一、液相色譜儀操作流程是什么 ?
生活中液相色譜儀并不常見,液相色譜儀是利用混合物在液-固或不互溶的兩種液體之間分配比的差異,對混合物進行先分離,而后分析鑒定的儀器。那么液相色譜儀操作流程是什么呢?一起來看看吧!
首先(xian)先(xian)對流(liu)(liu)動相進(jin)行過濾(lv)(lv),根據(ju)需(xu)要(yao)選擇不同的濾(lv)(lv)膜(mo),一般為有機系(xi)和水系(xi),常用的孔徑為0.20um和0.45um。然(ran)后(hou)(hou)對抽濾(lv)(lv)后(hou)(hou)的流(liu)(liu)動相進(jin)行超聲脫(tuo)氣10-20分鐘。一般情況下,流(liu)(liu)動相沖洗20-30分鐘后(hou)(hou),儀器(qi)方可穩定,最(zui)重(zhong)要(yao)的是儀器(qi)基線走后(hou)(hou),方可進(jin)樣(yang)測試。
二、液相色譜儀操作注意事項有哪些
1、流動相必須(xu)用(yong)(yong)HPLC級的試劑,使(shi)用(yong)(yong)前過(guo)濾除去(qu)其中的顆粒性雜質和(he)其他物質。
2、流動(dong)相過濾后(hou)要(yao)用超聲(sheng)波脫(tuo)氣(qi),脫(tuo)氣(qi)后(hou)應該恢復到室(shi)溫后(hou)使用。
3、不能用純(chun)乙(yi)腈(jing)作為(wei)流動相,這樣(yang)會使單向閥粘(zhan)住(zhu)而導致泵(beng)不進(jin)液(ye)。
4、使用(yong)(yong)緩沖(chong)溶液時(shi),做完(wan)樣品后(hou)應(ying)立即用(yong)(yong)去(qu)離(li)子水(shui)沖(chong)洗(xi)管(guan)路及(ji)柱子一小時(shi),然后(hou)用(yong)(yong)甲(jia)醇(chun)沖(chong)洗(xi)40分鐘(zhong)以上,以充分洗(xi)去(qu)離(li)子。對于柱塞(sai)桿(gan)外部,做完(wan)樣品后(hou)也必須用(yong)(yong)去(qu)離(li)子水(shui)沖(chong)洗(xi)。
5、長時間不用儀器,應該將柱子取下用堵頭(tou)封好(hao)保存,注意不能用純水保存柱子,而應該用有(you)機(ji)相,因為純水易長霉。
6、每次做完樣品(pin)后(hou)應該(gai)用溶(rong)解樣品(pin)的溶(rong)劑(ji)清(qing)洗進樣器。
7、C18柱絕對不能進蛋白樣(yang)品(pin),血樣(yang)、生物(wu)樣(yang)品(pin)。
8、堵(du)塞導致壓力太大,按預柱→混合器中(zhong)的過(guo)濾器→管路過(guo)濾器→單向閥檢查并清洗。
9、氣泡會(hui)致(zhi)使(shi)壓(ya)力(li)不穩,重現性差,所以在使(shi)用過程中要盡(jin)量避免產(chan)生氣泡。
10、如果(guo)進(jin)液(ye)管內不(bu)進(jin)液(ye)體(ti)時,要使用注射器(qi)吸液(ye):通常在輸(shu)液(ye)前要進(jin)行流動相的清洗(xi)。
11、要注(zhu)(zhu)意柱子(zi)的pH值范圍,不得注(zhu)(zhu)射強酸強堿(jian)的樣品,特別(bie)是(shi)堿(jian)性樣品。
12、更換流(liu)動(dong)相(xiang)時應該(gai)先將吸濾頭部分放入(ru)燒杯中邊振動(dong)邊靖洗,然后(hou)插入(ru)新的流(liu)動(dong)相(xiang)中。更換無互溶性(xing)的流(liu)動(dong)相(xiang)時要用異丙醇(chun)過渡(du)一下。