一、熒光酶標儀和普通酶標儀的區別在哪里
熒光酶標(biao)儀和普通酶標(biao)儀兩(liang)者最(zui)大的(de)區別就是(shi)原(yuan)理的(de)不同。
1、熒光酶標儀
由光(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)源氙弧燈(deng)發(fa)(fa)(fa)出的(de)(de)(de)(de)光(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)通過切光(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)器(qi)使其(qi)變(bian)成斷續之光(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)以及激(ji)(ji)發(fa)(fa)(fa)光(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)單(dan)色器(qi)變(bian)成單(dan)色光(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)后,此光(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)即為熒光(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)物(wu)質(zhi)的(de)(de)(de)(de)激(ji)(ji)發(fa)(fa)(fa)光(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)(guang),被測的(de)(de)(de)(de)熒光(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)物(wu)質(zhi)在激(ji)(ji)發(fa)(fa)(fa)光(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)照(zhao)射(she)(she)下所(suo)(suo)發(fa)(fa)(fa)出的(de)(de)(de)(de)熒光(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)(guang),經過單(dan)色器(qi)變(bian)成單(dan)色熒光(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)后照(zhao)射(she)(she)于測樣品用的(de)(de)(de)(de)光(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)電(dian)倍增管上,由其(qi)所(suo)(suo)發(fa)(fa)(fa)生的(de)(de)(de)(de)光(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)電(dian)流經過放大器(qi)放大輸至記(ji)錄儀,激(ji)(ji)發(fa)(fa)(fa)光(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)單(dan)色器(qi)和(he)熒光(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)單(dan)色器(qi)的(de)(de)(de)(de)光(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)柵均由電(dian)動(dong)(dong)(dong)機帶動(dong)(dong)(dong)的(de)(de)(de)(de)凸輪所(suo)(suo)控制,當測繪熒光(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)發(fa)(fa)(fa)射(she)(she)光(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)譜(pu)時,將激(ji)(ji)發(fa)(fa)(fa)光(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)單(dan)色器(qi)的(de)(de)(de)(de)光(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)柵,固(gu)定(ding)在最適當的(de)(de)(de)(de)激(ji)(ji)發(fa)(fa)(fa)光(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)波長處(chu),而讓熒光(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)單(dan)色器(qi)凸輪轉動(dong)(dong)(dong),將各(ge)波長的(de)(de)(de)(de)熒光(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)強度(du)訊號輸出至記(ji)錄儀上,所(suo)(suo)記(ji)錄的(de)(de)(de)(de)光(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)譜(pu)即發(fa)(fa)(fa)射(she)(she)光(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)譜(pu)。
當測繪熒(ying)(ying)光(guang)激(ji)發(fa)光(guang)譜時,將熒(ying)(ying)光(guang)單色器的光(guang)柵(zha)固(gu)定在最適(shi)當的熒(ying)(ying)光(guang)波(bo)(bo)長處,只讓激(ji)發(fa)光(guang)單色口的凸(tu)輪轉動(dong),將各(ge)波(bo)(bo)長的激(ji)發(fa)光(guang)的強度訊號輸(shu)出至記(ji)錄(lu)儀,所記(ji)錄(lu)的光(guang)譜即激(ji)發(fa)。
當進行(xing)樣(yang)品(pin)溶(rong)液(ye)的定量分析時,將(jiang)激(ji)發光(guang)(guang)單色(se)器(qi)固定在所(suo)選擇的激(ji)發光(guang)(guang)波(bo)長處,將(jiang)熒(ying)光(guang)(guang)單色(se)器(qi)調節(jie)至所(suo)選擇的熒(ying)光(guang)(guang)波(bo)長處,由記(ji)錄(lu)儀得出的信(xin)號(hao)是樣(yang)品(pin)溶(rong)液(ye)的熒(ying)光(guang)(guang)強(qiang)度。
2、普通酶標儀(以光吸收酶標儀為例)
光(guang)是電(dian)磁(ci)波(bo),波(bo)長100nm~400nm稱為(wei)紫外光(guang),400nm~780nm之間的(de)光(guang)可(ke)被(bei)人眼(yan)觀察到,大于780nm稱為(wei)紅(hong)外光(guang)。光(guang)吸收(shou)酶標儀測(ce)定的(de)原理(li)是在特定波(bo)長下,檢測(ce)被(bei)測(ce)物吸光(guang)值。
光通過被(bei)(bei)檢測(ce)物,前后的能量(liang)(liang)差異即是被(bei)(bei)檢測(ce)物吸收掉(diao)的能量(liang)(liang),特定(ding)波(bo)長下(xia),同一種被(bei)(bei)檢測(ce)物的濃度與(yu)被(bei)(bei)吸收的能量(liang)(liang)成定(ding)量(liang)(liang)關系。
檢(jian)(jian)(jian)測(ce)單(dan)位用OD值表(biao)示(shi),OD是opticaldelnsity(光(guang)(guang)密度(du)(du))的縮寫,表(biao)示(shi)被(bei)檢(jian)(jian)(jian)測(ce)物吸收(shou)掉的光(guang)(guang)密度(du)(du),OD=1og(1/trans),其中(zhong)trans為(wei)檢(jian)(jian)(jian)測(ce)物的透光(guang)(guang)值。根據Bouger-amberT-beer法則,OD值與光(guang)(guang)強度(du)(du)成(cheng)下述關系:E=OD=logΙ0/Ι其中(zhong)E表(biao)示(shi)被(bei)吸收(shou)的光(guang)(guang)密度(du)(du),Ι0為(wei)在檢(jian)(jian)(jian)測(ce)物之前的光(guang)(guang)強度(du)(du),Ι為(wei)從被(bei)檢(jian)(jian)(jian)測(ce)物出來的光(guang)(guang)強度(du)(du)。
二、熒光酶標儀和普通酶標儀哪個更好
前文已經簡單了(le)解到了(le)熒光酶標(biao)(biao)(biao)儀(yi)(yi)和普通(tong)酶標(biao)(biao)(biao)儀(yi)(yi)的區別(bie)在(zai)哪(na)里,那(nei)么在(zai)選擇的時候,熒光酶標(biao)(biao)(biao)儀(yi)(yi)和普通(tong)酶標(biao)(biao)(biao)儀(yi)(yi)哪(na)個更好(hao)呢?
1、普通酶標儀(以光吸收酶標儀為例)
優(you)點(dian):檢測檢測技術成(cheng)熟,成(cheng)本低,操(cao)作(zuo)簡(jian)單。
缺點:動態范圍窄,靈敏(min)度(du)比較低,特異性不強。
2、熒光酶標儀
優點:靈敏度高(gao),可實時檢(jian)測(ce),使用方便,檢(jian)測(ce)模式(shi)多樣。
缺點:易(yi)受外界干擾,激發光與發射光容易(yi)互(hu)相影響。
因此,兩者比較起來,各有自(zi)己的(de)優(you)缺點,根據自(zi)己的(de)實際情況(kuang)進行選擇即可。