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高效液相色譜儀有什么特點 高效液相色譜儀原理是什么

本文章由注冊用戶 知識百寶箱 上傳提供 2024-08-31 評論 0
摘要:1960年代,由于氣相色譜對高沸點有機物分析的局限性,為了分離蛋白質、核酸等不易氣化的大分子物質,氣相色譜的理論和方法被重新引入經典液相色譜。1960年代末科克蘭(Kirkland)、哈伯、荷瓦斯(Horvath)、莆黑斯、里普斯克等人開發了世界上第一臺高效液相色譜儀,開啟了高效液相色譜的時代。接下來本文將簡單介紹高效液相色譜儀有什么特點以及高效液相色譜儀原理是什么,一起到文中來看看吧!

一、高效液相色譜儀有什么特點

高(gao)效液相色譜儀的顯著特征是高(gao)壓、高(gao)速、高(gao)效、高(gao)靈(ling)敏(min)度(du)、高(gao)選(xuan)擇性和應(ying)用范圍(wei)廣等(deng)。

1、高壓

高效液(ye)相(xiang)色譜儀為(wei)了獲得(de)高柱效,使用(yong)的固定相(xiang)粒徑很(hen)小(<10um),液(ye)體流(liu)動相(xiang)高速通過時,產生(sheng)很(hen)高的壓(ya)力(li),工(gong)作壓(ya)力(li)范圍(wei)為(wei)1.5×107~3.5×107Pa。

2、高速

由于(yu)釆用(yong)了高壓,流(liu)(liu)動相流(liu)(liu)速(su)快,所需的分析時間比經典液(ye)相柱色(se)譜儀少得多(duo)。

3、高效

高效液相色譜儀的柱效能約(yue)3萬塔板/米,氣相色譜儀的柱效能約(yue)2000塔板/米。

4、高靈敏度

由于采(cai)用了高靈敏度(du)的檢測器,最(zui)小檢測量可達(da)10-9g,甚至10-11g,而(er)所需樣(yang)品量很少。

5、高選擇性

可以通過控(kong)制流(liu)動相(xiang)改善分(fen)離過程的選(xuan)擇性(xing)。

6、應用范圍廣

高效液(ye)相色(se)譜(pu)儀可(ke)用于高沸點、熱穩定性差(cha)以及具(ju)有生(sheng)理活性物質的分(fen)析(xi)。一般來說(shuo),沸點在450℃以下,相對分(fen)子質量小于450的有機物可(ke)用氣(qi)相色(se)譜(pu)儀分(fen)析(xi),但這些物質只占有機物的15%~20%,其余的80%~85%有機物原則上可(ke)采用高效液(ye)相色(se)譜(pu)儀分(fen)析(xi)。

二、高效液相色譜儀原理是什么

高效(xiao)液相(xiang)(xiang)色(se)譜(pu)儀(yi)(HPLC)是應用(yong)(yong)高效(xiao)液相(xiang)(xiang)色(se)譜(pu)原理,主要用(yong)(yong)于分(fen)(fen)析高沸點不(bu)易(yi)揮發的(de)(de)(de)、受熱不(bu)穩(wen)定的(de)(de)(de)和分(fen)(fen)子量大的(de)(de)(de)有機化合物的(de)(de)(de)儀(yi)器(qi)(qi)(qi)設備。它由儲液器(qi)(qi)(qi)、泵、進(jin)樣(yang)(yang)器(qi)(qi)(qi)、色(se)譜(pu)柱、檢測器(qi)(qi)(qi)、記(ji)錄(lu)儀(yi)等幾部分(fen)(fen)組成。儲液器(qi)(qi)(qi)中的(de)(de)(de)流動相(xiang)(xiang)被高壓泵打入(ru)系(xi)統(tong),樣(yang)(yang)品溶(rong)液經進(jin)樣(yang)(yang)器(qi)(qi)(qi)進(jin)入(ru)流動相(xiang)(xiang),被流動相(xiang)(xiang)載入(ru)色(se)譜(pu)柱(固定相(xiang)(xiang))內,由于樣(yang)(yang)品溶(rong)液中的(de)(de)(de)各(ge)組分(fen)(fen)在兩(liang)相(xiang)(xiang)中具有不(bu)同(tong)的(de)(de)(de)分(fen)(fen)配系(xi)數(shu)(shu),在兩(liang)相(xiang)(xiang)中做相(xiang)(xiang)對運動時(shi),經過反復多次的(de)(de)(de)吸(xi)附-解(jie)吸(xi)的(de)(de)(de)分(fen)(fen)配過程,各(ge)組分(fen)(fen)在移動速(su)度上產(chan)生(sheng)較大的(de)(de)(de)差別,被分(fen)(fen)離成單個組分(fen)(fen)依次從(cong)柱內流出,通過檢測器(qi)(qi)(qi)時(shi),樣(yang)(yang)品濃度被轉(zhuan)換(huan)成電信號(hao)傳送到記(ji)錄(lu)儀(yi),數(shu)(shu)據以圖(tu)譜(pu)形(xing)式打印出來。

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