一、培養基的種類有哪些
培養基(ji)是指(zhi)供給微生物、植物或動物(或組(zu)(zu)織)生長繁殖(zhi)的,由不同營(ying)養物質(zhi)組(zu)(zu)合配制而(er)成的營(ying)養基(ji)質(zhi),它的種類(lei)(lei)眾(zhong)多,按照不同的分(fen)(fen)(fen)類(lei)(lei)方法(fa)可分(fen)(fen)(fen)為不同類(lei)(lei)型,一般主要(yao)有化學(xue)分(fen)(fen)(fen)類(lei)(lei)、物理分(fen)(fen)(fen)類(lei)(lei)和用途分(fen)(fen)(fen)類(lei)(lei)三種分(fen)(fen)(fen)類(lei)(lei)方法(fa):
1、化學分類
(1)天然培養基:天(tian)然(ran)培(pei)(pei)養(yang)基(ji)(ji)是指一類利用(yong)動物(wu)、植(zhi)物(wu)或微生(sheng)物(wu)體包(bao)括其提取物(wu)制成(cheng)的培(pei)(pei)養(yang)基(ji)(ji)。例(li)如。牛(niu)肉膏(gao)蛋白胨(dong)培(pei)(pei)養(yang)基(ji)(ji)、麥(mai)芽汁(zhi)培(pei)(pei)養(yang)基(ji)(ji)和LB培(pei)(pei)養(yang)基(ji)(ji)等(deng)。常用(yong)的天(tian)然(ran)有(you)機(ji)營養(yang)物(wu)質包(bao)括豆芽汁(zhi)、玉米(mi)粉、土壤浸液、麩皮、牛(niu)奶、血清、椰子汁(zhi)等(deng)。天(tian)然(ran)培(pei)(pei)養(yang)基(ji)(ji)成(cheng)本較低,除在實驗室經常使用(yong)外,也適于用(yong)來進行工業上大(da)規模的微生(sheng)物(wu)發(fa)酵生(sheng)產(chan)。
(2)組合(he)培(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)基(ji)(ji):合(he)成(cheng)(cheng)培(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)基(ji)(ji)是(shi)根據天然培(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)基(ji)(ji)的成(cheng)(cheng)分,用化(hua)學物(wu)質模擬合(he)成(cheng)(cheng)、人工設(she)計而配(pei)制的培(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)基(ji)(ji)。例如,高氏1號培(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)基(ji)(ji)和查(cha)氏培(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)基(ji)(ji)等(deng)(deng)。合(he)成(cheng)(cheng)培(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)基(ji)(ji)有一定(ding)(ding)的配(pei)方(fang),配(pei)制合(he)成(cheng)(cheng)培(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)基(ji)(ji)時(shi)重(zhong)復性強,但與天然培(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)基(ji)(ji)相比其成(cheng)(cheng)本較(jiao)高,微(wei)生(sheng)物(wu)在其中生(sheng)長(chang)速度較(jiao)慢,一般適(shi)于在實驗(yan)室用來進行有關微(wei)生(sheng)物(wu)營養(yang)(yang)(yang)需(xu)求、代謝(xie)、分類鑒(jian)定(ding)(ding)、生(sheng)物(wu)量測(ce)定(ding)(ding)、菌種選育及遺傳分析等(deng)(deng)方(fang)面(mian)的研究工作(zuo)。
(3)半組合培養(yang)基:指一類主要以化學試劑配制,同時還(huan)加(jia)有某種或(huo)某些天然成(cheng)分的培養(yang)基。例如,馬鈴薯蔗糖培養(yang)基。
2、物理分類
(1)液體培養(yang)基(ji):80%~90%是水(shui),其中(zhong)配有可溶(rong)(rong)性的(de)或不溶(rong)(rong)性的(de)營養(yang)成分的(de)培養(yang)基(ji)。
