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大腸(chang)桿(gan)菌（Escherichia coli），又叫大腸(chang)埃希氏菌，Escherich在(zai)1885年發(fa)現的。大腸(chang)桿(gan)菌是條件致病(bing)菌，在(zai)一定條件下可以引起人和多種動(dong)物發(fa)生(sheng)胃(wei)腸(chang)道(dao)感(gan)染或尿道(dao)等多種局部組織器官感(gan)染。

簡介

大腸(chang)桿菌(jun)是(shi)動(dong)物腸(chang)道(dao)中的正(zheng)常(chang)寄(ji)居菌(jun)，其(qi)中很小一部分在一定條件(jian)下引起(qi)疾病(bing)。大腸(chang)桿菌(jun)的血清型(xing)能夠引起(qi)人體或動(dong)物胃腸(chang)道(dao)感(gan)(gan)染(ran)(ran)，主要是(shi)由特定的菌(jun)毛抗(kang)原(yuan)、致病(bing)性毒素等感(gan)(gan)染(ran)(ran)引起(qi)的，除胃腸(chang)道(dao)感(gan)(gan)染(ran)(ran)以外，還會引起(qi)尿道(dao)感(gan)(gan)染(ran)(ran)、關節(jie)炎、腦膜炎以及敗血型(xing)感(gan)(gan)染(ran)(ran)等。

種類

按致病作用

目前國際公認的分類，主要有(you)(you)六個種類的大腸(chang)(chang)(chang)桿(gan)(gan)(gan)菌(jun)，即能(neng)夠致(zhi)(zhi)使(shi)胃腸(chang)(chang)(chang)道(dao)(dao)感(gan)染的腸(chang)(chang)(chang)道(dao)(dao)致(zhi)(zhi)病性(xing)(xing)的大腸(chang)(chang)(chang)桿(gan)(gan)(gan)菌(jun)（EPEC）、腸(chang)(chang)(chang)道(dao)(dao)產毒(du)素性(xing)(xing)的大腸(chang)(chang)(chang)桿(gan)(gan)(gan)菌(jun)（ETEC）、腸(chang)(chang)(chang)道(dao)(dao)侵(qin)襲性(xing)(xing)的大腸(chang)(chang)(chang)桿(gan)(gan)(gan)菌(jun)（EIEC）、腸(chang)(chang)(chang)道(dao)(dao)出血(xue)性(xing)(xing)的大腸(chang)(chang)(chang)桿(gan)(gan)(gan)菌(jun)（EHEC）、腸(chang)(chang)(chang)集(ji)聚性(xing)(xing)的大腸(chang)(chang)(chang)桿(gan)(gan)(gan)菌(jun)（EAEC）以及(ji)近(jin)年來(lai)發現(xian)的腸(chang)(chang)(chang)產志(zhi)賀樣毒(du)素同時具(ju)有(you)(you)一定侵(qin)襲力的大腸(chang)(chang)(chang)桿(gan)(gan)(gan)菌(jun)（ESIES），另外，還有(you)(you)能(neng)夠致(zhi)(zhi)使(shi)尿道(dao)(dao)感(gan)染的尿道(dao)(dao)致(zhi)(zhi)病性(xing)(xing)的大腸(chang)(chang)(chang)桿(gan)(gan)(gan)菌(jun)（UPEC），以及(ji)最新命(ming)名的腸(chang)(chang)(chang)道(dao)(dao)集(ji)聚性(xing)(xing)的黏附大腸(chang)(chang)(chang)桿(gan)(gan)(gan)菌(jun)（EAggEC）。

按溶血性

根據(ju)大腸(chang)桿菌的感染性狀能否產生(sheng)溶(rong)血(xue)素和有無(wu)溶(rong)血(xue)的能力(li)，可將大腸(chang)桿菌分(fen)為兩(liang)大類：即(ji)溶(rong)血(xue)性的大腸(chang)桿菌和非溶(rong)血(xue)性的大腸(chang)桿菌。

