一、高效液相色譜儀和液相色譜儀的定義和作用
高效液相(xiang)色(se)譜儀(HPLC)和液相(xiang)色(se)譜儀(LC)都是(shi)使(shi)用液體移動相(xiang)將樣品分(fen)離(li)開來(lai)的(de)儀器。HPLC是(shi)在LC的(de)基礎上(shang)發(fa)展(zhan)而來(lai)的(de),在分(fen)離(li)性(xing)能、分(fen)析效率(lv)、檢測靈敏度等方面均(jun)有所提高。HPLC主要應用于有機化(hua)學、生化(hua)、藥(yao)學、環境分(fen)析等領域(yu)。
二、高效液相色譜儀和液相色譜儀的區別
雖然高效(xiao)液相色譜(pu)儀(yi)和液相色譜(pu)儀(yi)都屬于液相色譜(pu)儀(yi)類別,但它(ta)們在分(fen)離性能、分(fen)析(xi)效(xiao)率(lv)、檢測靈敏(min)度等(deng)方面均(jun)有所不同:
1、分離性能的區別
HPLC的(de)(de)分(fen)離(li)性能比(bi)LC更好(hao),分(fen)離(li)效率更高,分(fen)離(li)劑(ji)更多(duo)樣化。HPLC在柱(zhu)(zhu)子填充材料(liao)和柱(zhu)(zhu)子直徑(jing)等方面具有(you)更多(duo)變化的(de)(de)選擇,可根據不同的(de)(de)樣品和要求(qiu)設計出不同的(de)(de)柱(zhu)(zhu)子,從而(er)實現更好(hao)的(de)(de)分(fen)離(li)效果。
2、分析效率的區別
HPLC擁有更(geng)快(kuai)的分(fen)析(xi)速(su)度(du)和(he)(he)更(geng)快(kuai)的洗脫(tuo)速(su)度(du),可以更(geng)快(kuai)地得到分(fen)離和(he)(he)檢測結果。此外,HPLC中使用(yong)的柱子(zi)通常較長(chang),能夠保證(zheng)更(geng)高的峰分(fen)辨率(lv)和(he)(he)更(geng)好的分(fen)析(xi)效(xiao)率(lv)。
3、檢測靈敏度的區別
HPLC的流動(dong)相(xiang)流速更快,反相(xiang)柱(zhu)分(fen)離更好,它能夠在較短的時間(jian)內(nei),更準(zhun)確地檢測出細微的化學物質(zhi),與LC相(xiang)比,更適用于(yu)高靈敏(min)度分(fen)析(xi)和有機化合物的分(fen)析(xi)。
三、高效液相色譜儀的分類有哪些
高效(xiao)(xiao)液(ye)相(xiang)色(se)(se)(se)譜(pu)儀主要(yao)有三類:正相(xiang)高效(xiao)(xiao)液(ye)相(xiang)色(se)(se)(se)譜(pu)儀、反相(xiang)高效(xiao)(xiao)液(ye)相(xiang)色(se)(se)(se)譜(pu)儀和超高效(xiao)(xiao)液(ye)相(xiang)色(se)(se)(se)譜(pu)儀(超高效(xiao)(xiao)液(ye)相(xiang)色(se)(se)(se)譜(pu)儀)。
1、盡管有名稱,正相(xiang)(xiang)高(gao)(gao)效(xiao)液(ye)相(xiang)(xiang)色譜(pu)(pu)儀并不(bu)是最常用(yong)的(de)高(gao)(gao)效(xiao)液(ye)相(xiang)(xiang)色譜(pu)(pu)儀方法。正相(xiang)(xiang)高(gao)(gao)效(xiao)液(ye)相(xiang)(xiang)色譜(pu)(pu)儀使用(yong)非(fei)極(ji)(ji)性(xing)(xing)溶劑作為流(liu)動相(xiang)(xiang),硅膠(jiao)顆粒作為固定相(xiang)(xiang)。