一、掃描電鏡樣品制備流程是什么

化(hua)學(xue)(xue)方法制備(bei)樣品的程序通常是：清洗、化(hua)學(xue)(xue)固定、干燥、噴鍍金屬。

1、清洗：某些生物(wu)(wu)材料表面常附血液(ye)、細胞碎片、消化(hua)道內的(de)食物(wu)(wu)殘渣、細菌、淋巴液(ye)及粘液(ye)等異物(wu)(wu)，掩蓋著(zhu)要(yao)觀察的(de)部位，因而，需要(yao)在固(gu)定之(zhi)前用(yong)生理鹽(yan)水或(huo)等滲(shen)緩沖液(ye)等把附著(zhu)物(wu)(wu)清洗干凈。亦可用(yong)5%碳(tan)酸鈉沖洗或(huo)酶(mei)消化(hua)法去除這些異物(wu)(wu)。

2、固定：通常(chang)采(cai)用醛類（主要是(shi)戊(wu)二(er)醛和多(duo)(duo)聚甲醛）與四(si)氧化(hua)鋨(e)(e)(e)雙固定，也可(ke)用四(si)氧化(hua)鋨(e)(e)(e)單固定。四(si)氧化(hua)鋨(e)(e)(e)固定不僅可(ke)良好(hao)地保存組織細(xi)胞(bao)結(jie)(jie)構，而(er)且能增加材(cai)料的導電(dian)性(xing)和二(er)次電(dian)子(zi)產額(e)，提(ti)高(gao)掃(sao)描電(dian)子(zi)顯(xian)微圖象的質量。這(zhe)(zhe)對(dui)高(gao)分辨掃(sao)描電(dian)子(zi)顯(xian)微術是(shi)極端重要的。為增強這(zhe)(zhe)種(zhong)效(xiao)果，可(ke)用四(si)氧化(hua)鋨(e)(e)(e)-單寧酸或是(shi)四(si)氧化(hua)鋨(e)(e)(e)-珠(zhu)叉二(er)胼等(deng)反(fan)復處理材(cai)料，使其結(jie)(jie)合更(geng)多(duo)(duo)的重金屬鋨(e)(e)(e)，這(zhe)(zhe)就(jiu)是(shi)導電(dian)染色。

3、干燥：固(gu)定后通(tong)常采用(yong)(yong)臨(lin)界點干燥法。其原理是：適當選擇溫(wen)度和(he)壓力，使(shi)(shi)液(ye)體達到臨(lin)界狀態（液(ye)態和(he)氣相間界面(mian)消失），從(cong)而(er)避(bi)免在干燥過(guo)程(cheng)中由水(shui)(shui)(shui)的表面(mian)張力所造成的樣品變形(xing)。對含(han)水(shui)(shui)(shui)生物材(cai)料直(zhi)接進(jin)行(xing)臨(lin)界點干燥時，水(shui)(shui)(shui)的臨(lin)界溫(wen)度和(he)壓力不(bu)能過(guo)高（37.4℃，218帕）。通(tong)常用(yong)(yong)乙醇或(huo)丙酮等使(shi)(shi)材(cai)料脫(tuo)水(shui)(shui)(shui)，再用(yong)(yong)一種中間介質(zhi)，如醋酸戊酯，置換(huan)脫(tuo)水(shui)(shui)(shui)劑(ji)，然后在臨(lin)界點干燥器中用(yong)(yong)液(ye)體或(huo)固(gu)體二氧化碳、氟利(li)昂13以(yi)及一氧化二氮等置換(huan)劑(ji)置換(huan)中間介質(zhi)，進(jin)行(xing)臨(lin)界干燥。

4、噴鍍金屬：將干燥的樣(yang)品(pin)(pin)用導電性好的粘(zhan)合劑或其他粘(zhan)合劑粘(zhan)在金(jin)(jin)屬(shu)(shu)樣(yang)品(pin)(pin)臺(tai)上，然后放在真(zhen)空(kong)蒸發器(qi)中噴鍍(du)一層50～300埃(ai)厚的金(jin)(jin)屬(shu)(shu)膜(mo)，以提高樣(yang)品(pin)(pin)的導電性和二次電子產額，改(gai)善圖象質量(liang)(liang)，并且(qie)防止樣(yang)品(pin)(pin)受熱和輻射損傷。如果采用離子濺射鍍(du)膜(mo)機噴鍍(du)金(jin)(jin)屬(shu)(shu)，可(ke)獲得均勻(yun)的細(xi)顆粒薄金(jin)(jin)屬(shu)(shu)鍍(du)層，提高掃描電子圖象的質量(liang)(liang)。

二、掃描電鏡樣品要求有哪些

前文已經簡單了解了掃描電鏡樣品制備流程，在制作的時候，我們要注意掃描電鏡對于樣品(pin)還有(you)一定的要求：

1、樣品要盡可能干燥，若樣品中含(han)有水份，水分揮發(fa)會(hui)造成倉(cang)內真空度急劇下降，導(dao)致圖(tu)像漂移(yi)，有白色條紋，甚(shen)至會(hui)影響(xiang)燈絲(si)壽(shou)命(ming)。

2、熱穩定性好，熱(re)穩(wen)定性差(cha)的樣(yang)品往往在(zai)電子(zi)束(shu)的轟擊(ji)下分解，釋放氣體和其他物(wu)質，污染電鏡。

3、導電性好，導電(dian)性(xing)差的樣品會(hui)發生荷電(dian)效應(ying)，造成圖像畸變，亮(liang)點亮(liang)線，像散等。

4、不含強磁性，強磁(ci)性的(de)樣(yang)品觀察一般會(hui)出現嚴重的(de)像散，無法消去，磁(ci)性粉末(mo)如果粘的(de)不牢(lao)固還可能(neng)會(hui)吸附到探頭上(shang)，損害電鏡。