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高效液相色譜儀有什么特點 高效液相色譜儀原理是什么

本文章由注冊用戶 知識百寶箱 上傳提供 2024-08-31 評論 0
摘要:1960年代,由于氣相色譜對高沸點有機物分析的局限性,為了分離蛋白質、核酸等不易氣化的大分子物質,氣相色譜的理論和方法被重新引入經典液相色譜。1960年代末科克蘭(Kirkland)、哈伯、荷瓦斯(Horvath)、莆黑斯、里普斯克等人開發了世界上第一臺高效液相色譜儀,開啟了高效液相色譜的時代。接下來本文將簡單介紹高效液相色譜儀有什么特點以及高效液相色譜儀原理是什么,一起到文中來看看吧!

一、高效液相色譜儀有什么特點

高(gao)(gao)效(xiao)液(ye)相色(se)譜儀的顯著特征是高(gao)(gao)壓、高(gao)(gao)速、高(gao)(gao)效(xiao)、高(gao)(gao)靈敏度、高(gao)(gao)選擇性和應用(yong)范圍廣等。

1、高壓

高效液相色譜儀(yi)為了獲得高柱效,使用的(de)固定相粒徑很小(xiao)(<10um),液體流動相高速(su)通過時,產生(sheng)很高的(de)壓力,工作壓力范圍(wei)為1.5×107~3.5×107Pa。

2、高速

由于釆(bian)用(yong)了高(gao)壓,流動相流速快,所需(xu)的(de)分(fen)析時間(jian)比(bi)經典液相柱色譜儀少得多。

3、高效

高效液相色譜儀的柱效(xiao)能約3萬(wan)塔(ta)(ta)板(ban)/米,氣(qi)相(xiang)色譜儀的柱效(xiao)能約2000塔(ta)(ta)板(ban)/米。

4、高靈敏度

由于(yu)采用了高靈敏度的檢測器,最小(xiao)檢測量(liang)可達10-9g,甚至10-11g,而所需樣品量(liang)很少。

5、高選擇性

可以(yi)通過控(kong)制(zhi)流動(dong)相改善分離(li)過程(cheng)的(de)選擇性。

6、應用范圍廣

高(gao)效液(ye)相(xiang)(xiang)色譜儀可用于(yu)高(gao)沸(fei)點、熱穩定性差以(yi)及(ji)具(ju)有生理活性物(wu)(wu)質的(de)分析。一般來說(shuo),沸(fei)點在450℃以(yi)下,相(xiang)(xiang)對分子質量小于(yu)450的(de)有機(ji)物(wu)(wu)可用氣相(xiang)(xiang)色譜儀分析,但這些(xie)物(wu)(wu)質只占有機(ji)物(wu)(wu)的(de)15%~20%,其余的(de)80%~85%有機(ji)物(wu)(wu)原則上可采用高(gao)效液(ye)相(xiang)(xiang)色譜儀分析。

二、高效液相色譜儀原理是什么

高效液(ye)(ye)(ye)(ye)相(xiang)(xiang)(xiang)色(se)(se)譜儀(yi)(yi)(HPLC)是應用高效液(ye)(ye)(ye)(ye)相(xiang)(xiang)(xiang)色(se)(se)譜原理(li),主要用于分(fen)(fen)(fen)(fen)析高沸點不(bu)易(yi)揮發的(de)、受熱(re)不(bu)穩定(ding)的(de)和分(fen)(fen)(fen)(fen)子量大的(de)有(you)機化合物的(de)儀(yi)(yi)器(qi)設備。它(ta)由(you)儲(chu)液(ye)(ye)(ye)(ye)器(qi)、泵、進(jin)樣(yang)(yang)器(qi)、色(se)(se)譜柱(zhu)、檢測器(qi)、記錄儀(yi)(yi)等幾部分(fen)(fen)(fen)(fen)組(zu)成。儲(chu)液(ye)(ye)(ye)(ye)器(qi)中(zhong)的(de)流動相(xiang)(xiang)(xiang)被高壓(ya)泵打(da)入(ru)系(xi)統,樣(yang)(yang)品溶(rong)液(ye)(ye)(ye)(ye)經進(jin)樣(yang)(yang)器(qi)進(jin)入(ru)流動相(xiang)(xiang)(xiang),被流動相(xiang)(xiang)(xiang)載(zai)入(ru)色(se)(se)譜柱(zhu)(固(gu)定(ding)相(xiang)(xiang)(xiang))內(nei),由(you)于樣(yang)(yang)品溶(rong)液(ye)(ye)(ye)(ye)中(zhong)的(de)各(ge)組(zu)分(fen)(fen)(fen)(fen)在兩相(xiang)(xiang)(xiang)中(zhong)具(ju)有(you)不(bu)同的(de)分(fen)(fen)(fen)(fen)配(pei)系(xi)數,在兩相(xiang)(xiang)(xiang)中(zhong)做相(xiang)(xiang)(xiang)對運動時,經過(guo)反復多(duo)次的(de)吸附-解吸的(de)分(fen)(fen)(fen)(fen)配(pei)過(guo)程,各(ge)組(zu)分(fen)(fen)(fen)(fen)在移動速度(du)上產生(sheng)較大的(de)差別,被分(fen)(fen)(fen)(fen)離成單個組(zu)分(fen)(fen)(fen)(fen)依次從柱(zhu)內(nei)流出,通(tong)過(guo)檢測器(qi)時,樣(yang)(yang)品濃度(du)被轉換成電(dian)信號傳送到記錄儀(yi)(yi),數據以圖譜形式打(da)印(yin)出來(lai)。

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