一、液相色譜儀有氣泡怎么解決

液相色譜儀作為一種高精密儀器，在使用過程中會遇見很多問題，比如出現了氣泡，那么液相色譜儀有氣泡怎么解決呢？

觀察氣(qi)泡所在的位置！

1、如果是泵前，那么擰開排氣閥，清(qing)除掉就可以了。

2、如果走到儀器管路里面，卸下色譜(pu)柱，用異丙醇(chun)低(di)流(liu)速沖洗過夜。

3、如果走(zou)(zou)到(dao)柱子里面(mian)比較麻煩，反(fan)相柱子走(zou)(zou)純甲(jia)醇，進口處放低，出(chu)口處抬(tai)，讓氣(qi)泡出(chu)來(lai)，也是(shi)低流速過夜，出(chu)口好(hao)別(bie)接檢(jian)測器，用一根(gen)peek管接到(dao)廢(fei)液瓶里面(mian)就可以了。

二、液相色譜儀常見故障解決方法

1、故障1：壓力波動大，流量不穩定

（1）原因分析：

系(xi)統(tong)中有(you)(you)空(kong)氣或(huo)者單向閥的寶石球和閥座(zuo)之間夾有(you)(you)異(yi)物，使兩者不能密封。

（2）解決方法：

工作中注意(yi)觀察(cha)流動(dong)相(xiang)(xiang)的量，保證不(bu)銹鋼(gang)濾器沉入(ru)儲液器瓶(ping)底，避免吸入(ru)空氣(qi)，流動(dong)相(xiang)(xiang)要充分脫氣(qi)。若單向閥和閥座之間夾有異物，拆下單向閥，放入(ru)盛有丙酮的燒杯(bei)中用超聲波清洗。

2、故障2：自檢時，出現“燈能量低”的錯誤

（1）原因分析：

一般來說是由于系統中(zhong)有擋光(guang)物，光(guang)路(lu)偏(pian)離，氘燈電源系統或氘燈燈泡已壞。

（2）解決方法：

首(shou)先(xian)要檢查光度室(shi)是(shi)(shi)(shi)否有(you)擋光物；打開(kai)檢測器光源室(shi)蓋，檢查氘燈(deng)(deng)(deng)是(shi)(shi)(shi)否點亮，如(ru)果氘燈(deng)(deng)(deng)不(bu)亮，則(ze)關機(ji)，更(geng)換新氘燈(deng)(deng)(deng)，換氘燈(deng)(deng)(deng)時，需注意型號；檢查氘燈(deng)(deng)(deng)保(bao)險(xian)絲，看是(shi)(shi)(shi)否松動、氧化、燒斷，如(ru)果氘燈(deng)(deng)(deng)保(bao)險(xian)絲出現故障，應立即更(geng)換；再(zai)開(kai)機(ji)重新自檢，若仍出現上述(shu)故障，則(ze)重新安裝(zhuang)軟件后再(zai)進行自檢。

3、故障3：出峰不準，峰分叉

（1）原因分析：

造成這(zhe)種(zhong)情況的原因一(yi)般(ban)是色譜柱被污染，或柱頭填料塌陷(xian)。

（2）解決方法：

對(dui)于第1種情況，先用純水(shui)反向沖(chong)(chong)(chong)洗(xi)(xi)柱(zhu)子，然(ran)后換成甲(jia)(jia)醇(chun)沖(chong)(chong)(chong)洗(xi)(xi),接著用甲(jia)(jia)醇(chun)+異丙醇(chun)（4+6）沖(chong)(chong)(chong)洗(xi)(xi)柱(zhu)子（沖(chong)(chong)(chong)洗(xi)(xi)時(shi)間的長短由樣(yang)品(pin)污染的情況而定(ding)），再換成甲(jia)(jia)醇(chun)沖(chong)(chong)(chong)洗(xi)(xi)，然(ran)后，再用純水(shui)沖(chong)(chong)(chong)洗(xi)(xi)，最后甲(jia)(jia)醇(chun)沖(chong)(chong)(chong)洗(xi)(xi)正向沖(chong)(chong)(chong)洗(xi)(xi)柱(zhu)子30min以上。