按產腸毒素性

根(gen)據(ju)大(da)(da)腸(chang)桿(gan)(gan)(gan)菌(jun)(jun)(jun)在(zai)感染(ran)過(guo)程中能(neng)否產生腸(chang)毒(du)素(su)(su)的(de)(de)(de)能(neng)力，可(ke)將大(da)(da)腸(chang)桿(gan)(gan)(gan)菌(jun)(jun)(jun)分(fen)為兩大(da)(da)類：即產腸(chang)毒(du)素(su)(su)性的(de)(de)(de)大(da)(da)腸(chang)桿(gan)(gan)(gan)菌(jun)(jun)(jun)和(he)非產腸(chang)毒(du)素(su)(su)性的(de)(de)(de)大(da)(da)腸(chang)桿(gan)(gan)(gan)菌(jun)(jun)(jun)。產腸(chang)毒(du)素(su)(su)性的(de)(de)(de)大(da)(da)腸(chang)桿(gan)(gan)(gan)菌(jun)(jun)(jun)是(shi)人和(he)多種(zhong)動物的(de)(de)(de)任何感染(ran)性腹瀉的(de)(de)(de)重要病原，鑒定產腸(chang)毒(du)素(su)(su)性的(de)(de)(de)大(da)(da)腸(chang)桿(gan)(gan)(gan)菌(jun)(jun)(jun)主要是(shi)測定所(suo)分(fen)離(li)大(da)(da)腸(chang)桿(gan)(gan)(gan)菌(jun)(jun)(jun)分(fen)泌(mi)的(de)(de)(de)腸(chang)毒(du)素(su)(su)的(de)(de)(de)類型。除此之外，也可(ke)以根(gen)據(ju)大(da)(da)腸(chang)桿(gan)(gan)(gan)菌(jun)(jun)(jun)產生腸(chang)毒(du)素(su)(su)的(de)(de)(de)能(neng)力，結(jie)合其對不同(tong)腸(chang)毒(du)素(su)(su)的(de)(de)(de)敏(min)感性，而將大(da)(da)腸(chang)桿(gan)(gan)(gan)菌(jun)(jun)(jun)分(fen)型，稱為腸(chang)毒(du)素(su)(su)型。

生物學特征

理化特性

大腸(chang)桿(gan)菌(jun)(jun)(jun)(jun)(jun)是短桿(gan)菌(jun)(jun)(jun)(jun)(jun)，兩(liang)端呈(cheng)鈍圓(yuan)形，革蘭陰性。有時(shi)因環境不同，個(ge)別菌(jun)(jun)(jun)(jun)(jun)體出現近似球桿(gan)狀(zhuang)或(huo)長(chang)(chang)絲狀(zhuang)；大腸(chang)桿(gan)菌(jun)(jun)(jun)(jun)(jun)多是單一或(huo)兩(liang)個(ge)存在(zai)，但不會(hui)排列呈(cheng)長(chang)(chang)鏈形狀(zhuang)；大多數的(de)(de)(de)大腸(chang)桿(gan)菌(jun)(jun)(jun)(jun)(jun)菌(jun)(jun)(jun)(jun)(jun)株具有莢膜或(huo)微(wei)莢膜結構，但是不能形成芽孢；多數大腸(chang)桿(gan)菌(jun)(jun)(jun)(jun)(jun)菌(jun)(jun)(jun)(jun)(jun)株生(sheng)長(chang)(chang)有菌(jun)(jun)(jun)(jun)(jun)毛，其(qi)(qi)中一些菌(jun)(jun)(jun)(jun)(jun)毛是針對宿主(zhu)及其(qi)(qi)他的(de)(de)(de)一些組(zu)織或(huo)細(xi)胞具有黏附作用(yong)的(de)(de)(de)宿主(zhu)特異性菌(jun)(jun)(jun)(jun)(jun)毛。

生化特性

大(da)腸(chang)桿(gan)菌(jun)(jun)的生(sheng)化(hua)代謝(xie)非常活躍。大(da)腸(chang)桿(gan)菌(jun)(jun)可以發酵(jiao)葡(pu)萄糖(tang)(tang)產酸(suan)、產氣，個別菌(jun)(jun)株不產氣，大(da)腸(chang)桿(gan)菌(jun)(jun)還能發酵(jiao)多(duo)種碳(tan)水化(hua)合物，也可以利用多(duo)種有機(ji)酸(suan)鹽(yan)。大(da)腸(chang)桿(gan)菌(jun)(jun)在(zai)常用的生(sheng)化(hua)特性(xing)(xing)檢測項目中，甲基紅試(shi)驗(yan)呈陽(yang)(yang)性(xing)(xing)，吲(yin)哚產生(sheng)和(he)乳糖(tang)(tang)發酵(jiao)是陽(yang)(yang)性(xing)(xing)（個別菌(jun)(jun)株表(biao)(biao)現陰(yin)性(xing)(xing)），維-培試(shi)驗(yan)是陰(yin)性(xing)(xing)，尿素酶和(he)檸檬酸(suan)鹽(yan)利用呈陰(yin)性(xing)(xing)（極個別菌(jun)(jun)株表(biao)(biao)現陽(yang)(yang)性(xing)(xing)），硝酸(suan)鹽(yan)還原試(shi)驗(yan)表(biao)(biao)現陽(yang)(yang)性(xing)(xing)，氧化(hua)酶表(biao)(biao)現陰(yin)性(xing)(xing)，氧化(hua)-發酵(jiao)試(shi)驗(yan)表(biao)(biao)現為(wei)F型。

