一、培養基配好后為什么必須立即滅菌

培養(yang)基配(pei)好后(hou)，必須要馬(ma)上進行滅菌處理(li)，這(zhe)是為(wei)什么呢(ni)？

之(zhi)所以(yi)培養(yang)基(ji)配(pei)好就要滅菌，是(shi)(shi)因為未滅菌的剛剛配(pei)置好的培養(yang)基(ji)是(shi)(shi)暴露在環境(jing)中的，可能(neng)(neng)染上(shang)環境(jing)中的大量細菌，而培養(yang)基(ji)也是(shi)(shi)這些(xie)細菌生(sheng)長所需要的良(liang)好條件；如(ru)果不(bu)及時滅菌，會導致在環境(jing)中染上(shang)的細菌大量繁殖，消耗(hao)培養(yang)基(ji)中的營(ying)養(yang)成分，甚至(zhi)產(chan)生(sheng)有(you)害物質(zhi)，造成培養(yang)基(ji)滅菌后(hou)也不(bu)能(neng)(neng)使用(yong)。

二、如何檢查滅菌后的培養基是否為無菌

滅菌后，如果要求(qiu)比(bi)較嚴格，必須是無(wu)菌培養基的話，可(ke)以進行無(wu)菌試(shi)驗，具體的方(fang)法是：

將已(yi)經滅(mie)完(wan)菌(jun)的菌(jun)棒放到25－28℃的恒溫環(huan)境中避光培養3天(tian)后(hou)，拿(na)出(chu)來檢查看(kan)袋(dai)(dai)內有(you)沒有(you)雜菌(jun)滋生的痕跡，看(kan)菌(jun)袋(dai)(dai)內有(you)沒沒有(you)導(dao)演變色、出(chu)現(xian)斑點(dian)等情況的發(fa)生，如果有(you)就證明滅(mie)菌(jun)不徹(che)底(di)。

三、影響培養基滅菌效果的因素有哪些

培(pei)養基滅(mie)菌(jun)要求要徹底(di)(di)，不徹底(di)(di)的話可能影響(xiang)微(wei)生物的培(pei)養，一(yi)般影響(xiang)培(pei)養基滅(mie)菌(jun)效(xiao)果(guo)的因(yin)素主要有：

1、營養成分的保持

濕熱滅(mie)菌時，微生物被(bei)殺死的(de)(de)同時，培養(yang)基的(de)(de)營養(yang)成(cheng)分(fen)也遭到了一定的(de)(de)破壞(huai)，特別是氨(an)(an)(an)基酸(suan)(suan)和維生素。如在121℃，僅20min，就(jiu)有59%的(de)(de)賴氨(an)(an)(an)酸(suan)(suan)和精氨(an)(an)(an)酸(suan)(suan)及其他(ta)堿性氨(an)(an)(an)基酸(suan)(suan)被(bei)破壞(huai)，蛋(dan)氨(an)(an)(an)酸(suan)(suan)和色氨(an)(an)(an)酸(suan)(suan)也有相(xiang)當(dang)數(shu)量被(bei)破壞(huai)。在熱的(de)(de)作用下某些(xie)營養(yang)成(cheng)分(fen)還可能因(yin)受熱而(er)相(xiang)互之(zhi)間發生反應，造成(cheng)培養(yang)基中原有營養(yang)成(cheng)分(fen)的(de)(de)數(shu)量變化，因(yin)而(er)影(ying)響培養(yang)基質量。

2、微生物的耐熱性

細(xi)菌(jun)芽孢的熱阻較(jiao)大，滅菌(jun)所(suo)需要的時(shi)間(jian)取決于把細(xi)菌(jun)芽孢減少到(dao)所(suo)規定數目(mu)的時(shi)間(jian)。

3、pH值

pH值對微生物的耐熱性影響很大。pH值介于6.0~8.0時，微生物最不易死亡。pH<6.0時，微生物比較容易死亡，此時H+很容易滲入微生物的細胞，從而改變細胞的生理反應，促使其死亡。所以培養基的pH越低，所需的時間也越短。

4、培養基成分

油脂、糖類(lei)及蛋白質(zhi)等組成的(de)高濃度(du)有(you)機物會包(bao)于細胞的(de)周圍(wei)形式(shi)一層薄膜、影響(xiang)熱(re)的(de)傳導(dao)。而高濃度(du)的(de)鹽類(lei)、色素則削(xue)弱其耐(nai)熱(re)性，滅菌較(jiao)易。例如：大腸(chang)桿菌在水中(zhong)(zhong)加熱(re)至60-65℃便死亡(wang)，在10%糖液中(zhong)(zhong)需70℃加熱(re)4-6分鐘(zhong)才死亡(wang)，在30%糖液中(zhong)(zhong)需30分鐘(zhong)才死亡(wang)。一般(ban)糖類(lei)含量(liang)較(jiao)多的(de)時候最(zui)好選(xuan)用115℃，30分鐘(zhong)；一般(ban)的(de)培養(yang)基可(ke)選(xuan)擇121℃20分鐘(zhong)。

5、泡沫

泡沫中的空氣形成隔(ge)熱(re)層，使(shi)熱(re)量難(nan)以滲透進去(qu)，殺死(si)其中的雜菌。

6、顆粒

顆(ke)粒(li)小，容(rong)易滅(mie)(mie)菌，顆(ke)粒(li)大(da)，則難滅(mie)(mie)菌。對于含有少量較(jiao)大(da)顆(ke)粒(li)及(ji)粗(cu)纖維的(de)(de)培(pei)(pei)養(yang)基，可用粗(cu)濾的(de)(de)方法（不應影響培(pei)(pei)養(yang)基質量）予(yu)以除去，培(pei)(pei)養(yang)基結(jie)塊會造成培(pei)(pei)養(yang)基滅(mie)(mie)菌的(de)(de)不徹底(di)。

8、滅菌鍋內空氣是否排凈

這個是影響(xiang)滅(mie)菌(jun)是溫度和壓力比例關系的(de)要點，同(tong)(tong)樣達到了相同(tong)(tong)的(de)壓力的(de)情況下，如果空氣未能排凈，也就是說不是純蒸汽滅(mie)菌(jun)，此時的(de)溫度不一定(ding)能達到目的(de)要求，會(hui)嚴重影響(xiang)滅(mie)菌(jun)效果。