(2)固體培(pei)(pei)養基:一類配制成的固體狀態的基質。根據性(xing)質又分為固化培(pei)(pei)養基、非可逆性(xing)固化培(pei)(pei)養基、天然(ran)固態培(pei)(pei)養基、濾膜。
(3)半(ban)固體(ti)培(pei)養(yang)基:指在液(ye)體(ti)培(pei)養(yang)基中(zhong)加(jia)入少量(liang)的凝(ning)固劑而配制成的半(ban)固體(ti)狀態(tai)的培(pei)養(yang)基。
(4)脫(tuo)水(shui)(shui)培(pei)養基:又稱預制干燥(zao)培(pei)養基,指含有除水(shui)(shui)分外的一切成分的商品培(pei)養基。
3、用途分類
(1)基(ji)(ji)(ji)(ji)礎(chu)(chu)培(pei)(pei)養(yang)基(ji)(ji)(ji)(ji):大多數微(wei)生物(wu)(wu)共同(tong)需要的(de)營(ying)養(yang)基(ji)(ji)(ji)(ji)礎(chu)(chu)。某(mou)(mou)--微(wei)生物(wu)(wu)如有特殊(shu)需要,可(ke)在此基(ji)(ji)(ji)(ji)礎(chu)(chu)上添加某(mou)(mou)種成(cheng)(cheng)分即可(ke),如蛋(dan)(dan)(dan)白胨(dong)水(shui)(shui)、肉(rou)湯培(pei)(pei)養(yang)基(ji)(ji)(ji)(ji)、營(ying)養(yang)瓊脂等。1%蛋(dan)(dan)(dan)白胨(dong)水(shui)(shui)培(pei)(pei)養(yang)基(ji)(ji)(ji)(ji)便(bian)是一個(ge)最簡單的(de)基(ji)(ji)(ji)(ji)礎(chu)(chu)培(pei)(pei)養(yang)基(ji)(ji)(ji)(ji),該基(ji)(ji)(ji)(ji)礎(chu)(chu)培(pei)(pei)養(yang)基(ji)(ji)(ji)(ji)本(ben)身可(ke)供一般細菌增(zeng)(zeng)菌培(pei)(pei)養(yang)和(he)靛基(ji)(ji)(ji)(ji)質試驗用(yong),若再加入指示劑(ji)和(he)糖類,則(ze)配成(cheng)(cheng)糖發酵培(pei)(pei)養(yang)基(ji)(ji)(ji)(ji),供糖發酵試驗用(yong),成(cheng)(cheng)為鑒別培(pei)(pei)養(yang)基(ji)(ji)(ji)(ji);若在1%蛋(dan)(dan)(dan)白胨(dong)水(shui)(shui)中增(zeng)(zeng)加氯化鈉(na)用(yong)量并將pH提高到8.6左右,則(ze)變成(cheng)(cheng)堿性(xing)蛋(dan)(dan)(dan)白胨(dong)水(shui)(shui),用(yong)于(yu)霍(huo)亂弧菌的(de)增(zeng)(zeng)菌培(pei)(pei)養(yang),成(cheng)(cheng)為專(zhuan)用(yong)增(zeng)(zeng)菌培(pei)(pei)養(yang)基(ji)(ji)(ji)(ji)。
(2)營養(yang)(yang)培(pei)養(yang)(yang)基(ji)(ji)(ji)(ji):在基(ji)(ji)(ji)(ji)礎培(pei)養(yang)(yang)基(ji)(ji)(ji)(ji)中添加(jia)(jia)一(yi)些特(te)殊(shu)的(de)營養(yang)(yang)物質,如葡萄(tao)糖(tang)、血液、血清、酵(jiao)母浸膏、生(sheng)長(chang)因(yin)子等(deng),可供營養(yang)(yang)要求較(jiao)高的(de)細(xi)菌(jun)在其中生(sheng)長(chang)。例如鏈球菌(jun)、肺炎鏈球菌(jun)等(deng)需在含血液或血清的(de)培(pei)養(yang)(yang)基(ji)(ji)(ji)(ji)中生(sheng)長(chang);結(jie)核(he)分枝桿菌(jun)的(de)培(pei)養(yang)(yang)基(ji)(ji)(ji)(ji)中須添加(jia)(jia)雞(ji)蛋、馬鈴薯、甘油等(deng)。最常用的(de)營養(yang)(yang)培(pei)養(yang)(yang)基(ji)(ji)(ji)(ji)是血瓊脂平(ping)板(ban)。
(3)增(zeng)(zeng)菌培(pei)養(yang)基(ji):一(yi)般為液體培(pei)養(yang)基(ji),用(yong)(yong)于細(xi)菌的(de)增(zeng)(zeng)菌培(pei)養(yang),可泛用(yong)(yong),也可專用(yong)(yong),在(zai)專用(yong)(yong)增(zeng)(zeng)菌培(pei)養(yang)基(ji)中常含有目的(de)菌生(sheng)長所需要的(de)特殊營養(yang)物質(zhi)或生(sheng)長因子。