對于(yu)第(di)2種情(qing)況，擰(ning)開柱(zhu)頭，檢查柱(zhu)填(tian)(tian)(tian)料(liao)(liao)是否硬結(jie)或塌陷，去除硬結(jie)部分（污(wu)染的填(tian)(tian)(tian)料(liao)(liao)），裝(zhuang)入新填(tian)(tian)(tian)料(liao)(liao)，滴(di)一(yi)滴(di)甲(jia)醇(chun)，填(tian)(tian)(tian)料(liao)(liao)下(xia)陷，再(zai)填(tian)(tian)(tian)平(ping)(ping)(ping)，用(yong)與內徑相同的頂端平(ping)(ping)(ping)滑的不銹鋼(gang)桿(gan)壓(ya)緊，再(zai)填(tian)(tian)(tian)平(ping)(ping)(ping)，滴(di)甲(jia)醇(chun)，再(zai)壓(ya)緊反復幾次(ci)，直至裝(zhuang)滿填(tian)(tian)(tian)平(ping)(ping)(ping)。柱(zhu)頭用(yong)甲(jia)醇(chun)沖洗(xi)干凈，擦凈柱(zhu)外壁(bi)的填(tian)(tian)(tian)料(liao)(liao)，擰(ning)緊柱(zhu)頭，用(yong)純(chun)甲(jia)醇(chun)沖洗(xi)30min以(yi)上。

4、故障4：柱壓升高

（1）原因分析：

造成柱壓(ya)升高的(de)原因(yin)一(yi)般是由(you)于緩沖(chong)液鹽份如乙酸(suan)銨(an)等，沉(chen)積柱內(nei)，或樣品污染(ran)沉(chen)積，造成流體阻(zu)力加大所致(zhi)。

（2）解決方法：

對于第1種情況(kuang)先用40～50℃的純(chun)水，低速正向(xiang)沖洗柱子，待柱壓逐(zhu)漸下降后(hou)(hou)，相應的提高(gao)流(liu)速沖洗，柱壓大幅(fu)度下降后(hou)(hou)，用常(chang)溫純(chun)水沖洗，之后(hou)(hou)用純(chun)甲(jia)醇沖洗柱子30min。

對于第2種(zhong)情況，由(you)樣(yang)品(pin)的沉積(ji)引起(qi)污染(ran)的C18柱(zhu)，和純(chun)水(shui)反向沖(chong)洗(xi)(xi)(xi)柱(zhu)子，然后(hou)換成甲(jia)醇(chun)(chun)沖(chong)洗(xi)(xi)(xi)，接(jie)著用(yong)(yong)甲(jia)醇(chun)(chun)+異丙醇(chun)(chun)（4+6）沖(chong)洗(xi)(xi)(xi)柱(zhu)子（沖(chong)洗(xi)(xi)(xi)時間的長短由(you)樣(yang)品(pin)污染(ran)的情況而定(ding)），再換成甲(jia)醇(chun)(chun)沖(chong)洗(xi)(xi)(xi)，然后(hou)用(yong)(yong)純(chun)水(shui)沖(chong)洗(xi)(xi)(xi)，最后(hou)用(yong)(yong)甲(jia)醇(chun)(chun)正向沖(chong)洗(xi)(xi)(xi)柱(zhu)子30min以上(shang)。

5、故障5：峰面積重復性不佳

（1）原因分析：

主要(yao)原因有進樣(yang)閥漏液；加樣(yang)針不(bu)到位或液量不(bu)足。

（2）解決方法：

對于(yu)第1種情(qing)況更(geng)換進樣墊(dian)圈；對于(yu)第2種情(qing)況保證(zheng)(zheng)加樣針(zhen)插(cha)到底，注射樣品溶液后須快速(su)、平(ping)穩地從LOAD狀(zhuang)態轉換到INJECT狀(zhuang)態，以保證(zheng)(zheng)進樣量的準確。