致病作用特性

對人(ren)和(he)多種(zhong)動(dong)物(wu)來講，由于(yu)病(bing)原大(da)腸(chang)(chang)桿(gan)菌(jun)常(chang)常(chang)傾(qing)向(xiang)具有一(yi)定的(de)(de)宿主特異性(xing)(xing)，對人(ren)有致病(bing)作用(yong)的(de)(de)菌(jun)株(zhu)常(chang)常(chang)是(shi)很少引起(qi)動(dong)物(wu)的(de)(de)感(gan)(gan)染，反之亦然，據此可將(jiang)病(bing)原大(da)腸(chang)(chang)桿(gan)菌(jun)大(da)致上(shang)將(jiang)其劃(hua)分為兩種(zhong)：即人(ren)病(bing)原大(da)腸(chang)(chang)桿(gan)菌(jun)和(he)動(dong)物(wu)病(bing)原大(da)腸(chang)(chang)桿(gan)菌(jun)。動(dong)物(wu)的(de)(de)致瀉性(xing)(xing)大(da)腸(chang)(chang)桿(gan)菌(jun)已(yi)被明確的(de)(de)特征主要是(shi)類似于(yu)ETEC的(de)(de)菌(jun)株(zhu)。UPEC是(shi)一(yi)群能夠引起(qi)人(ren)的(de)(de)尿道感(gan)(gan)染最(zui)常(chang)見的(de)(de)病(bing)原大(da)腸(chang)(chang)桿(gan)菌(jun)。尿道感(gan)(gan)染是(shi)很少獨立存(cun)在于(yu)動(dong)物(wu)的(de)(de)大(da)腸(chang)(chang)桿(gan)菌(jun)病(bing)中的(de)(de)感(gan)(gan)染癥狀。

流行病學特征

區域分布

大(da)腸桿(gan)(gan)菌的(de)(de)發生與流(liu)行感(gan)(gan)染是(shi)呈世(shi)界性(xing)(xing)分布的(de)(de)，但大(da)腸桿(gan)(gan)菌的(de)(de)流(liu)行性(xing)(xing)還是(shi)存在一定(ding)的(de)(de)區(qu)域分布特(te)征的(de)(de)。這些(xie)區(qu)域分布的(de)(de)特(te)征在人(ren)的(de)(de)大(da)腸桿(gan)(gan)菌感(gan)(gan)染中(zhong)表現(xian)的(de)(de)更明顯些(xie)，最(zui)大(da)的(de)(de)可能是(shi)因為與區(qu)域間經濟條件和社會(hui)衛生狀況等有一定(ding)聯(lian)系(xi)的(de)(de)。

易感宿主

動物的大腸桿菌病(bing)可以發(fa)生(sheng)在多種家畜、家禽、養殖經(jing)濟動物以及其(qi)他(ta)陸生(sheng)動物和某些水(shui)產(chan)動物，其(qi)中豬和雞是最為易感的，而且危害十分嚴重(zhong)。

發病季節

大腸(chang)桿菌在(zai)動物(wu)群體間的(de)(de)(de)感(gan)染(ran)的(de)(de)(de)季(ji)節發(fa)病特(te)征(zheng)不是非常明(ming)顯。在(zai)一年(nian)四季(ji)豬均(jun)可發(fa)生，但(dan)只要是發(fa)生在(zai)豬的(de)(de)(de)產仔期至(zhi)斷(duan)乳(ru)期，這與豬的(de)(de)(de)易感(gan)日齡相關(guan)聯。犢牛和羔羊(yang)多發(fa)生于(yu)冬(dong)季(ji)和春季(ji)。其(qi)他動物(wu)的(de)(de)(de)大腸(chang)桿菌感(gan)染(ran)在(zai)常年(nian)均(jun)有發(fa)生，季(ji)節性不明(ming)顯。

傳染源與傳播途徑

人的大(da)腸(chang)桿(gan)(gan)菌(jun)病(bing)的主要傳染(ran)(ran)源是(shi)因為在胃(wei)腸(chang)道(dao)感染(ran)(ran)患者的糞(fen)便中(zhong)有大(da)量大(da)腸(chang)桿(gan)(gan)菌(jun)病(bing)原菌(jun)排(pai)至體外(wai)構成的。大(da)腸(chang)桿(gan)(gan)菌(jun)在人之間的傳播(bo)途徑多是(shi)通過(guo)糞(fen)-口這(zhe)一(yi)傳播(bo)途徑，在一(yi)定的條件下可引起大(da)腸(chang)桿(gan)(gan)菌(jun)病(bing)散發或流行。

