一、高效液相色譜儀和液相色譜儀的定義和作用
高效液相色譜(pu)儀(yi)(HPLC)和液相色譜(pu)儀(yi)(LC)都是(shi)(shi)使用(yong)液體移動相將(jiang)樣品分(fen)(fen)離開(kai)來的儀(yi)器。HPLC是(shi)(shi)在LC的基礎(chu)上發展而來的,在分(fen)(fen)離性能、分(fen)(fen)析(xi)效率、檢測靈敏度等(deng)方(fang)面均有所提高。HPLC主要應(ying)用(yong)于有機化(hua)(hua)學(xue)、生化(hua)(hua)、藥(yao)學(xue)、環(huan)境分(fen)(fen)析(xi)等(deng)領域。
二、高效液相色譜儀和液相色譜儀的區別
雖然(ran)高效液(ye)相色譜儀和液(ye)相色譜儀都(dou)屬于液(ye)相色譜儀類(lei)別,但(dan)它們在分離性能、分析效率、檢測靈敏度等方面均(jun)有(you)所不同:
1、分離性能的區別
HPLC的分(fen)離(li)性(xing)能比LC更(geng)好,分(fen)離(li)效率更(geng)高,分(fen)離(li)劑更(geng)多樣化。HPLC在(zai)柱子填充材(cai)料和柱子直徑等方面具有更(geng)多變化的選擇(ze),可根據不同(tong)的樣品(pin)和要(yao)求設計(ji)出(chu)不同(tong)的柱子,從(cong)而實現(xian)更(geng)好的分(fen)離(li)效果。
2、分析效率的區別
HPLC擁(yong)有更(geng)快的(de)分(fen)析速(su)度和更(geng)快的(de)洗脫速(su)度,可以更(geng)快地得到分(fen)離和檢(jian)測結果。此外,HPLC中使用的(de)柱子通常較長,能夠保證更(geng)高的(de)峰分(fen)辨(bian)率(lv)和更(geng)好的(de)分(fen)析效(xiao)率(lv)。
3、檢測靈敏度的區別
HPLC的流動(dong)相流速更(geng)快,反相柱分離更(geng)好(hao),它能夠在較(jiao)短的時間內,更(geng)準確(que)地檢(jian)測出(chu)細微的化學物質,與LC相比,更(geng)適用于高(gao)靈敏度分析和有機化合物的分析。
三、高效液相色譜儀的分類有哪些
高(gao)效(xiao)液相(xiang)色譜(pu)(pu)儀(yi)主要有三類(lei):正相(xiang)高(gao)效(xiao)液相(xiang)色譜(pu)(pu)儀(yi)、反相(xiang)高(gao)效(xiao)液相(xiang)色譜(pu)(pu)儀(yi)和超高(gao)效(xiao)液相(xiang)色譜(pu)(pu)儀(yi)(超高(gao)效(xiao)液相(xiang)色譜(pu)(pu)儀(yi))。
1、盡管有名稱,正相(xiang)高(gao)效(xiao)(xiao)液相(xiang)色(se)譜儀并不(bu)是最(zui)常用的高(gao)效(xiao)(xiao)液相(xiang)色(se)譜儀方法。正相(xiang)高(gao)效(xiao)(xiao)液相(xiang)色(se)譜儀使用非(fei)極(ji)性(xing)溶劑作為流動相(xiang),硅膠顆粒作為固(gu)定(ding)相(xiang)。在(zai)(zai)常規高(gao)效(xiao)(xiao)液相(xiang)色(se)譜儀中,與非(fei)極(ji)性(xing)化(hua)合物相(xiang)比(bi),極(ji)性(xing)化(hua)合物在(zai)(zai)固(gu)定(ding)相(xiang)中會更(geng)長時間地粘附在(zai)(zai)極(ji)性(xing)有機硅上。因此,非(fei)極(ji)性(xing)化(hua)合物在(zai)(zai)正常高(gao)效(xiao)(xiao)液相(xiang)色(se)譜儀中的洗(xi)脫速(su)度更(geng)快(kuai)。孔徑一般在(zai)(zai)3微米左(zuo)右。
