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高效液相色譜儀有什么特點 高效液相色譜儀原理是什么

本文章由注冊用戶 知識百寶箱 上傳提供 2024-08-31 評論 0
摘要:1960年代,由于氣相色譜對高沸點有機物分析的局限性,為了分離蛋白質、核酸等不易氣化的大分子物質,氣相色譜的理論和方法被重新引入經典液相色譜。1960年代末科克蘭(Kirkland)、哈伯、荷瓦斯(Horvath)、莆黑斯、里普斯克等人開發了世界上第一臺高效液相色譜儀,開啟了高效液相色譜的時代。接下來本文將簡單介紹高效液相色譜儀有什么特點以及高效液相色譜儀原理是什么,一起到文中來看看吧!

一、高效液相色譜儀有什么特點

高(gao)效液相色譜(pu)儀的顯(xian)著特(te)征(zheng)是高(gao)壓、高(gao)速、高(gao)效、高(gao)靈(ling)敏(min)度、高(gao)選擇性和應用范圍廣等。

1、高壓

高(gao)效(xiao)液相(xiang)色譜儀為了(le)獲得高(gao)柱效(xiao),使用的固定相(xiang)粒徑很(hen)小(<10um),液體流動相(xiang)高(gao)速通過時,產生很(hen)高(gao)的壓力,工作壓力范圍(wei)為1.5×107~3.5×107Pa。

2、高速

由于釆用(yong)了高(gao)壓,流動(dong)相流速快,所(suo)需的分析時間比(bi)經典液相柱色譜儀少得(de)多。

3、高效

高效液相色譜儀的柱效能約(yue)3萬塔(ta)(ta)板/米(mi),氣相色譜儀的柱效能約(yue)2000塔(ta)(ta)板/米(mi)。

4、高靈敏度

由于采用了高靈敏度(du)的檢測器,最(zui)小檢測量(liang)可達10-9g,甚至10-11g,而所(suo)需樣(yang)品量(liang)很(hen)少。

5、高選擇性

可(ke)以通過控制流動(dong)相改善(shan)分離過程(cheng)的選擇性(xing)。

6、應用范圍廣

高(gao)效液(ye)相(xiang)色譜(pu)儀可(ke)(ke)用于高(gao)沸(fei)點(dian)(dian)、熱穩定性差以(yi)及具有(you)生理活性物(wu)質的(de)分(fen)析(xi)。一般來說(shuo),沸(fei)點(dian)(dian)在450℃以(yi)下,相(xiang)對分(fen)子質量小(xiao)于450的(de)有(you)機(ji)(ji)物(wu)可(ke)(ke)用氣相(xiang)色譜(pu)儀分(fen)析(xi),但(dan)這(zhe)些物(wu)質只占有(you)機(ji)(ji)物(wu)的(de)15%~20%,其余(yu)的(de)80%~85%有(you)機(ji)(ji)物(wu)原則上可(ke)(ke)采用高(gao)效液(ye)相(xiang)色譜(pu)儀分(fen)析(xi)。

二、高效液相色譜儀原理是什么

高(gao)(gao)效液(ye)相色(se)譜儀(yi)(yi)(HPLC)是應用(yong)高(gao)(gao)效液(ye)相色(se)譜原理,主要用(yong)于分析(xi)高(gao)(gao)沸點不易揮(hui)發(fa)的(de)(de)、受(shou)熱不穩定的(de)(de)和分子量大的(de)(de)有機化合物(wu)的(de)(de)儀(yi)(yi)器設備。它由儲液(ye)器、泵(beng)、進樣(yang)(yang)(yang)器、色(se)譜柱(zhu)、檢(jian)測器、記錄儀(yi)(yi)等幾部分組(zu)(zu)成(cheng)。儲液(ye)器中(zhong)的(de)(de)流(liu)(liu)動(dong)相被高(gao)(gao)壓泵(beng)打入(ru)系統,樣(yang)(yang)(yang)品溶液(ye)經進樣(yang)(yang)(yang)器進入(ru)流(liu)(liu)動(dong)相,被流(liu)(liu)動(dong)相載入(ru)色(se)譜柱(zhu)(固定相)內,由于樣(yang)(yang)(yang)品溶液(ye)中(zhong)的(de)(de)各(ge)組(zu)(zu)分在(zai)兩相中(zhong)具有不同的(de)(de)分配(pei)系數(shu),在(zai)兩相中(zhong)做相對運動(dong)時,經過反(fan)復(fu)多次的(de)(de)吸(xi)附-解(jie)吸(xi)的(de)(de)分配(pei)過程,各(ge)組(zu)(zu)分在(zai)移動(dong)速(su)度上(shang)產(chan)生較大的(de)(de)差別,被分離成(cheng)單(dan)個組(zu)(zu)分依次從柱(zhu)內流(liu)(liu)出,通過檢(jian)測器時,樣(yang)(yang)(yang)品濃度被轉換成(cheng)電(dian)信號傳送到(dao)記錄儀(yi)(yi),數(shu)據以圖譜形式打印出來。

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