的(de)免疫效果，但(dan)仍(reng)然需要對這些(xie)表(biao)位(wei)進行驗證。
DNA疫(yi)苗(miao)：通常(chang)用 BoNT重組DNA免疫(yi)動物(wu)后(hou)表達蛋(dan)白，進而刺激免疫(yi)系統(tong)產(chan)生抗(kang)體或(huo)T細(xi)胞介(jie)導的(de)免疫(yi)應(ying)答。
去皺紋
1) 技術原理
口輪匝肌與皮膚(fu)緊(jin)密連(lian)接(jie)，收縮(suo)時直接(jie)牽動(dong)皮膚(fu)，和(he)動(dong)力性皺紋的(de)(de)形成有關。而(er)肉(rou)毒(du)(du)毒(du)(du)素是一種生物毒(du)(du)素類肌肉(rou)松(song)弛(chi)劑，它通過抑制(zhi)乙酰膽堿的(de)(de)釋放，阻斷神經肌肉(rou)傳(chuan)導，導致肌肉(rou)松(song)弛(chi)性麻痹(bi)，從而(er)抑制(zhi)肌肉(rou)的(de)(de)收縮(suo)，以達到去除皺紋的(de)(de)目的(de)(de)。
2) 適應人群和禁(jin)忌人群
① 適(shi)應人群(qun)：適(shi)用(yong)于口周肌肉收縮過多導(dao)致的動力性皺紋，要求使用(yong)肉毒毒素者。
② 禁忌人群
a. 重癥(zheng)肌(ji)無力、多發(fa)性硬(ying)化癥(zheng)、先天(tian)性上(shang)瞼下垂等神經肌(ji)肉病變。
b. 對肉(rou)毒毒素(su)制品中任何(he)成分(fen)或人血白蛋白過(guo)敏(min)者(zhe)或過(guo)敏(min)體質者(zhe)。
c. 有心、肝(gan)、肺(fei)、腎等臟器(qi)疾病，體質(zhi)非常瘦弱者、活(huo)動性肺(fei)結核、血液病、結締(di)組(zu)織病、妊(ren)娠婦(fu)女和(he)兒童(tong)應慎用(yong)。
d. 2周內(nei)有使用與肉毒(du)(du)毒(du)(du)素相互作(zuo)用的藥物，如氨(an)基糖苷(gan)類抗生(sheng)素及青霉胺、奎寧、環孢素、嗎啡、鈣離子傳導(dao)阻滯劑(ji)等(deng)，因這些藥物可增(zeng)加肉毒(du)(du)毒(du)(du)素的毒(du)(du)性。
3) 技術方法
① 注射部位皮膚消毒。
② 設計(ji)和標記注射點。
③ 將藥物(wu)注射到標(biao)記部(bu)位。
4) 風(feng)險(xian)和并發癥(zheng)
① 口周局(ju)部腫(zhong)脹(zhang)、瘀斑。
② 注射(she)部位麻木、頭痛、緊繃感、鄰近部位皺紋加深。
③ 閉(bi)唇、進食、刷牙困難等顯著副反應(ying)。
④ 笑容不對稱或言語障礙(ai)(B、P等輔(fu)音發音困難)、唇部感受(shou)減弱等。
⑤ 上唇(chun)內翻(fan)、外(wai)翻(fan)或(huo)暫時性(xing)下垂(chui)：是由于注射(she)點距(ju)離口輪匝肌(ji)過高(gao)導(dao)致。
5) 療程和恢(hui)復時間
肉毒毒素(su)注(zhu)(zhu)射效果維持(chi)時間(jian)一般為3-6個月，皺(zhou)紋(wen)復發后可再(zai)次(ci)注(zhu)(zhu)射，間(jian)隔時間(jian)在(zai)6個月左(zuo)右為宜。但不宜短期(qi)內(nei)反復注(zhu)(zhu)射。
進(jin)(jin)行(xing)完注(zhu)(zhu)射后(hou)，馬上(shang)就(jiu)可以進(jin)(jin)行(xing)正常(chang)的工作和學(xue)習，只要(yao)遵守(shou)醫生要(yao)求的注(zhu)(zhu)意事項(xiang)，術(shu)后(hou)不需要(yao)恢復期。
