一、石蠟切片厚度一般為多少

石蠟切片厚(hou)(hou)度(du)(du)(du)通常為(wei)4～7微(wei)米，切(qie)(qie)出一片(pian)接一片(pian)的蠟帶，用(yong)毛筆輕(qing)托輕(qing)放在紙上。這個厚(hou)(hou)度(du)(du)(du)通常可以滿(man)足大部分實驗室的需(xu)求。如果需(xu)要更(geng)薄的切(qie)(qie)片(pian)厚(hou)(hou)度(du)(du)(du)，則可以使用(yong)微(wei)切(qie)(qie)機進行(xing)切(qie)(qie)割，厚(hou)(hou)度(du)(du)(du)可達1-2微(wei)米，但這種切(qie)(qie)片(pian)會更(geng)脆弱，操(cao)作難度(du)(du)(du)更(geng)大。

二、石蠟切片制作過程是什么

石蠟切片(pian)的制(zhi)作步驟如下：

1、組織包埋

（1）乙醇脫水：組(zu)織(zhi)經不同濃度(du)的乙(yi)醇(chun)(chun)溶液進行逐級(ji)脫(tuo)水70％、80％、90％、95％、100％、100％，各級(ji)乙(yi)醇(chun)(chun) 40min（注意：骨(gu)性及鈣化(hua)組(zu)織(zhi)需在JYBL-Ⅱ脫(tuo)鈣液中浸泡24h，待組(zu)織(zhi)軟化(hua)后(hou)再進行乙(yi)醇(chun)(chun)脫(tuo)水步驟）。

（2）透明：組織(zhi)依次浸(jin)泡(pao)于三個二甲苯中，每(mei)缸各1h。

（3）浸蠟：組(zu)織依(yi)次浸泡于三個(ge)石蠟缸中，每缸各1h。

（4）包埋：將(jiang)液(ye)態的石蠟(la)倒入模具(ju)盒中，再(zai)將(jiang)浸好蠟(la)的組(zu)織(zhi)塊平放(fang)底部，注意(yi)切面方向朝下放(fang)置，待石蠟(la)凝固后(hou)去掉包埋框，完全冷卻(que)變硬后(hou)再(zai)修整蠟(la)塊，組(zu)織(zhi)外圍(wei)的石蠟(la)保留適中以便切片。

2、切片與貼片

切片制作將預冷的蠟塊固定在石蠟切片機上，使石蠟塊的切(qie)面(mian)與刀口成(cheng)平行(xing)方(fang)向(xiang)，刀的傾斜度通(tong)常15℃，轉動輪轉推(tui)進器(qi)，調節(jie)切(qie)片(pian)厚(hou)度為4μm，切(qie)成(cheng)厚(hou)度均勻(yun)的切(qie)片(pian)。

左手持毛筆，右手旋動切片機轉把，切片帶出來之后，用毛筆輕輕托起，再用鑷子輕鑷蠟片，以正面放入展片箱中，其水溫45℃左右。待攤平整后撈片。貼附切片左手持載玻片之一端，垂直入水去附貼切片，右手用鑷子輔助推動，附貼至玻片上的三分之二處。切(qie)片(pian)貼(tie)附后，放在空氣中稍晾(liang)干，放置65℃烤片(pian)機上烤1h，再放置烘箱內(nei)烘烤2h。

3、石蠟切片脫蠟至水

依(yi)次將(jiang)石(shi)蠟(la)切片放入(ru)二甲苯(ben)Ⅰ10min-二甲苯(ben)Ⅱ10min-二甲苯(ben)Ⅲ10min-無水乙醇Ⅰ5min-無水乙醇Ⅱ5min-90%酒(jiu)(jiu)精5min-80%酒(jiu)(jiu)精5min-70%酒(jiu)(jiu)精5min-50%酒(jiu)(jiu)精5min梯度(du)脫蠟(la)。

4、HE染色

石(shi)蠟切片入蘇(su)木素染(ran)0.5-1分鐘min，自來(lai)水(shui)(shui)漂(piao)(piao)(piao)洗(xi)，1%鹽酸酒精分化數秒，自來(lai)水(shui)(shui)漂(piao)(piao)(piao)洗(xi)，然(ran)后(hou)1%氨(an)水(shui)(shui)水(shui)(shui)溶液返藍1min，流(liu)水(shui)(shui)沖洗(xi)數秒，放入伊紅染(ran)液中染(ran)色數秒，流(liu)水(shui)(shui)漂(piao)(piao)(piao)洗(xi)。

5、脫水封片

石(shi)蠟切(qie)片(pian)依(yi)次放入75%乙醇(chun)(chun)2min-85%乙醇(chun)(chun)2min-無水(shui)乙醇(chun)(chun)5min-無水(shui)乙醇(chun)(chun)5min-二甲(jia)苯5min透明，將切(qie)片(pian)從二甲(jia)苯拿出來(lai)中性樹膠封片(pian)。