6、故障6：流動相內有氣泡

（1）原因分析：

流(liu)動相內(nei)不斷(duan)有氣(qi)(qi)(qi)泡溢出(chu)(chu)，關(guan)閉泵，打開(kai)排空(kong)閥(fa)，按PURGE鍵清洗脫(tuo)氣(qi)(qi)(qi)，氣(qi)(qi)(qi)泡不斷(duan)的(de)從過(guo)濾器(qi)冒(mao)出(chu)(chu)，進入流(liu)動相，無論打開(kai)PURGE鍵幾次，都無法清除(chu)不斷(duan)產生(sheng)的(de)氣(qi)(qi)(qi)泡。主(zhu)要(yao)是(shi)因為過(guo)濾器(qi)長期沉浸于(yu)乙酸銨等(deng)緩沖液內(nei)，過(guo)濾器(qi)內(nei)部由于(yu)霉菌的(de)生(sheng)長繁殖，形成菌團，阻塞了過(guo)濾器(qi)，緩沖液難以流(liu)暢(chang)地通過(guo)過(guo)濾器(qi)，空(kong)氣(qi)(qi)(qi)在(zai)泵的(de)壓力作用下經過(guo)濾器(qi)進入流(liu)動相。

（2）解決方法：

過(guo)濾(lv)(lv)器(qi)(qi)浸(jin)泡(pao)于5%硝(xiao)(xiao)酸(suan)(suan)(suan)溶液(ye)中(zhong)(zhong)，超聲清洗15min即(ji)(ji)(ji)可(ke)；亦可(ke)將(jiang)過(guo)濾(lv)(lv)器(qi)(qi)浸(jin)泡(pao)于5%硝(xiao)(xiao)酸(suan)(suan)(suan)溶液(ye)中(zhong)(zhong)12～36h，輕輕震蕩幾(ji)次，再(zai)將(jiang)過(guo)濾(lv)(lv)器(qi)(qi)用純(chun)水清洗幾(ji)次，打開泄(xie)壓閥，打開PURGE鍵清洗脫(tuo)氣，如(ru)仍有氣泡(pao)不斷(duan)從過(guo)濾(lv)(lv)器(qi)(qi)冒出，繼續將(jiang)過(guo)濾(lv)(lv)器(qi)(qi)浸(jin)泡(pao)于5%硝(xiao)(xiao)酸(suan)(suan)(suan)溶液(ye)中(zhong)(zhong)，如(ru)沒(mei)有氣泡(pao)從過(guo)濾(lv)(lv)器(qi)(qi)中(zhong)(zhong)冒出，說明過(guo)濾(lv)(lv)器(qi)(qi)內部的霉菌(jun)菌(jun)團已(yi)被(bei)硝(xiao)(xiao)酸(suan)(suan)(suan)破壞，流動相可(ke)以(yi)流暢(chang)地通(tong)過(guo)過(guo)濾(lv)(lv)器(qi)(qi)。打開泄(xie)壓閥，打開泵，流速調至1.0～3.0mL/min，純(chun)水沖洗過(guo)濾(lv)(lv)器(qi)(qi)1h左(zuo)右。即(ji)(ji)(ji)可(ke)將(jiang)過(guo)濾(lv)(lv)器(qi)(qi)清洗干凈。關閉泄(xie)壓閥，純(chun)甲醇沖洗0.5h即(ji)(ji)(ji)可(ke)。

7、故障7：基線漂移

（1）原因分析：

一般(ban)說來，機器剛起動時(shi)，基線(xian)容易(yi)漂(piao)移，大(da)概要半個(ge)小時(shi)的(de)平衡時(shi)間，如果你用了緩沖溶(rong)(rong)液或(huo)緩沖鹽，或(huo)在低波(bo)長下(xia)（220nm）平衡時(shi)間相(xiang)對會(hui)比較長，但如果在實驗過程(cheng)中(zhong)發現(xian)基線(xian)漂(piao)移，則(ze)你要考慮(lv)下(xia)面(mian)的(de)原因：①柱溫波(bo)動；②流通池(chi)被污染(ran)或(huo)有氣(qi)體；③紫(zi)外燈能量不足；④流動相(xiang)污染(ran)、變質(zhi)或(huo)由低品(pin)(pin)質(zhi)溶(rong)(rong)劑配成(cheng)；⑤樣品(pin)(pin)中(zhong)有強保留的(de)物質(zhi)以(yi)饅(man)頭峰樣被洗(xi)脫出，從而表現(xian)出一個(ge)逐(zhu)步升高的(de)基線(xian)；⑥檢測器沒有設定(ding)在最大(da)吸收波(bo)長處(chu)；⑦流動相(xiang)的(de)pH值(zhi)沒有調節好(hao)。

