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高效液相色譜儀有什么特點 高效液相色譜儀原理是什么

本文章由注冊用戶 淺嘗不止— 上傳提供 2024-08-31 評論 0
摘要:1960年代,由于氣相色譜對高沸點有機物分析的局限性,為了分離蛋白質、核酸等不易氣化的大分子物質,氣相色譜的理論和方法被重新引入經典液相色譜。1960年代末科克蘭(Kirkland)、哈伯、荷瓦斯(Horvath)、莆黑斯、里普斯克等人開發了世界上第一臺高效液相色譜儀,開啟了高效液相色譜的時代。接下來本文將簡單介紹高效液相色譜儀有什么特點以及高效液相色譜儀原理是什么,一起到文中來看看吧!

一、高效液相色譜儀有什么特點

高效液相色(se)譜儀的顯(xian)著(zhu)特征(zheng)是高壓、高速、高效、高靈敏度、高選擇性和(he)應用范(fan)圍廣等。

1、高壓

高(gao)效(xiao)液(ye)相色譜儀(yi)為了獲(huo)得高(gao)柱效(xiao),使用的(de)固(gu)定相粒徑很小(<10um),液(ye)體流動相高(gao)速(su)通過時,產生很高(gao)的(de)壓力(li),工作壓力(li)范圍為1.5×107~3.5×107Pa。

2、高速

由于釆(bian)用(yong)了高壓,流動相(xiang)流速(su)快,所需的分(fen)析時間比經典液相(xiang)柱(zhu)色譜儀少得多。

3、高效

高效液相色譜儀的柱(zhu)效能約3萬塔板/米,氣(qi)相色(se)譜儀的柱(zhu)效能約2000塔板/米。

4、高靈敏度

由(you)于采用了(le)高(gao)靈敏度的(de)檢測器,最小檢測量(liang)(liang)可(ke)達10-9g,甚至10-11g,而所(suo)需樣(yang)品量(liang)(liang)很(hen)少(shao)。

5、高選擇性

可(ke)以通(tong)過(guo)控(kong)制流(liu)動相改善(shan)分(fen)離過(guo)程的(de)選擇性(xing)。

6、應用范圍廣

高效(xiao)液(ye)相色譜(pu)儀可(ke)用于(yu)高沸點、熱穩(wen)定性差以及具有(you)(you)生理活性物(wu)質(zhi)的分析(xi)。一般來(lai)說,沸點在(zai)450℃以下(xia),相對分子質(zhi)量小于(yu)450的有(you)(you)機(ji)物(wu)可(ke)用氣(qi)相色譜(pu)儀分析(xi),但這些物(wu)質(zhi)只占(zhan)有(you)(you)機(ji)物(wu)的15%~20%,其余(yu)的80%~85%有(you)(you)機(ji)物(wu)原則(ze)上可(ke)采用高效(xiao)液(ye)相色譜(pu)儀分析(xi)。

二、高效液相色譜儀原理是什么

高效(xiao)液(ye)相(xiang)(xiang)(xiang)色譜(pu)儀(yi)(HPLC)是應用高效(xiao)液(ye)相(xiang)(xiang)(xiang)色譜(pu)原(yuan)理,主要用于分(fen)析高沸點不(bu)易(yi)揮發的(de)、受熱不(bu)穩(wen)定的(de)和分(fen)子量大(da)的(de)有(you)機化(hua)合物的(de)儀(yi)器設(she)備。它由儲液(ye)器、泵(beng)(beng)、進樣(yang)(yang)器、色譜(pu)柱(zhu)、檢測器、記(ji)錄儀(yi)等幾(ji)部分(fen)組成(cheng)。儲液(ye)器中的(de)流動相(xiang)(xiang)(xiang)被高壓(ya)泵(beng)(beng)打入(ru)系(xi)統,樣(yang)(yang)品溶液(ye)經進樣(yang)(yang)器進入(ru)流動相(xiang)(xiang)(xiang),被流動相(xiang)(xiang)(xiang)載入(ru)色譜(pu)柱(zhu)(固定相(xiang)(xiang)(xiang))內(nei),由于樣(yang)(yang)品溶液(ye)中的(de)各(ge)組分(fen)在(zai)兩(liang)相(xiang)(xiang)(xiang)中具有(you)不(bu)同(tong)的(de)分(fen)配(pei)系(xi)數(shu),在(zai)兩(liang)相(xiang)(xiang)(xiang)中做相(xiang)(xiang)(xiang)對運動時(shi),經過(guo)反復多次的(de)吸附(fu)-解吸的(de)分(fen)配(pei)過(guo)程(cheng),各(ge)組分(fen)在(zai)移動速度(du)上產生(sheng)較大(da)的(de)差別(bie),被分(fen)離成(cheng)單個組分(fen)依次從柱(zhu)內(nei)流出(chu),通過(guo)檢測器時(shi),樣(yang)(yang)品濃度(du)被轉換(huan)成(cheng)電信號傳(chuan)送到記(ji)錄儀(yi),數(shu)據以圖譜(pu)形式打印出(chu)來。

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