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液相色譜儀操作流程是什么 液相色譜儀操作注意事項有哪些

本文章由注冊用戶 知識百寶箱 上傳提供 2024-08-31 評論 0
摘要:液相色譜儀引入了氣相色譜儀的理論,技術上采用了高壓輸液泵、高效固定相、梯度洗脫技術和高靈敏度檢測器,具有高壓、高速、高效、高靈敏度、高選擇性和應用范圍廣等特點。接下來本文將簡單介紹液相色譜儀操作流程是什么以及液相色譜儀操作注意事項有哪些,一起到文中來看看吧!

一、液相色譜儀操作流程是什么 ?

生活中液相色譜儀并不常見,液相色譜儀是利用混合物在液-固或不互溶的兩種液體之間分配比的差異,對混合物進行先分離,而后分析鑒定的儀器。那么液相色譜儀操作流程是什么呢?一起來看看吧!

首先(xian)先(xian)對流(liu)(liu)動相進(jin)行過濾(lv)(lv),根據(ju)需(xu)要(yao)選擇不同的濾(lv)(lv)膜(mo),一般為有機系(xi)和水系(xi),常用的孔徑為0.20um和0.45um。然(ran)后(hou)(hou)對抽濾(lv)(lv)后(hou)(hou)的流(liu)(liu)動相進(jin)行超聲脫(tuo)氣10-20分鐘。一般情況下,流(liu)(liu)動相沖洗20-30分鐘后(hou)(hou),儀器(qi)方可穩定,最(zui)重(zhong)要(yao)的是儀器(qi)基線走后(hou)(hou),方可進(jin)樣(yang)測試。

二、液相色譜儀操作注意事項有哪些

1、流動相必須(xu)用(yong)(yong)HPLC級的試劑,使(shi)用(yong)(yong)前過(guo)濾除去(qu)其中的顆粒性雜質和(he)其他物質。

2、流動(dong)相過濾后(hou)要(yao)用超聲(sheng)波脫(tuo)氣(qi),脫(tuo)氣(qi)后(hou)應該恢復到室(shi)溫后(hou)使用。

3、不能用純(chun)乙(yi)腈(jing)作為(wei)流動相,這樣(yang)會使單向閥粘(zhan)住(zhu)而導致泵(beng)不進(jin)液(ye)。

4、使用(yong)(yong)緩沖(chong)溶液時(shi),做完(wan)樣品后(hou)應(ying)立即用(yong)(yong)去(qu)離(li)子水(shui)沖(chong)洗(xi)管(guan)路及(ji)柱子一小時(shi),然后(hou)用(yong)(yong)甲(jia)醇(chun)沖(chong)洗(xi)40分鐘(zhong)以上,以充分洗(xi)去(qu)離(li)子。對于柱塞(sai)桿(gan)外部,做完(wan)樣品后(hou)也必須用(yong)(yong)去(qu)離(li)子水(shui)沖(chong)洗(xi)。

5、長時間不用儀器,應該將柱子取下用堵頭(tou)封好(hao)保存,注意不能用純水保存柱子,而應該用有(you)機(ji)相,因為純水易長霉。

6、每次做完樣品(pin)后(hou)應該(gai)用溶(rong)解樣品(pin)的溶(rong)劑(ji)清(qing)洗進樣器。

7、C18柱絕對不能進蛋白樣(yang)品(pin),血樣(yang)、生物(wu)樣(yang)品(pin)。

8、堵(du)塞導致壓力太大,按預柱→混合器中(zhong)的過(guo)濾器→管路過(guo)濾器→單向閥檢查并清洗。

9、氣泡會(hui)致(zhi)使(shi)壓(ya)力(li)不穩,重現性差,所以在使(shi)用過程中要盡(jin)量避免產(chan)生氣泡。

10、如果(guo)進(jin)液(ye)管內不(bu)進(jin)液(ye)體(ti)時,要使用注射器(qi)吸液(ye):通常在輸(shu)液(ye)前要進(jin)行流動相的清洗(xi)。

11、要注(zhu)(zhu)意柱子(zi)的pH值范圍,不得注(zhu)(zhu)射強酸強堿(jian)的樣品,特別(bie)是(shi)堿(jian)性樣品。

12、更換流(liu)動(dong)相(xiang)時應該(gai)先將吸濾頭部分放入(ru)燒杯中邊振動(dong)邊靖洗,然后(hou)插入(ru)新的流(liu)動(dong)相(xiang)中。更換無互溶性(xing)的流(liu)動(dong)相(xiang)時要用異丙醇(chun)過渡(du)一下。

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