（2）解決方法：

①控(kong)制好(hao)柱子和(he)流(liu)動(dong)相的(de)溫度，檢查是否有(you)打開的(de)窗戶或空(kong)調對著柱溫箱(xiang)；②用(yong)甲醇或其他強(qiang)極性溶劑(ji)沖洗流(liu)通池（最(zui)好(hao)斷開柱子）。如有(you)需要(yao)，可以用(yong)1N的(de)硝酸（不要(yao)用(yong)鹽酸）；③更(geng)換新的(de)紫外燈(deng)；④檢查流(liu)動(dong)相的(de)組成，使用(yong)高品質的(de)化學(xue)試劑(ji)及HPLC級的(de)溶劑(ji)；⑤使用(yong)保護柱，如有(you)必(bi)要(yao)，在(zai)分析過程中，定期(qi)用(yong)強(qiang)溶劑(ji)沖洗柱子；⑥將波(bo)長調整至最(zui)大吸收波(bo)長處；⑦加適量的(de)酸或堿(jian)調至最(zui)佳(jia)pH值。

8、故障8：保留時間漂移

（1）原因分析：

保(bao)(bao)留(liu)時(shi)(shi)間重現(xian)是液相性能好壞的(de)一(yi)個重要標(biao)志，同一(yi)種樣品，兩次(ci)的(de)保(bao)(bao)留(liu)時(shi)(shi)間相差(cha)不要超過15s，超過了30s可看做保(bao)(bao)留(liu)時(shi)(shi)間漂(piao)移，就無法進(jin)行定性，須要考慮(lv)以下原因：①溫控不當；②流(liu)動相比例變化；③色(se)譜柱沒有平衡；④流(liu)速(su)變化；⑤泵(beng)中有氣泡。

（2）解決方法：

①調(diao)好柱(zhu)溫，檢查(cha)是(shi)否(fou)有(you)打開(kai)的(de)窗戶或空調(diao)對著柱(zhu)溫箱；②檢查(cha)泵(beng)的(de)比例閥是(shi)否(fou)有(you)故障；③在每一(yi)次(ci)運(yun)行(xing)之前給予足(zu)夠的(de)時間平衡色譜柱(zhu)；④重(zhong)新設定流速；⑤從泵(beng)中除(chu)去氣(qi)泡(pao)。

9、故障9：靈敏度不夠

（1）原因分析：

造成這種情(qing)況主要有(you)以下原因(yin)：①樣品(pin)量不(bu)足；②樣品(pin)未從柱子中流出；③樣品(pin)與(yu)檢(jian)測(ce)器(qi)(qi)(qi)不(bu)匹配(pei)；④檢(jian)測(ce)器(qi)(qi)(qi)衰減太(tai)多(duo)；⑤檢(jian)測(ce)器(qi)(qi)(qi)時間常(chang)數太(tai)大；⑥檢(jian)測(ce)器(qi)(qi)(qi)池窗污染(ran)；⑦檢(jian)測(ce)池中有(you)氣泡(pao)；⑧記錄(lu)儀測(ce)壓范圍(wei)不(bu)當；⑨流動相流量不(bu)合適；⑩檢(jian)測(ce)器(qi)(qi)(qi)與(yu)記錄(lu)儀超出校(xiao)準曲線(xian)。

（2）解決方法：

①增加樣品量；②可根據(ju)(ju)樣品的化(hua)學(xue)性(xing)質(zhi)改變流(liu)動相或柱子；③根據(ju)(ju)樣品化(hua)學(xue)性(xing)質(zhi)調(diao)(diao)整(zheng)波長或該換檢(jian)測(ce)器；④調(diao)(diao)整(zheng)檢(jian)測(ce)器衰減；⑤降(jiang)低時(shi)間參數；⑥清洗(xi)檢(jian)測(ce)器池窗；⑦排出檢(jian)測(ce)池中的氣泡；⑧調(diao)(diao)整(zheng)電壓范圍；⑨調(diao)(diao)整(zheng)流(liu)動相流(liu)量；⑩檢(jian)查(cha)記錄儀與檢(jian)測(ce)器，重作校準曲線。