6) 注意事項
① 術前注意事項
a. 治(zhi)療前兩周內不(bu)要服用可能會改變凝血狀(zhuang)態的(de)藥物(wu)，如阿司(si)匹林、抗凝藥、維生素E和β受(shou)體阻滯劑(ji)等;
b. 治療前卸掉彩妝，清(qing)潔面(mian)部(bu);
c. 任何有活動(dong)性感染的(de)部位需治(zhi)療(liao)感染后(hou)才能注射(she)。
② 術(shu)后注(zhu)意事項
a. 術后(hou)嚴(yan)格(ge)遵守醫囑(zhu);
b. 注射后2-3小(xiao)時內不要按摩治療部位;
c. 注射后3-4小時最好保持頭部直立;
d. 在(zai)注(zhu)射(she)后(hou)2-3小(xiao)時內應該不斷收縮注(zhu)射(she)的(de)肌肉，因(yin)為毒素選擇性地與運動的(de)肌肉結合(he);
e. 若(ruo)不良反應持續一周以上需盡快(kuai)聯系(xi)醫生。
肉毒(du)(du)(du)毒(du)(du)(du)素小劑量局部注釋能夠(gou)有(you)效(xiao)地抑制胞吐，又(you)不引起(qi)強烈免(mian)疫反應(ying)等(deng)主(zhu)要(yao)副作用(yong)，故(gu)其在多(duo)(duo)種人類(lei)疾病治(zhi)療中的(de)應(ying)用(yong)得(de)到快速發(fa)展。毒(du)(du)(du)素注射可以(yi)反復多(duo)(duo)次(ci)，如果抗體產(chan)生(sheng)(sheng)，可以(yi)換用(yong)別的(de)血(xue)清(qing)(qing)型(xing)毒(du)(du)(du)素繼續(xu)此治(zhi)療。現在主(zhu)要(yao)應(ying)用(yong)的(de)是BontA，已經(jing)投入商業化生(sheng)(sheng)產(chan)，別的(de)血(xue)清(qing)(qing)型(xing)毒(du)(du)(du)素正在實(shi)驗中，比較(jiao)有(you)前(qian)景的(de)候選毒(du)(du)(du)素是C型(xing)毒(du)(du)(du)素。BontA的(de)作用(yong)可以(yi)被(bei)鈣離子(zi)濃度升高(gao)逆(ni)(ni)轉，其余血(xue)清(qing)(qing)型(xing)毒(du)(du)(du)素由(you)于其作用(yong)不能被(bei)逆(ni)(ni)轉，應(ying)該在治(zhi)療中更加有(you)效(xiao)，但(dan)事實(shi)發(fa)現，它們的(de)有(you)效(xiao)持續(xu)時間都較(jiao)短。
肉毒(du)(du)毒(du)(du)素在疾病治(zhi)療中的(de)應用主要包括三方面：
肌(ji)(ji)肉(rou)過度收(shou)縮等(deng)神經(jing)肌(ji)(ji)肉(rou)紊(wen)亂癥(zheng)狀，例(li)如肌(ji)(ji)纖維肌(ji)(ji)顫(zhan)搐、磨(mo)牙癥(zheng)、肛(gang)裂、肛(gang)門痙(jing)(jing)攣(luan)、陰(yin)道痙(jing)(jing)攣(luan)、遲緩(huan)不能、食道痙(jing)(jing)攣(luan)等(deng)，以及整形(xing)、神經(jing)外科手(shou)術后的肌(ji)(ji)肉(rou)松弛階段；
腺體分泌(mi)過多癥狀，例如(ru)多汗癥、鼻炎、流涎癥、鱷(e)魚淚綜合征等；
疼痛癥狀，例如緊張(zhang)性(xing)頭痛、偏(pian)頭痛、頸源性(xing)頭痛、肌(ji)筋膜疼痛、慢性(xing)腰背痛、“網球肘”等。