檢測方法

食(shi)品中(zhong)的(de)大(da)腸桿菌進行快速(su)準確的(de)檢測已(yi)成為了人們(men)經(jing)常關注(zhu)的(de)問題。下面闡述食(shi)品中(zhong)的(de)大(da)腸桿菌檢測的(de)方法及分析(xi)。

發酵法

這(zhe)種(zhong)方法主要(yao)(yao)是在44.5℃下的(de)(de)(de)培(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)基(ji)上進(jin)(jin)(jin)行(xing)(xing)(xing)大腸桿菌的(de)(de)(de)培(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)，該(gai)培(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)基(ji)含有熒(ying)光(guang)底(di)物，需要(yao)(yao)培(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)24h。然后對(dui)熒(ying)光(guang)底(di)物進(jin)(jin)(jin)行(xing)(xing)(xing)釋放，需要(yao)(yao)采(cai)(cai)用(yong)葡(pu)萄糖醛酸(suan)進(jin)(jin)(jin)行(xing)(xing)(xing)，讓培(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)基(ji)能夠在紫外(wai)光(guang)的(de)(de)(de)照(zhao)射(she)下發(fa)出(chu)熒(ying)光(guang)。采(cai)(cai)用(yong)這(zhe)樣(yang)的(de)(de)(de)方式(shi)方法，還可以進(jin)(jin)(jin)行(xing)(xing)(xing)統計學估計原來樣(yang)品中(zhong)的(de)(de)(de)菌落。主要(yao)(yao)步(bu)驟包括發(fa)酵(jiao)、分離培(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)、二次(ci)發(fa)酵(jiao)、顯微鏡觀察等。

濾膜法

該方法主要過程：加入(ru)10mL左右的(de)無(wu)菌(jun)(jun)水于濾器(qi)(qi)中，然(ran)后摻入(ru)一些無(wu)菌(jun)(jun)水進行(xing)清潔濾器(qi)(qi)的(de)內壁(bi)，再進行(xing)過濾，將濾膜放(fang)在M-FC培養基(ji)中，兩者之間不能夠(gou)有(you)氣泡，然(ran)后進行(xing)密封(feng)，存(cun)放(fang)溫度為44.5℃，存(cun)放(fang)時間約(yue)24h，直(zhi)到(dao)大腸桿菌(jun)(jun)的(de)菌(jun)(jun)群變(bian)成藍(lan)色(se)或(huo)藍(lan)綠色(se)。然(ran)后記錄數據，估(gu)算每一單位的(de)水溶(rong)液(ye)菌(jun)(jun)群數量，然(ran)后進行(xing)大腸桿菌(jun)(jun)量值的(de)換算。

平板計數法

用無菌吸管吸取稀釋(shi)度樣品(pin)1mL，該樣品(pin)與(yu)乳(ru)糖膽鹽(yan)發酵類似，然(ran)后(hou)(hou)(hou)將(jiang)其放入無菌培(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)皿中(zhong)，再加入溫(wen)度于(yu)45℃下的CDLJJD顯色培(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)基(ji)(ji)中(zhong)10mL的量(liang)(liang)(liang)，并進行培(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)皿中(zhong)溶液均(jun)(jun)勻(yun)(yun)混合，可以(yi)通過快速轉動(dong)培(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)皿的方式(shi)，等(deng)溶液凝(ning)固以(yi)后(hou)(hou)(hou)，加入5mL左(zuo)右，然(ran)后(hou)(hou)(hou)快速搖(yao)晃培(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)基(ji)(ji)，使其可以(yi)均(jun)(jun)勻(yun)(yun)覆蓋平板(ban)表面，等(deng)其凝(ning)固以(yi)后(hou)(hou)(hou)，翻轉培(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)基(ji)(ji)，在溫(wen)度37℃中(zhong)培(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)24h左(zuo)右，然(ran)后(hou)(hou)(hou)觀察其形態，顏色等(deng)變化(hua)。除此之外(wai)，平行設置兩個(ge)稀釋(shi)度培(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)基(ji)(ji)，步驟是先稀釋(shi)樣本，通過稀釋(shi)后(hou)(hou)(hou)，微(wei)生物可以(yi)分散(san)為單個(ge)細胞，然(ran)后(hou)(hou)(hou)進行一(yi)定(ding)環境條件下培(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)，直到其長成菌落為止，然(ran)后(hou)(hou)(hou)進行計算大腸桿菌的數量(liang)(liang)(liang)，通過稀釋(shi)度和樣本數量(liang)(liang)(liang)進行計算。