10、故障10：基線噪音

（1）原因分析：

規則的基線(xian)噪(zao)音產(chan)生的原(yuan)因主要有(you)①在流(liu)動相、檢測器或泵中有(you)空氣（尖銳(rui)峰）；②漏液(ye)；③流(liu)動相混合(he)不完全；④溫度影響（柱溫過高，檢測器為加(jia)熱(re)）；⑤在同一(yi)條線(xian)上有(you)其它電(dian)子設備（偶然(ran)噪(zao)聲(sheng)）；⑥泵振動。

不(bu)規(gui)則的基線噪音(yin)產生的原(yuan)因(yin)主要(yao)有①漏液；②流(liu)動相(xiang)(xiang)污(wu)染、變質或(huo)由低質溶(rong)(rong)劑配(pei)成；③流(liu)動相(xiang)(xiang)個溶(rong)(rong)劑不(bu)相(xiang)(xiang)溶(rong)(rong)；④檢(jian)測器(qi)(qi)或(huo)記錄儀電子元件故障(zhang)；⑤系統內有氣(qi)泡；⑥檢(jian)測器(qi)(qi)內有氣(qi)泡；⑦流(liu)通池污(wu)染（即使是極(ji)少的污(wu)染物(wu)也(ye)會產生噪音(yin)）；⑧檢(jian)測器(qi)(qi)燈能(neng)量(liang)不(bu)足；⑨色(se)譜柱填料流(liu)失或(huo)阻塞；⑩流(liu)動相(xiang)(xiang)混合不(bu)均勻或(huo)混合器(qi)(qi)不(bu)能(neng)正常工作。

（2）解決方法：

規(gui)則的(de)基線噪音解決方(fang)法：①流動相(xiang)脫氣，沖(chong)洗系統以除去檢測器(qi)或泵(beng)中(zhong)的(de)空氣；②檢查管路接頭(tou)是否松動，泵(beng)是否漏液，是否有鹽析出和不正(zheng)常的(de)噪音，如有必要更換(huan)泵(beng)密(mi)封；③用手搖(yao)動使混合均勻或使用粘(zhan)度(du)低的(de)溶劑(ji)；④減小溫度(du)差(cha)異，或增加熱(re)交換(huan)器(qi)；⑤斷開LC、檢測器(qi)和記錄儀(yi)，檢查干擾是否來自(zi)于外部(bu)，并加以更正(zheng)，采用精密(mi)級穩壓電源；⑥在系統中(zhong)加入脈沖(chong)阻(zu)尼(ni)器(qi)。

不規則的(de)基線噪音解(jie)決(jue)方(fang)法：①檢(jian)查接頭是否松動(dong)，泵是否漏(lou)液，是否有鹽析出和(he)不正常的(de)噪音。如有必(bi)要更換(huan)(huan)密封，檢(jian)查流(liu)通(tong)池是否漏(lou)液；②檢(jian)查流(liu)動(dong)相(xiang)的(de)組成；③選擇(ze)互溶的(de)流(liu)動(dong)相(xiang)；④斷開檢(jian)測器(qi)和(he)記(ji)錄儀的(de)電源，檢(jian)查并(bing)更正；⑤用(yong)(yong)強(qiang)極(ji)性溶液清洗(xi)系(xi)統；⑥清洗(xi)檢(jian)測器(qi)，在檢(jian)測器(qi)后(hou)面安裝(zhuang)背(bei)景(jing)壓力(li)調節器(qi)；⑦用(yong)(yong)1N的(de)硝酸（不能用(yong)(yong)磷(lin)酸）清洗(xi)流(liu)通(tong)池；⑧更換(huan)(huan)檢(jian)測器(qi)燈；⑨更換(huan)(huan)色譜柱(zhu)；⑩維修或更換(huan)(huan)混(hun)(hun)合器(qi)，在流(liu)動(dong)相(xiang)不走梯度時(shi)，建議(yi)不使用(yong)(yong)泵的(de)混(hun)(hun)合裝(zhuang)置。