一、石蠟切片厚度一般為多少

石蠟切片厚(hou)(hou)度通常(chang)為4～7微米(mi)，切出(chu)一片(pian)(pian)接一片(pian)(pian)的(de)蠟帶，用(yong)毛筆輕托輕放在(zai)紙上。這個厚(hou)(hou)度通常(chang)可(ke)以滿(man)足大部分實驗室的(de)需求(qiu)。如果需要(yao)更(geng)薄的(de)切片(pian)(pian)厚(hou)(hou)度，則可(ke)以使用(yong)微切機進行切割，厚(hou)(hou)度可(ke)達1-2微米(mi)，但這種切片(pian)(pian)會更(geng)脆弱，操作難度更(geng)大。

二、石蠟切片制作過程是什么

石蠟切(qie)片的制作步驟如下：

1、組織包埋

（1）乙醇脫水：組(zu)織(zhi)經不同濃度的乙(yi)醇溶液(ye)進(jin)行(xing)逐級脫水70％、80％、90％、95％、100％、100％，各級乙(yi)醇 40min（注意(yi)：骨(gu)性及鈣化組(zu)織(zhi)需(xu)在JYBL-Ⅱ脫鈣液(ye)中浸泡24h，待組(zu)織(zhi)軟化后再進(jin)行(xing)乙(yi)醇脫水步驟）。

（2）透明：組織(zhi)依(yi)次浸泡于(yu)三個二甲苯中，每缸各1h。

（3）浸蠟：組(zu)織依次(ci)浸泡于三個(ge)石蠟缸中(zhong)，每缸各1h。

（4）包埋：將液態的石蠟(la)(la)倒入模具盒中(zhong)，再將浸好蠟(la)(la)的組(zu)織塊(kuai)平放底(di)部，注(zhu)意切面(mian)方向朝下放置，待石蠟(la)(la)凝固(gu)后去掉包埋框，完全冷(leng)卻(que)變硬后再修整蠟(la)(la)塊(kuai)，組(zu)織外圍的石蠟(la)(la)保留適中(zhong)以便切片。

2、切片與貼片

切片制作將預冷的蠟塊固定在石蠟切片機上，使石蠟塊的(de)切面與刀(dao)(dao)口(kou)成平行方向，刀(dao)(dao)的(de)傾(qing)斜度(du)通常15℃，轉動輪轉推進器，調節切片厚度(du)為4μm，切成厚度(du)均勻的(de)切片。

左手持毛筆，右手旋動切片機轉把，切片帶出來之后，用毛筆輕輕托起，再用鑷子輕鑷蠟片，以正面放入展片箱中，其水溫45℃左右。待攤平整后撈片。貼附切片左手持載玻片之一端，垂直入水去附貼切片，右手用鑷子輔助推動，附貼至玻片上的三分之二處。切(qie)片貼附后，放(fang)(fang)在空氣中稍晾干(gan)，放(fang)(fang)置(zhi)65℃烤(kao)片機上烤(kao)1h，再放(fang)(fang)置(zhi)烘箱內烘烤(kao)2h。

3、石蠟切片脫蠟至水

依次將(jiang)石蠟(la)切片放入二(er)甲苯(ben)Ⅰ10min-二(er)甲苯(ben)Ⅱ10min-二(er)甲苯(ben)Ⅲ10min-無水(shui)乙醇Ⅰ5min-無水(shui)乙醇Ⅱ5min-90%酒(jiu)(jiu)精5min-80%酒(jiu)(jiu)精5min-70%酒(jiu)(jiu)精5min-50%酒(jiu)(jiu)精5min梯(ti)度脫蠟(la)。

4、HE染色

石蠟切片(pian)入蘇(su)木素染0.5-1分鐘min，自(zi)(zi)來水漂洗(xi)，1%鹽(yan)酸酒精分化數秒(miao)，自(zi)(zi)來水漂洗(xi)，然后1%氨水水溶液(ye)返(fan)藍1min，流水沖洗(xi)數秒(miao)，放入伊紅(hong)染液(ye)中染色數秒(miao)，流水漂洗(xi)。

5、脫水封片

石蠟切片(pian)依次放(fang)入75%乙(yi)(yi)醇2min-85%乙(yi)(yi)醇2min-無水乙(yi)(yi)醇5min-無水乙(yi)(yi)醇5min-二甲苯5min透明(ming)，將切片(pian)從(cong)二甲苯拿出來(lai)中性樹膠封片(pian)。