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高效液相色譜儀有什么特點 高效液相色譜儀原理是什么

本文章由注冊用戶 淺嘗不止— 上傳提供 2024-08-31 評論 0
摘要:1960年代,由于氣相色譜對高沸點有機物分析的局限性,為了分離蛋白質、核酸等不易氣化的大分子物質,氣相色譜的理論和方法被重新引入經典液相色譜。1960年代末科克蘭(Kirkland)、哈伯、荷瓦斯(Horvath)、莆黑斯、里普斯克等人開發了世界上第一臺高效液相色譜儀,開啟了高效液相色譜的時代。接下來本文將簡單介紹高效液相色譜儀有什么特點以及高效液相色譜儀原理是什么,一起到文中來看看吧!

一、高效液相色譜儀有什么特點

高(gao)效(xiao)液相色譜儀的顯(xian)著特征是高(gao)壓、高(gao)速(su)、高(gao)效(xiao)、高(gao)靈敏度、高(gao)選擇性和應(ying)用范圍廣(guang)等(deng)。

1、高壓

高效液相色(se)譜儀為(wei)了獲得高柱效,使用的固定相粒(li)徑很小(<10um),液體(ti)流動(dong)相高速通過時,產生很高的壓(ya)力(li),工(gong)作壓(ya)力(li)范圍為(wei)1.5×107~3.5×107Pa。

2、高速

由于釆用了高(gao)壓(ya),流動相流速快,所需的分析時間比經典液(ye)相柱(zhu)色譜(pu)儀少得多。

3、高效

高效液相色譜儀的柱效(xiao)(xiao)能約(yue)3萬塔板/米,氣相色譜儀的柱效(xiao)(xiao)能約(yue)2000塔板/米。

4、高靈敏度

由于采用(yong)了高靈敏度的檢測(ce)器,最小檢測(ce)量(liang)可達10-9g,甚至10-11g,而(er)所需樣品量(liang)很(hen)少。

5、高選擇性

可以通過控制(zhi)流動(dong)相改善(shan)分離(li)過程(cheng)的選擇性。

6、應用范圍廣

高效液相色(se)譜儀可用(yong)于高沸點、熱穩定性差以及具有(you)生理活性物質(zhi)的(de)分(fen)(fen)析。一般來說,沸點在450℃以下,相對分(fen)(fen)子質(zhi)量小于450的(de)有(you)機(ji)物可用(yong)氣相色(se)譜儀分(fen)(fen)析,但(dan)這些物質(zhi)只占有(you)機(ji)物的(de)15%~20%,其余的(de)80%~85%有(you)機(ji)物原則上(shang)可采用(yong)高效液相色(se)譜儀分(fen)(fen)析。

二、高效液相色譜儀原理是什么

高效液(ye)(ye)相(xiang)(xiang)(xiang)(xiang)色譜儀(yi)(HPLC)是應(ying)用高效液(ye)(ye)相(xiang)(xiang)(xiang)(xiang)色譜原理,主要用于分析高沸(fei)點不易揮發的(de)(de)(de)、受熱不穩定(ding)的(de)(de)(de)和分子(zi)量大(da)的(de)(de)(de)有機化合物(wu)的(de)(de)(de)儀(yi)器(qi)設備。它由(you)儲(chu)液(ye)(ye)器(qi)、泵、進樣器(qi)、色譜柱(zhu)、檢測器(qi)、記錄(lu)儀(yi)等幾(ji)部分組成(cheng)。儲(chu)液(ye)(ye)器(qi)中(zhong)(zhong)(zhong)的(de)(de)(de)流動(dong)相(xiang)(xiang)(xiang)(xiang)被(bei)高壓(ya)泵打入(ru)(ru)系統,樣品溶(rong)液(ye)(ye)經進樣器(qi)進入(ru)(ru)流動(dong)相(xiang)(xiang)(xiang)(xiang),被(bei)流動(dong)相(xiang)(xiang)(xiang)(xiang)載入(ru)(ru)色譜柱(zhu)(固定(ding)相(xiang)(xiang)(xiang)(xiang))內,由(you)于樣品溶(rong)液(ye)(ye)中(zhong)(zhong)(zhong)的(de)(de)(de)各(ge)組分在兩(liang)相(xiang)(xiang)(xiang)(xiang)中(zhong)(zhong)(zhong)具(ju)有不同的(de)(de)(de)分配系數,在兩(liang)相(xiang)(xiang)(xiang)(xiang)中(zhong)(zhong)(zhong)做相(xiang)(xiang)(xiang)(xiang)對運(yun)動(dong)時(shi),經過(guo)反復多次的(de)(de)(de)吸(xi)(xi)附-解吸(xi)(xi)的(de)(de)(de)分配過(guo)程,各(ge)組分在移動(dong)速(su)度上產生(sheng)較(jiao)大(da)的(de)(de)(de)差別,被(bei)分離成(cheng)單個組分依次從柱(zhu)內流出,通過(guo)檢測器(qi)時(shi),樣品濃(nong)度被(bei)轉換成(cheng)電信號傳送到記錄(lu)儀(yi),數據以(yi)圖譜形(xing)式(shi)打印(yin)出來(lai)。

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