一、高效液相色譜儀和液相色譜儀的定義和作用

高效液(ye)相色譜儀（HPLC）和液(ye)相色譜儀（LC）都是使用(yong)液(ye)體移動相將樣(yang)品(pin)分(fen)離開來的儀器。HPLC是在LC的基礎上發展而來的，在分(fen)離性能、分(fen)析效率、檢測靈(ling)敏度等(deng)方面均有所提高。HPLC主(zhu)要(yao)應用(yong)于有機化(hua)學、生化(hua)、藥學、環境(jing)分(fen)析等(deng)領域。

二、高效液相色譜儀和液相色譜儀的區別

雖然(ran)高效(xiao)液(ye)相(xiang)(xiang)色(se)譜(pu)(pu)儀和液(ye)相(xiang)(xiang)色(se)譜(pu)(pu)儀都屬(shu)于液(ye)相(xiang)(xiang)色(se)譜(pu)(pu)儀類別(bie)，但它們在分離性能、分析效(xiao)率、檢測靈(ling)敏度(du)等方面均有所(suo)不同：

1、分離性能的區別

HPLC的(de)分離性能比LC更(geng)好，分離效(xiao)率(lv)更(geng)高，分離劑更(geng)多(duo)樣化。HPLC在柱(zhu)子填充材料和柱(zhu)子直徑等方(fang)面具有更(geng)多(duo)變化的(de)選擇(ze)，可根據(ju)不(bu)同(tong)的(de)樣品和要求設計出不(bu)同(tong)的(de)柱(zhu)子，從而實現更(geng)好的(de)分離效(xiao)果(guo)。

2、分析效率的區別

HPLC擁有(you)更(geng)快的(de)分(fen)析(xi)速度和(he)更(geng)快的(de)洗脫(tuo)速度，可以更(geng)快地得到分(fen)離和(he)檢測(ce)結果。此外，HPLC中使用的(de)柱子(zi)通常較(jiao)長，能夠保(bao)證更(geng)高的(de)峰分(fen)辨率和(he)更(geng)好的(de)分(fen)析(xi)效(xiao)率。

3、檢測靈敏度的區別

HPLC的(de)流(liu)動相流(liu)速更快，反相柱(zhu)分離更好(hao)，它能(neng)夠在較短(duan)的(de)時間內，更準(zhun)確地檢測出(chu)細微的(de)化學(xue)物(wu)(wu)質(zhi)，與LC相比，更適(shi)用(yong)于高(gao)靈敏(min)度分析和有機化合物(wu)(wu)的(de)分析。

三、高效液相色譜儀的分類有哪些

高(gao)效(xiao)(xiao)(xiao)液相(xiang)色(se)譜(pu)(pu)儀(yi)(yi)主(zhu)要有三類：正相(xiang)高(gao)效(xiao)(xiao)(xiao)液相(xiang)色(se)譜(pu)(pu)儀(yi)(yi)、反相(xiang)高(gao)效(xiao)(xiao)(xiao)液相(xiang)色(se)譜(pu)(pu)儀(yi)(yi)和超高(gao)效(xiao)(xiao)(xiao)液相(xiang)色(se)譜(pu)(pu)儀(yi)(yi)（超高(gao)效(xiao)(xiao)(xiao)液相(xiang)色(se)譜(pu)(pu)儀(yi)(yi)）。

1、盡管有名(ming)稱，正(zheng)相(xiang)高(gao)(gao)效(xiao)液(ye)相(xiang)色譜(pu)儀(yi)(yi)并(bing)不是最(zui)常(chang)用的高(gao)(gao)效(xiao)液(ye)相(xiang)色譜(pu)儀(yi)(yi)方法。正(zheng)相(xiang)高(gao)(gao)效(xiao)液(ye)相(xiang)色譜(pu)儀(yi)(yi)使用非(fei)(fei)極性溶劑作為流動相(xiang)，硅(gui)(gui)膠顆粒作為固定(ding)相(xiang)。在(zai)(zai)常(chang)規(gui)高(gao)(gao)效(xiao)液(ye)相(xiang)色譜(pu)儀(yi)(yi)中(zhong)，與非(fei)(fei)極性化合(he)物相(xiang)比，極性化合(he)物在(zai)(zai)固定(ding)相(xiang)中(zhong)會(hui)更長時間地粘(zhan)附在(zai)(zai)極性有機硅(gui)(gui)上。因此(ci)，非(fei)(fei)極性化合(he)物在(zai)(zai)正(zheng)常(chang)高(gao)(gao)效(xiao)液(ye)相(xiang)色譜(pu)儀(yi)(yi)中(zhong)的洗(xi)脫速度更快。孔徑一(yi)般在(zai)(zai)3微米左右。

2、反相(xiang)高(gao)效液相(xiang)色(se)譜(pu)儀是(shi)最常見的(de)高(gao)效液相(xiang)色(se)譜(pu)儀類型。在反相(xiang)高(gao)效液相(xiang)色(se)譜(pu)儀中(zhong)，固(gu)定相(xiang)被烴鏈(lian)（通常長8-18個碳）改性(xing)，導致色(se)譜(pu)柱變(bian)為非極性(xing)。也使用極性(xing)溶劑(ji)。在反相(xiang)高(gao)效液相(xiang)色(se)譜(pu)儀中(zhong)，樣品中(zhong)的(de)極性(xing)分子會(hui)與溶劑(ji)產生(sheng)強烈的(de)吸(xi)引力，從而(er)使它(ta)們更快(kuai)地洗脫(tuo)。它(ta)們也不會(hui)與非極性(xing)固(gu)定相(xiang)相(xiang)互(hu)作(zuo)用。非極性(xing)化合(he)物會(hui)與固(gu)定相(xiang)產生(sheng)范德華力和分散相(xiang)互(hu)作(zuo)用，因此它(ta)們的(de)洗脫(tuo)速度較慢。

3、與高效(xiao)液(ye)相(xiang)(xiang)色譜儀相(xiang)(xiang)比，超高效(xiao)液(ye)相(xiang)(xiang)色譜儀運行速度(du)更(geng)快、使用的(de)溶劑更(geng)少且分(fen)辨率(lv)更(geng)高。色譜柱(zhu)也更(geng)小，固定(ding)相(xiang)(xiang)顆粒的(de)尺寸要小得(de)多(duo)。較小的(de)孔(kong)（亞2微米）促進了分(fen)子更(geng)好的(de)分(fen)離和(he)分(fen)辨率(lv)。較短的(de)色譜柱(zhu)還(huan)可以進行快速檢測。然(ran)而，超高效(xiao)液(ye)相(xiang)(xiang)色譜儀不能用于干燥或未過(guo)濾的(de)樣品，因(yin)為較小的(de)孔(kong)會堵塞，這是一個昂貴且耗時的(de)修(xiu)復(fu)過(guo)程(cheng)。