(4)選擇性(xing)培養基:一類(lei)根據某微生物(wu)的(de)特(te)殊營養要求(qiu)或其對某化學、物(wu)理因素的(de)抗性(xing)而設計的(de)培養基,具有使混合(he)菌樣中(zhong)的(de)劣勢(shi)菌變成優勢(shi)菌的(de)功能(neng),廣泛(fan)用(yong)于菌種篩選等(deng)領域。
(5)鑒別(bie)培(pei)養(yang)基:一類在(zai)成分中加有能與目的菌(jun)的無色(se)代謝產物發生顯色(se)反(fan)應的指示劑,從而(er)達(da)到只須(xu)用(yong)肉眼辨別(bie)顏色(se)就能方便的從近似菌(jun)落中找出目的菌(jun)菌(jun)落的培(pei)養(yang)基。例如,伊(yi)紅美藍(lan)乳(ru)糖培(pei)養(yang)基(EMB)。
(6)厭(yan)(yan)氧(yang)菌(jun)(jun)(jun)(jun)(jun)培(pei)養(yang)基(ji):供厭(yan)(yan)氧(yang)菌(jun)(jun)(jun)(jun)(jun)的分離(li)、培(pei)養(yang)和鑒別用(yong)的培(pei)養(yang)基(ji),稱(cheng)為厭(yan)(yan)氧(yang)菌(jun)(jun)(jun)(jun)(jun)培(pei)養(yang)基(ji)。由于厭(yan)(yan)氧(yang)菌(jun)(jun)(jun)(jun)(jun)自身缺乏有(you)氧(yang)代謝所(suo)(suo)必需(xu)的各種酶(mei),如(ru)細(xi)(xi)胞色素和細(xi)(xi)胞色素氧(yang)化(hua)酶(mei)、過氧(yang)化(hua)氫酶(mei)和過氧(yang)化(hua)物酶(mei)、超氧(yang)化(hua)歧化(hua)酶(mei),所(suo)(suo)以造成(cheng)(cheng)自身代謝的缺陷,無(wu)法(fa)進行有(you)氧(yang)代謝,而無(wu)氧(yang)酵(jiao)解所(suo)(suo)產(chan)生的能量又不(bu)足,因此厭(yan)(yan)氧(yang)菌(jun)(jun)(jun)(jun)(jun)在正(zheng)常的大氣環(huan)境下不(bu)能生長(chang)(chang)和生存(cun)。為使厭(yan)(yan)氧(yang)菌(jun)(jun)(jun)(jun)(jun)能正(zheng)常生長(chang)(chang),必須(xu)制備營養(yang)成(cheng)(cheng)分豐富(fu),氧(yang)化(hua)還原電勢較低,具有(you)特殊生長(chang)(chang)因子的專用(yong)培(pei)養(yang)基(ji)。
(7)細(xi)(xi)胞培養基:是指用于(yu)(yu)各(ge)種目的的體(ti)外培養、保(bao)存、運輸活組織、器官及細(xi)(xi)胞的液體(ti),實質為人(ren)工模(mo)擬(ni)體(ti)內生(sheng)(sheng)長的營養環(huan)境,使(shi)細(xi)(xi)胞在此環(huan)境中有生(sheng)(sheng)長和繁殖的能(neng)力(li)。由于(yu)(yu)其成分數量明確并可通(tong)過調節某一種成分來觀察被研究對象的各(ge)種生(sheng)(sheng)物(wu)學改變,被廣泛應用于(yu)(yu)細(xi)(xi)胞生(sheng)(sheng)物(wu)學科的研究。
二、如何選擇合適種類的培養基
對(dui)于微生物的培養(yang),選擇(ze)合適的培養(yang)基(ji)是很(hen)重(zhong)要(yao)的,現在對(dui)培養(yang)基(ji)的選擇(ze)還沒(mei)有一個統一的標準,不過有幾點建議可供參(can)考(kao):
1、建立(li)某種微(wei)生物所用的(de)培養(yang)基(ji)(ji)應(ying)該是培養(yang)這種微(wei)生物首選的(de)培養(yang)基(ji)(ji)。可(ke)以(yi)查(cha)閱(yue)參考(kao)文(wen)獻(xian),或(huo)在購買(mai)微(wei)生物時咨詢。
2、其他實驗室慣用的培養基不妨(fang)一(yi)試,許多(duo)培養基可以適(shi)合多(duo)種微生物。
3、根據微生物的特點、實驗的需要來選擇培(pei)養基。如小鼠細胞株多選RPMI1640培(pei)養基。
4、用多種(zhong)培(pei)養基培(pei)養目的(de)微生(sheng)(sheng)物,觀察其生(sheng)(sheng)長狀態,可(ke)以用生(sheng)(sheng)長曲線、集落(luo)形成率等指標(biao)判(pan)斷,根據實驗結(jie)果(guo)選擇最佳(jia)培(pei)養基,這是最客(ke)觀的(de)方法,但比較繁瑣。