一、培養基滅菌的方法有哪些

培養基配制好后，必須立即滅菌，因為如果長時間不進行滅菌，培養料內的微生物就會在料內發酵生長，從而破壞培養基內的營養成分。一般來說，培養基的滅菌方法主要有以下六(liu)種：

1、干熱滅菌

多用(yong)于耐熱器皿滅菌(jun)，例如移液管和(he)玻璃(li)(li)平(ping)皿等、玻璃(li)(li)試管或者金屬器皿等等，可在170攝氏度(du)滅菌(jun)2-4h，也可在200所說的(de)滅菌(jun)0.5-1h。接種環，接種針等、涂布棒(bang)之類的(de)實驗器材，可用(yong)酒精燈直接灼燒滅菌(jun)。

滅(mie)菌(jun)效(xiao)(xiao)果：滅(mie)菌(jun)效(xiao)(xiao)果好，能殺(sha)死一(yi)切微生(sheng)物(wu)，芽孢也(ye)不例外。

注意事項：干熱(re)滅(mie)菌過(guo)程的(de)熱(re)穿(chuan)透(tou)效果差且比較(jiao)慢，因此在烘(hong)箱內進行干熱(re)滅(mie)菌時，不可擺(bai)放(fang)過(guo)滿(man)；塑料、橡(xiang)膠(jiao)等不耐熱(re)材質(zhi)不可采用此方法滅(mie)菌；紙、棉的(de)滅(mie)菌溫度不能(neng)超過(guo)170℃。

2、高壓蒸氣滅菌（濕熱滅菌）

通常用(yong)于實驗(yan)室大部分培養基的滅(mie)菌(jun)，亦可用(yong)在玻(bo)璃(li)器皿上、金屬器皿滅(mie)菌(jun)。通常采用(yong)121°C高壓滅(mie)菌(jun)15-20min或116°C高壓滅(mie)菌(jun)30min，滅(mie)菌(jun)參數可以依據培養基的不(bu)同而調(diao)節。

滅(mie)菌效(xiao)果：它能殺死(si)一切微生(sheng)物(wu)，芽孢也(ye)不例外。

注意事(shi)項：滅(mie)菌(jun)(jun)時冷空氣(qi)沒有排出、培養基本(ben)身(shen)含有過多(duo)的(de)芽(ya)孢、滅(mie)菌(jun)(jun)方式不當、滅(mie)菌(jun)(jun)鍋中(zhong)的(de)物品放(fang)置過滿(man)，均會造(zao)成滅(mie)菌(jun)(jun)的(de)失(shi)敗；在進行容器(qi)(qi)滅(mie)菌(jun)(jun)時，容器(qi)(qi)不可密封，需與滅(mie)菌(jun)(jun)鍋內(nei)空氣(qi)流通。

3、水浴-加熱-流動蒸汽滅菌

常用于含(han)有不耐熱成分培(pei)養(yang)基的滅(mie)菌，如(ru)XLD瓊脂等、亞(ya)硒酸(suan)(suan)鹽胱氨酸(suan)(suan)增菌液(ye)等、亞(ya)硫酸(suan)(suan)鉍(bi)瓊脂等等。用流動(dong)蒸汽對培(pei)養(yang)基進(jin)行滅(mie)菌，若無對應流動(dong)蒸汽滅(mie)菌設備，既可用水浴加熱，也可用“蒸”法(fa)殺菌。

滅(mie)菌(jun)效果：能殺(sha)(sha)死(si)微生物的(de)繁(fan)殖體(ti)，無(wu)法殺(sha)(sha)死(si)芽孢體(ti)，用(yong)這種方法殺(sha)(sha)菌(jun)的(de)培養基(ji)，一(yi)般(ban)抑菌(jun)性較(jiao)強，或者需要很短的(de)時間。

注意事項(xiang)：不同培(pei)養(yang)基(ji)成分耐(nai)熱(re)(re)(re)性有差(cha)別，加熱(re)(re)(re)時應注意，如(ru)將含有亞硒酸鹽的(de)(de)培(pei)養(yang)基(ji)（SC、SBG等(deng)）加熱(re)(re)(re)到90°C左右(you)，過高(gao)的(de)(de)加熱(re)(re)(re)可導致亞硒酸氫鈉的(de)(de)分解，培(pei)養(yang)基(ji)變(bian)紅色，含有瓊脂的(de)(de)培(pei)養(yang)基(ji)可以(yi)加熱(re)(re)(re)沸騰4-6次，也可以(yi)沸水(shui)浴后20-30min讓瓊脂充分溶解。

