一、apoe基因檢測是什么意思

APOE基因檢測，又稱載脂蛋白E基因檢測，APOE是(shi)(shi)apolipoprotein E的(de)縮寫，翻譯過來(lai)就是(shi)(shi)載脂(zhi)蛋(dan)(dan)白(bai)E，它(ta)是(shi)(shi)一種多(duo)態性(xing)蛋(dan)(dan)白(bai)，參(can)與脂(zhi)蛋(dan)(dan)白(bai)的(de)轉化與代(dai)謝過程，其(qi)基因(yin)可(ke)以調節許(xu)多(duo)生物學功能，與許(xu)多(duo)眼科(ke)疾(ji)病發病有關，對ApoE及(ji)其(qi)基因(yin)多(duo)態性(xing)的(de)研(yan)(yan)究是(shi)(shi)醫學研(yan)(yan)究的(de)熱點(dian)之一，探討兩者之間的(de)內在(zai)聯系，對眼病的(de)預防、診斷及(ji)治療具有重要的(de)臨床應用(yong)價值。

二、APOE基因檢測的意義

在臨床上(shang)通過APOE基因檢測主要是針對于載脂蛋白e基因的(de)檢測，一般(ban)可將患者(zhe)分為E2、E3、E4三個表現(xian)型，每個表現(xian)型在不同的(de)疾病(bing)的(de)發生率上(shang)都有不同的(de)特點。

我國大多(duo)數人群屬于(yu)E3表(biao)現型，屬于(yu)相(xiang)(xiang)對較為均衡(heng)的(de)類(lei)型。E4表(biao)現型患(huan)者(zhe)出(chu)現動脈(mo)粥(zhou)樣(yang)硬化(hua)、冠狀動脈(mo)粥(zhou)樣(yang)硬化(hua)性(xing)心臟病(bing)和癡(chi)呆的(de)風險相(xiang)(xiang)對比較低，黃斑變性(xing)導致視力損害的(de)可能性(xing)相(xiang)(xiang)對較高(gao)。E2表(biao)現型患(huan)者(zhe)幾乎不(bu)太可能出(chu)現黃斑變性(xing)，但(dan)是出(chu)現癡(chi)呆和冠心病(bing)的(de)風險相(xiang)(xiang)對反而(er)過高(gao)。

三、APOE基因檢測的方法

APOE基因檢測既可(ke)(ke)以(yi)以(yi)VLDL為樣(yang)品，又可(ke)(ke)以(yi)直(zhi)接以(yi)血清（或血漿）為樣(yang)品，通過(guo)IEF電泳分析、雙向(xiang)PAGE或結合免疫印跡法進行測定：

1、等電聚焦法（IEF）

由于三種主要(yao)ApoE異(yi)構(gou)體(ti)E2、E3和E4的等電點（pⅠ）分別(bie)為5.89、6.02和6.68，E4比E3多(duo)一(yi)個(ge)正電荷，而E2比E3少一(yi)個(ge)正電荷。因此，可應用1EF檢(jian)測(ce)這(zhe)些異(yi)構(gou)體(ti)間(jian)電荷差(cha)異(yi)而確定(ding)不同ApoE表型。傳統ApoE表型檢(jian)測(ce)方法多(duo)采(cai)用超速離(li)心法或化學沉淀法分離(li)VLDL，脫脂后進(jin)(jin)行(xing)IEF，然后進(jin)(jin)行(xing)染(ran)(ran)色分析。這(zhe)種方法需要(yao)血清量較(jiao)多(duo)，昂貴、費時(shi)，又需要(yao)大型設備，不適合大規模研究。ApoE異(yi)構(gou)體(ti)之間(jian)染(ran)(ran)色程度之間(jian)差(cha)異(yi)及(ji)電泳過程中泳動距離(li)的變異(yi)性(xing)也造成(cheng)結果的不穩定(ding)性(xing)。

2、雙相電泳法（two-dimensional electrophoresis）

第一(yi)相(xiang)應用IEF電泳將等(deng)電點不同的蛋(dan)白質(zhi)分(fen)離；第二相(xiang)根據蛋(dan)白質(zhi)分(fen)子量不同及濃度(du)的差異，應用SDS-PAGE進(jin)行分(fen)離，由此確定(ding)ApoE表(biao)型。此技(ji)術能解決IEF遇到(dao)的一(yi)些轉錄后修飾(shi)的問題，臨床(chuang)標本用量也很(hen)少，并(bing)且(qie)可以同時進(jin)行定(ding)性和定(ding)量分(fen)析，但(dan)由于(yu)成本昂貴而且(qie)費時，有時也難以清晰地分(fen)辨表(biao)型，故(gu)臨床(chuang)上(shang)應用較少。

3、免疫印跡法（immunoblotting）

血(xue)清(qing)(qing)脫(tuo)脂后(hou)，經IEF電(dian)泳將(jiang)ApoE與其(qi)(qi)他蛋白(bai)(bai)(bai)質(zhi)分(fen)離(li)，然后(hou)將(jiang)凝(ning)膠中蛋白(bai)(bai)(bai)質(zhi)轉(zhuan)移到(dao)硝酸纖維素（NC）膜上(shang)，用抗ApoE抗體作為一(yi)抗進行(xing)免疫(yi)印跡反應(ying)或采用直(zhi)接的(de)(de)(de)免疫(yi)固定法，即可靈敏而特異地顯(xian)示出(chu)ApoE區帶的(de)(de)(de)位置，從而確定ApoE表(biao)型。此方法利用抗原-抗體的(de)(de)(de)特異反應(ying)，排(pai)除了血(xue)清(qing)(qing)其(qi)(qi)他蛋白(bai)(bai)(bai)質(zhi)的(de)(de)(de)干擾，不需超速離(li)心分(fen)離(li)VLDL，血(xue)清(qing)(qing)用量少，是(shi)國(guo)內外實驗室檢測ApoE表(biao)型常用的(de)(de)(de)方法之一(yi)。但此類方法亦存(cun)(cun)在(zai)一(yi)些缺(que)點(dian)，如(ru)對(dui)于(yu)存(cun)(cun)在(zai)與普遍異構體具(ju)有相(xiang)同電(dian)荷的(de)(de)(de)罕見異構體標本，或在(zai)糖尿病(bing)等(deng)病(bing)理狀態(tai)時，由于(yu)轉(zhuan)錄(lu)后(hou)修飾引(yin)起蛋白(bai)(bai)(bai)質(zhi)變化的(de)(de)(de)標本檢測時，就會給出(chu)錯誤的(de)(de)(de)結(jie)果(guo)。