一、掃描電鏡樣品制備流程是什么

化(hua)學方法制(zhi)備樣(yang)品(pin)的程序通常是：清洗、化(hua)學固定、干燥、噴鍍金屬。

1、清洗：某(mou)些(xie)生物(wu)材料(liao)表面常(chang)附(fu)血液、細胞碎片、消(xiao)化道內(nei)的食物(wu)殘(can)渣(zha)、細菌、淋巴液及粘液等異(yi)物(wu)，掩蓋著要觀察的部位，因而(er)，需要在固(gu)定之前用生理鹽水或(huo)(huo)等滲緩(huan)沖液等把附(fu)著物(wu)清洗(xi)干凈。亦可用5%碳酸鈉沖洗(xi)或(huo)(huo)酶消(xiao)化法去除這些(xie)異(yi)物(wu)。

2、固定：通常采用(yong)醛(quan)類（主要(yao)(yao)是(shi)(shi)戊二醛(quan)和(he)(he)多(duo)聚甲醛(quan)）與四(si)(si)氧(yang)化鋨(e)雙固(gu)定(ding)，也可(ke)(ke)用(yong)四(si)(si)氧(yang)化鋨(e)單固(gu)定(ding)。四(si)(si)氧(yang)化鋨(e)固(gu)定(ding)不僅可(ke)(ke)良(liang)好(hao)地(di)保存組(zu)織細(xi)胞(bao)結(jie)構，而且能增加材(cai)料(liao)的導(dao)電性和(he)(he)二次電子產額，提高掃描電子顯(xian)微圖象的質量。這(zhe)對(dui)高分辨掃描電子顯(xian)微術是(shi)(shi)極端重(zhong)要(yao)(yao)的。為增強(qiang)這(zhe)種效果，可(ke)(ke)用(yong)四(si)(si)氧(yang)化鋨(e)-單寧酸(suan)或是(shi)(shi)四(si)(si)氧(yang)化鋨(e)-珠(zhu)叉二胼等(deng)反(fan)復處理材(cai)料(liao)，使(shi)其結(jie)合更多(duo)的重(zhong)金屬(shu)鋨(e)，這(zhe)就是(shi)(shi)導(dao)電染(ran)色。

3、干燥：固(gu)定后通(tong)常采用(yong)(yong)臨界(jie)(jie)點干(gan)(gan)燥(zao)法。其原理是(shi)：適(shi)當選擇溫度(du)和(he)壓(ya)力，使液(ye)體達到(dao)臨界(jie)(jie)狀態（液(ye)態和(he)氣相間(jian)界(jie)(jie)面消失），從而避免在(zai)(zai)干(gan)(gan)燥(zao)過(guo)程中由水的表面張力所造成(cheng)的樣品變(bian)形。對含水生物材(cai)料直接(jie)進行(xing)臨界(jie)(jie)點干(gan)(gan)燥(zao)時，水的臨界(jie)(jie)溫度(du)和(he)壓(ya)力不(bu)能(neng)過(guo)高(gao)（37.4℃，218帕）。通(tong)常用(yong)(yong)乙醇(chun)或丙酮(tong)等使材(cai)料脫(tuo)水，再用(yong)(yong)一種中間(jian)介質，如醋酸戊酯(zhi)，置換(huan)(huan)脫(tuo)水劑，然后在(zai)(zai)臨界(jie)(jie)點干(gan)(gan)燥(zao)器(qi)中用(yong)(yong)液(ye)體或固(gu)體二氧(yang)化碳、氟利(li)昂13以及一氧(yang)化二氮等置換(huan)(huan)劑置換(huan)(huan)中間(jian)介質，進行(xing)臨界(jie)(jie)干(gan)(gan)燥(zao)。

4、噴鍍金屬：將干燥的(de)樣(yang)品用(yong)導(dao)電性好的(de)粘合劑或其他粘合劑粘在金(jin)屬(shu)樣(yang)品臺上，然后放在真空(kong)蒸發(fa)器中噴(pen)鍍(du)一(yi)層(ceng)50～300埃厚(hou)的(de)金(jin)屬(shu)膜，以(yi)提高(gao)樣(yang)品的(de)導(dao)電性和二次電子(zi)產額，改善圖象(xiang)質量，并且防止樣(yang)品受熱和輻射損傷。如果采用(yong)離子(zi)濺射鍍(du)膜機噴(pen)鍍(du)金(jin)屬(shu)，可獲得均勻的(de)細顆粒薄金(jin)屬(shu)鍍(du)層(ceng)，提高(gao)掃描電子(zi)圖象(xiang)的(de)質量。

二、掃描電鏡樣品要求有哪些

前文已經簡單了解了掃描電鏡樣品制備流程，在制作的時候，我們要注意掃描電鏡對于樣品還有一定(ding)的要求：

1、樣品要盡可能干燥，若樣(yang)品中含(han)有水(shui)份，水(shui)分揮發會(hui)造(zao)成倉內真空度(du)急劇下降，導致圖像(xiang)漂移(yi)，有白色條紋，甚至會(hui)影(ying)響燈(deng)絲壽命。

2、熱穩定性好，熱穩定性(xing)差的(de)樣(yang)品(pin)往往在電(dian)子束(shu)的(de)轟擊(ji)下分解，釋放氣體(ti)和(he)其他物(wu)質，污染電(dian)鏡(jing)。

3、導電性好，導電(dian)性差的樣品會發生(sheng)荷電(dian)效應(ying)，造成圖像畸(ji)變(bian)，亮點亮線(xian)，像散等。

4、不含強磁性，強磁(ci)(ci)性(xing)的(de)樣品觀察一般會出現嚴重的(de)像散，無法消去，磁(ci)(ci)性(xing)粉末如(ru)果粘的(de)不牢固還(huan)可能會吸附到探頭上，損害電鏡。