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液相色譜儀操作流程是什么 液相色譜儀操作注意事項有哪些

本文章由注冊用戶 知識百寶箱 上傳提供 2024-08-31 評論 0
摘要:液相色譜儀引入了氣相色譜儀的理論,技術上采用了高壓輸液泵、高效固定相、梯度洗脫技術和高靈敏度檢測器,具有高壓、高速、高效、高靈敏度、高選擇性和應用范圍廣等特點。接下來本文將簡單介紹液相色譜儀操作流程是什么以及液相色譜儀操作注意事項有哪些,一起到文中來看看吧!

一、液相色譜儀操作流程是什么 ?

生活中液相色譜儀并不常見,液相色譜儀是利用混合物在液-固或不互溶的兩種液體之間分配比的差異,對混合物進行先分離,而后分析鑒定的儀器。那么液相色譜儀操作流程是什么呢?一(yi)起(qi)來看看吧!

首先(xian)先(xian)對流(liu)動相(xiang)(xiang)進(jin)行過濾(lv)(lv),根據需要選擇不同的濾(lv)(lv)膜,一般(ban)為(wei)有(you)機系和(he)水系,常(chang)用的孔徑為(wei)0.20um和(he)0.45um。然后對抽(chou)濾(lv)(lv)后的流(liu)動相(xiang)(xiang)進(jin)行超聲脫(tuo)氣10-20分(fen)鐘。一般(ban)情況下,流(liu)動相(xiang)(xiang)沖洗(xi)20-30分(fen)鐘后,儀器方(fang)可穩定(ding),最重要的是儀器基線走后,方(fang)可進(jin)樣測試(shi)。

二、液相色譜儀操作注意事項有哪些

1、流動相必須用HPLC級的試劑(ji),使用前(qian)過濾除去其中的顆粒性雜質(zhi)和其他物(wu)質(zhi)。

2、流動相過濾(lv)后(hou)(hou)要用超聲波脫氣(qi),脫氣(qi)后(hou)(hou)應該恢(hui)復到室溫后(hou)(hou)使用。

3、不能用純(chun)乙腈(jing)作為(wei)流動(dong)相,這樣會使單(dan)向閥粘(zhan)住(zhu)而導(dao)致泵不進液。

4、使用(yong)緩沖(chong)溶(rong)液時,做完樣(yang)品后應立(li)即(ji)用(yong)去(qu)離(li)子水沖(chong)洗(xi)(xi)管路及柱子一小時,然后用(yong)甲醇沖(chong)洗(xi)(xi)40分鐘(zhong)以上,以充(chong)分洗(xi)(xi)去(qu)離(li)子。對于柱塞(sai)桿外部,做完樣(yang)品后也必須(xu)用(yong)去(qu)離(li)子水沖(chong)洗(xi)(xi)。

5、長(chang)時間不用儀器,應(ying)該(gai)將柱子取下用堵頭封(feng)好保(bao)存,注(zhu)意不能用純水(shui)保(bao)存柱子,而應(ying)該(gai)用有(you)機(ji)相,因(yin)為(wei)純水(shui)易(yi)長(chang)霉。

6、每次做完樣(yang)(yang)品后應該用溶(rong)解(jie)樣(yang)(yang)品的(de)溶(rong)劑清洗進樣(yang)(yang)器(qi)。

7、C18柱絕對不能進蛋白樣(yang)品,血樣(yang)、生物樣(yang)品。

8、堵塞導致(zhi)壓力太大(da),按預柱(zhu)→混合器中(zhong)的過(guo)濾(lv)器→管路過(guo)濾(lv)器→單向(xiang)閥檢查并(bing)清(qing)洗。

9、氣泡會致使壓(ya)力不穩,重現性差,所以在(zai)使用(yong)過程中要盡量(liang)避免產生氣泡。

10、如果進(jin)液(ye)管內不(bu)進(jin)液(ye)體(ti)時,要使用注射器吸液(ye):通常在(zai)輸(shu)液(ye)前要進(jin)行流動(dong)相的清洗。

11、要注(zhu)意柱子的(de)pH值范圍,不得(de)注(zhu)射(she)強酸強堿的(de)樣(yang)(yang)品,特別是堿性樣(yang)(yang)品。

12、更(geng)換(huan)(huan)流動(dong)(dong)相時應該(gai)先將吸濾頭部分放入(ru)燒杯中邊振(zhen)動(dong)(dong)邊靖(jing)洗,然后插入(ru)新的流動(dong)(dong)相中。更(geng)換(huan)(huan)無互溶性的流動(dong)(dong)相時要用(yong)異(yi)丙醇過渡一(yi)下(xia)。

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