一、高效液相色譜儀和液相色譜儀的定義和作用

高效液(ye)(ye)相色(se)譜(pu)儀（HPLC）和液(ye)(ye)相色(se)譜(pu)儀（LC）都是(shi)使用(yong)液(ye)(ye)體移動相將樣品(pin)分(fen)(fen)離開來的(de)儀器。HPLC是(shi)在LC的(de)基礎上發展而來的(de)，在分(fen)(fen)離性能(neng)、分(fen)(fen)析效率、檢測(ce)靈敏度(du)等方面均(jun)有(you)所提高。HPLC主要(yao)應用(yong)于有(you)機化(hua)學(xue)、生化(hua)、藥學(xue)、環境分(fen)(fen)析等領域。

二、高效液相色譜儀和液相色譜儀的區別

雖然(ran)高效液相色(se)譜儀(yi)和液相色(se)譜儀(yi)都屬于液相色(se)譜儀(yi)類別(bie)，但它們在分(fen)離性能、分(fen)析效率(lv)、檢(jian)測靈敏度等方面均有所不同：

1、分離性能的區別

HPLC的(de)分(fen)離性(xing)能比LC更好，分(fen)離效(xiao)率更高(gao)，分(fen)離劑更多樣化。HPLC在柱子填充材料和(he)柱子直徑等(deng)方(fang)面具有更多變化的(de)選擇(ze)，可根據不同的(de)樣品和(he)要求設計出不同的(de)柱子，從而實現更好的(de)分(fen)離效(xiao)果。

2、分析效率的區別

HPLC擁有更(geng)快的(de)分析速(su)度和(he)更(geng)快的(de)洗脫速(su)度，可以更(geng)快地得到分離和(he)檢測結(jie)果(guo)。此外，HPLC中(zhong)使用的(de)柱子(zi)通常(chang)較長(chang)，能夠保證更(geng)高(gao)的(de)峰分辨率(lv)和(he)更(geng)好的(de)分析效率(lv)。

3、檢測靈敏度的區別

HPLC的流動相流速更(geng)快(kuai)，反相柱分(fen)(fen)離更(geng)好，它能夠在較(jiao)短的時間內，更(geng)準(zhun)確地檢測(ce)出細(xi)微(wei)的化學(xue)物質(zhi)，與LC相比，更(geng)適用于高靈敏度分(fen)(fen)析(xi)和(he)有機化合物的分(fen)(fen)析(xi)。

三、高效液相色譜儀的分類有哪些

高效液(ye)(ye)相(xiang)色(se)譜儀(yi)主要(yao)有三類：正相(xiang)高效液(ye)(ye)相(xiang)色(se)譜儀(yi)、反相(xiang)高效液(ye)(ye)相(xiang)色(se)譜儀(yi)和超高效液(ye)(ye)相(xiang)色(se)譜儀(yi)（超高效液(ye)(ye)相(xiang)色(se)譜儀(yi)）。

1、盡管有名稱，正相(xiang)(xiang)(xiang)高(gao)(gao)效(xiao)(xiao)(xiao)液相(xiang)(xiang)(xiang)色(se)譜儀并不(bu)是最常(chang)用的(de)高(gao)(gao)效(xiao)(xiao)(xiao)液相(xiang)(xiang)(xiang)色(se)譜儀方(fang)法。正相(xiang)(xiang)(xiang)高(gao)(gao)效(xiao)(xiao)(xiao)液相(xiang)(xiang)(xiang)色(se)譜儀使用非極(ji)(ji)性溶(rong)劑作為流動相(xiang)(xiang)(xiang)，硅(gui)膠顆粒(li)作為固定(ding)相(xiang)(xiang)(xiang)。在(zai)(zai)(zai)(zai)常(chang)規高(gao)(gao)效(xiao)(xiao)(xiao)液相(xiang)(xiang)(xiang)色(se)譜儀中，與非極(ji)(ji)性化合(he)物相(xiang)(xiang)(xiang)比(bi)，極(ji)(ji)性化合(he)物在(zai)(zai)(zai)(zai)固定(ding)相(xiang)(xiang)(xiang)中會更長時間地粘(zhan)附在(zai)(zai)(zai)(zai)極(ji)(ji)性有機(ji)硅(gui)上。因(yin)此，非極(ji)(ji)性化合(he)物在(zai)(zai)(zai)(zai)正常(chang)高(gao)(gao)效(xiao)(xiao)(xiao)液相(xiang)(xiang)(xiang)色(se)譜儀中的(de)洗(xi)脫速度更快。孔(kong)徑一般(ban)在(zai)(zai)(zai)(zai)3微米左右。

2、反相(xiang)(xiang)高效(xiao)液(ye)相(xiang)(xiang)色(se)譜儀(yi)是最常見的(de)高效(xiao)液(ye)相(xiang)(xiang)色(se)譜儀(yi)類型。在(zai)反相(xiang)(xiang)高效(xiao)液(ye)相(xiang)(xiang)色(se)譜儀(yi)中(zhong)(zhong)，固(gu)定相(xiang)(xiang)被烴鏈（通常長8-18個(ge)碳）改性(xing)(xing)，導致色(se)譜柱變為非極(ji)(ji)(ji)性(xing)(xing)。也使用(yong)極(ji)(ji)(ji)性(xing)(xing)溶劑(ji)。在(zai)反相(xiang)(xiang)高效(xiao)液(ye)相(xiang)(xiang)色(se)譜儀(yi)中(zhong)(zhong)，樣品中(zhong)(zhong)的(de)極(ji)(ji)(ji)性(xing)(xing)分子會(hui)與(yu)溶劑(ji)產(chan)生強烈的(de)吸引(yin)力，從而使它們更快(kuai)地洗(xi)脫(tuo)。它們也不會(hui)與(yu)非極(ji)(ji)(ji)性(xing)(xing)固(gu)定相(xiang)(xiang)相(xiang)(xiang)互作用(yong)。非極(ji)(ji)(ji)性(xing)(xing)化(hua)合(he)物會(hui)與(yu)固(gu)定相(xiang)(xiang)產(chan)生范德華力和分散相(xiang)(xiang)互作用(yong)，因此它們的(de)洗(xi)脫(tuo)速度較(jiao)慢(man)。

3、與高(gao)效(xiao)液(ye)相色(se)譜(pu)(pu)儀(yi)(yi)相比，超高(gao)效(xiao)液(ye)相色(se)譜(pu)(pu)儀(yi)(yi)運行速(su)度更(geng)快(kuai)、使用(yong)的(de)(de)溶劑更(geng)少且分辨率更(geng)高(gao)。色(se)譜(pu)(pu)柱也更(geng)小，固定相顆粒的(de)(de)尺(chi)寸(cun)要小得多(duo)。較(jiao)小的(de)(de)孔（亞2微米）促進(jin)了分子更(geng)好(hao)的(de)(de)分離和分辨率。較(jiao)短(duan)的(de)(de)色(se)譜(pu)(pu)柱還可以進(jin)行快(kuai)速(su)檢測。然而(er)，超高(gao)效(xiao)液(ye)相色(se)譜(pu)(pu)儀(yi)(yi)不能用(yong)于干燥(zao)或(huo)未(wei)過濾的(de)(de)樣品，因為較(jiao)小的(de)(de)孔會(hui)堵塞，這是一(yi)個昂貴(gui)且耗時的(de)(de)修復過程(cheng)。