免疫磁珠法

該分(fen)離技(ji)術(shu)(shu)的主要(yao)原(yuan)理是以(yi)磁(ci)(ci)珠(zhu)為載(zai)體和(he)抗體，進行抗體和(he)磁(ci)(ci)珠(zhu)的結合，然(ran)后(hou)通過磁(ci)(ci)力(li)技(ji)術(shu)(shu)完(wan)成(cheng)力(li)學的移(yi)動(dong)，進而(er)分(fen)離大腸桿菌。與其他分(fen)離細菌的方式相比，這樣的方式方法具有一定的優點，該技(ji)術(shu)(shu)可以(yi)提升(sheng)樣本中病原(yuan)性(xing)弧菌的檢測成(cheng)功率，并且免疫磁(ci)(ci)珠(zhu)技(ji)術(shu)(shu)可以(yi)于不(bu)同菌種中對不(bu)同的微生物進行處理，進而(er)在很大程度上提高(gao)檢測效率。

自動化儀器檢測法

主要是運(yun)用(yong)(yong)免(mian)疫自動(dong)化分析儀，該技術(shu)產生(sheng)并運(yun)用(yong)(yong)于1970年(nian)。隨(sui)著(zhu)科技的(de)(de)發(fa)展和(he)進(jin)步，自動(dong)化儀器檢測(ce)技術(shu)應用(yong)(yong)非(fei)常廣泛，并且操作起(qi)來非(fei)常方(fang)便，可(ke)(ke)以(yi)節約很多時間，其受干擾的(de)(de)程度較小，可(ke)(ke)以(yi)節省人力(li)物力(li)的(de)(de)投入，也可(ke)(ke)以(yi)提高檢測(ce)的(de)(de)精確(que)度。在現階段(duan)的(de)(de)發(fa)展過程中，自動(dong)酶的(de)(de)免(mian)疫檢測(ce)體系(xi)的(de)(de)應用(yong)(yong)非(fei)常廣泛。

ATP生物發光法

在近些年(nian)的(de)(de)發展過程(cheng)(cheng)中(zhong)，生(sheng)(sheng)物發光技術(shu)應用很廣泛，是(shi)(shi)一(yi)種比(bi)較快(kuai)速(su)的(de)(de)檢(jian)測(ce)微生(sheng)(sheng)物的(de)(de)技術(shu)。在活(huo)性細胞中(zhong)，ATP是(shi)(shi)其常見(jian)的(de)(de)能(neng)量代謝產，可(ke)以(yi)(yi)提供細胞生(sheng)(sheng)理活(huo)動(dong)過程(cheng)(cheng)中(zhong)所需的(de)(de)能(neng)量。并且(qie)，該(gai)技術(shu)可(ke)以(yi)(yi)在生(sheng)(sheng)物體內可(ke)以(yi)(yi)在一(yi)定范圍(wei)內保持一(yi)定的(de)(de)含量。食品中(zhong)的(de)(de)大腸(chang)桿(gan)菌檢(jian)測(ce)技術(shu)可(ke)以(yi)(yi)采用熒光光度的(de)(de)方法，因為(wei)生(sheng)(sheng)物體發光的(de)(de)原因是(shi)(shi)有(you)熒光素酶的(de)(de)作用，產生(sheng)(sheng)了發光的(de)(de)效果。該(gai)物質來(lai)源于(yu)北美的(de)(de)螢(ying)火蟲體內，可(ke)以(yi)(yi)催化(hua)熒光素的(de)(de)氧化(hua)作用，不(bu)過，該(gai)物質性質不(bu)穩定，可(ke)以(yi)(yi)對(dui)熒光進行快(kuai)速(su)分(fen)解。另外，該(gai)檢(jian)測(ce)技術(shu)結果獲得(de)過程(cheng)(cheng)是(shi)(shi)非(fei)常快(kuai)的(de)(de)，并且(qie)該(gai)設備攜帶方便，十分(fen)適用于(yu)現場檢(jian)測(ce)。

高溫消毒

可引起腹瀉的致病性大(da)腸(chang)桿菌、傷(shang)寒桿菌、霍亂弧菌等普(pu)通(tong)細菌繁殖體，80℃熱(re)水需(xu)(xu)要5-10分鐘、沸水需(xu)(xu)要2-5分鐘才能殺滅。