2、反(fan)(fan)相(xiang)(xiang)(xiang)(xiang)(xiang)(xiang)高(gao)效(xiao)液(ye)相(xiang)(xiang)(xiang)(xiang)(xiang)(xiang)色(se)(se)譜(pu)(pu)儀(yi)是最常見(jian)的(de)高(gao)效(xiao)液(ye)相(xiang)(xiang)(xiang)(xiang)(xiang)(xiang)色(se)(se)譜(pu)(pu)儀(yi)類型。在反(fan)(fan)相(xiang)(xiang)(xiang)(xiang)(xiang)(xiang)高(gao)效(xiao)液(ye)相(xiang)(xiang)(xiang)(xiang)(xiang)(xiang)色(se)(se)譜(pu)(pu)儀(yi)中,固定(ding)相(xiang)(xiang)(xiang)(xiang)(xiang)(xiang)被烴鏈(通常長8-18個(ge)碳)改(gai)性(xing),導致色(se)(se)譜(pu)(pu)柱變為非極(ji)性(xing)。也使用(yong)極(ji)性(xing)溶劑(ji)。在反(fan)(fan)相(xiang)(xiang)(xiang)(xiang)(xiang)(xiang)高(gao)效(xiao)液(ye)相(xiang)(xiang)(xiang)(xiang)(xiang)(xiang)色(se)(se)譜(pu)(pu)儀(yi)中,樣品中的(de)極(ji)性(xing)分(fen)子(zi)會與(yu)(yu)溶劑(ji)產生強烈的(de)吸引力,從(cong)而使它們(men)(men)更快地洗脫。它們(men)(men)也不會與(yu)(yu)非極(ji)性(xing)固定(ding)相(xiang)(xiang)(xiang)(xiang)(xiang)(xiang)相(xiang)(xiang)(xiang)(xiang)(xiang)(xiang)互(hu)作用(yong)。非極(ji)性(xing)化合(he)物會與(yu)(yu)固定(ding)相(xiang)(xiang)(xiang)(xiang)(xiang)(xiang)產生范(fan)德華力和分(fen)散相(xiang)(xiang)(xiang)(xiang)(xiang)(xiang)互(hu)作用(yong),因此(ci)它們(men)(men)的(de)洗脫速度較慢。
3、與(yu)高(gao)效(xiao)液相(xiang)色(se)(se)譜(pu)儀(yi)相(xiang)比(bi),超高(gao)效(xiao)液相(xiang)色(se)(se)譜(pu)儀(yi)運(yun)行(xing)速(su)(su)度更(geng)快(kuai)、使(shi)用的(de)(de)溶劑更(geng)少且(qie)分(fen)辨率(lv)更(geng)高(gao)。色(se)(se)譜(pu)柱也更(geng)小(xiao)(xiao),固定(ding)相(xiang)顆粒的(de)(de)尺寸要小(xiao)(xiao)得(de)多。較(jiao)小(xiao)(xiao)的(de)(de)孔(亞2微米)促進了分(fen)子更(geng)好的(de)(de)分(fen)離(li)和(he)分(fen)辨率(lv)。較(jiao)短的(de)(de)色(se)(se)譜(pu)柱還(huan)可以進行(xing)快(kuai)速(su)(su)檢(jian)測。然(ran)而,超高(gao)效(xiao)液相(xiang)色(se)(se)譜(pu)儀(yi)不(bu)能用于干燥或未過(guo)濾的(de)(de)樣品,因為較(jiao)小(xiao)(xiao)的(de)(de)孔會堵塞,這是一個昂貴(gui)且(qie)耗時的(de)(de)修復過(guo)程。