在(zai)(zai)常規高(gao)(gao)效(xiao)液(ye)相(xiang)(xiang)色譜(pu)(pu)儀中,與非(fei)極(ji)(ji)性(xing)(xing)化(hua)合物(wu)相(xiang)(xiang)比,極(ji)(ji)性(xing)(xing)化(hua)合物(wu)在(zai)(zai)固定相(xiang)(xiang)中會(hui)更(geng)(geng)長時間地粘(zhan)附在(zai)(zai)極(ji)(ji)性(xing)(xing)有機硅上。因此(ci),非(fei)極(ji)(ji)性(xing)(xing)化(hua)合物(wu)在(zai)(zai)正常高(gao)(gao)效(xiao)液(ye)相(xiang)(xiang)色譜(pu)(pu)儀中的(de)洗脫速度更(geng)(geng)快(kuai)。孔徑一般(ban)在(zai)(zai)3微米(mi)左右。
2、反(fan)相(xiang)(xiang)(xiang)(xiang)高(gao)效液相(xiang)(xiang)(xiang)(xiang)色(se)譜(pu)儀(yi)是最常(chang)(chang)見的高(gao)效液相(xiang)(xiang)(xiang)(xiang)色(se)譜(pu)儀(yi)類型(xing)。在(zai)反(fan)相(xiang)(xiang)(xiang)(xiang)高(gao)效液相(xiang)(xiang)(xiang)(xiang)色(se)譜(pu)儀(yi)中(zhong),固(gu)定相(xiang)(xiang)(xiang)(xiang)被烴鏈(通常(chang)(chang)長8-18個碳)改(gai)性(xing),導致色(se)譜(pu)柱變為非極(ji)(ji)性(xing)。也(ye)使用極(ji)(ji)性(xing)溶劑(ji)。在(zai)反(fan)相(xiang)(xiang)(xiang)(xiang)高(gao)效液相(xiang)(xiang)(xiang)(xiang)色(se)譜(pu)儀(yi)中(zhong),樣品(pin)中(zhong)的極(ji)(ji)性(xing)分子(zi)會(hui)與溶劑(ji)產生強烈的吸引力,從而使它們更(geng)快地洗(xi)脫。它們也(ye)不會(hui)與非極(ji)(ji)性(xing)固(gu)定相(xiang)(xiang)(xiang)(xiang)相(xiang)(xiang)(xiang)(xiang)互作(zuo)用。非極(ji)(ji)性(xing)化合物會(hui)與固(gu)定相(xiang)(xiang)(xiang)(xiang)產生范德華力和分散(san)相(xiang)(xiang)(xiang)(xiang)互作(zuo)用,因(yin)此它們的洗(xi)脫速度較慢。
3、與高效(xiao)(xiao)液(ye)相色(se)譜(pu)儀(yi)相比,超高效(xiao)(xiao)液(ye)相色(se)譜(pu)儀(yi)運行(xing)速度更(geng)(geng)快(kuai)、使用(yong)的(de)(de)(de)(de)溶劑(ji)更(geng)(geng)少且分(fen)(fen)辨(bian)率更(geng)(geng)高。色(se)譜(pu)柱(zhu)也更(geng)(geng)小,固(gu)定(ding)相顆粒(li)的(de)(de)(de)(de)尺寸要小得多。較(jiao)小的(de)(de)(de)(de)孔(亞2微米(mi))促進了分(fen)(fen)子更(geng)(geng)好(hao)的(de)(de)(de)(de)分(fen)(fen)離和分(fen)(fen)辨(bian)率。較(jiao)短的(de)(de)(de)(de)色(se)譜(pu)柱(zhu)還(huan)可以(yi)進行(xing)快(kuai)速檢測。然而(er),超高效(xiao)(xiao)液(ye)相色(se)譜(pu)儀(yi)不能(neng)用(yong)于干燥或未(wei)過(guo)濾的(de)(de)(de)(de)樣(yang)品,因為較(jiao)小的(de)(de)(de)(de)孔會(hui)堵(du)塞,這是一個昂貴且耗時(shi)的(de)(de)(de)(de)修(xiu)復過(guo)程。