4、過濾滅菌

多用(yong)于抗生素或(huo)含有(you)不耐熱(re)成分的(de)培(pei)養基滅菌(jun)，通常(chang)采用(yong)孔徑為(wei)0.22μm微孔濾(lv)膜或(huo)者濾(lv)芯過(guo)濾(lv)除(chu)(chu)菌(jun)。實驗室生產無菌(jun)空氣時(shi)亦可(ke)使用(yong)此(ci)法，采用(yong)特(te)殊(shu)濾(lv)芯或(huo)者濾(lv)網(wang)，過(guo)濾(lv)和除(chu)(chu)菌(jun)空氣。

滅菌效果(guo)：能去除常見的(de)細(xi)菌，真菌和芽孢體(ti)(ti)，卻(que)無法(fa)去除支(zhi)原體(ti)(ti)，病毒和其他體(ti)(ti)積微小的(de)生物。

注意事項：使用前通常需(xu)按(an)照說明(ming)書使濾(lv)(lv)膜(mo)或(huo)濾(lv)(lv)芯浸濕；需(xu)要嚴格遵守過濾(lv)(lv)器或(huo)者(zhe)濾(lv)(lv)膜(mo)的(de)指示(shi)，速(su)度過快或(huo)者(zhe)過濾(lv)(lv)體積過大都(dou)會(hui)造成(cheng)濾(lv)(lv)膜(mo)的(de)斷(duan)裂(lie)和除(chu)菌的(de)失敗；黏(nian)度較大或(huo)有沉淀的(de)培養(yang)基不適合(he)用此方式除(chu)菌。

5、輻照滅菌

微(wei)波、紫(zi)外(wai)(wai)線(xian)、X射(she)線(xian)、γ射(she)線(xian)都(dou)可(ke)以(yi)進行滅(mie)菌(jun)(jun)(jun)。γ射(she)線(xian)具(ju)有很強的(de)穿(chuan)透(tou)力，滅(mie)菌(jun)(jun)(jun)效果良好，在(zai)食品中(zhong)(zhong)得(de)到了廣泛的(de)應用(yong)(yong)、藥(yao)品行業(ye)的(de)產品滅(mie)菌(jun)(jun)(jun)，亦多(duo)用(yong)(yong)于微(wei)生(sheng)物培養基中(zhong)(zhong)、實驗器材的(de)滅(mie)菌(jun)(jun)(jun)。某(mou)些特殊(shu)培養基或(huo)者添(tian)加劑成分(fen)，由(you)于不宜采(cai)用(yong)(yong)高溫蒸(zheng)汽(qi)滅(mie)菌(jun)(jun)(jun)、過濾除菌(jun)(jun)(jun)等等，可(ke)用(yong)(yong)γ射(she)線(xian)照射(she)滅(mie)菌(jun)(jun)(jun)。紫(zi)外(wai)(wai)線(xian)殺菌(jun)(jun)(jun)作用(yong)(yong)弱(ruo)，很少有穿(chuan)透(tou)力，一(yi)般只適用(yong)(yong)于實驗室內空氣或(huo)者物體表(biao)面(mian)的(de)殺菌(jun)(jun)(jun)。

滅菌(jun)(jun)效果：γ射線具有良好的滅菌(jun)(jun)和穿透(tou)力(li)，能(neng)殺滅一切微(wei)生物，芽孢(bao)體也不例外。

注意事項：并(bing)非所有培養基(ji)(ji)都可以采用γ射線輻(fu)照(zhao)滅菌(jun)方式(shi)，一些染料或不穩定(ding)(ding)成分經輻(fu)照(zhao)后會發生變化；γ射線對瓊(qiong)脂有一定(ding)(ding)的(de)損傷(shang)，所以在固體培養基(ji)(ji)滅菌(jun)的(de)過(guo)程中(zhong)，輻(fu)照(zhao)劑量及瓊(qiong)脂的(de)加(jia)入量均需適當調整；玻璃制品、金(jin)屬制品一般(ban)不可采用此方法(fa)滅菌(jun)。

6、化學試劑滅菌

通常用環(huan)(huan)氧乙(yi)烷殺菌，及各種消毒劑的浸泡滅(mie)菌。環(huan)(huan)氧乙(yi)烷在(zai)平皿中曾經得到廣泛(fan)應用、對(dui)一次性醫療產品進(jin)行滅(mie)菌，卻(que)因環(huan)(huan)境污染大，滅(mie)過(guo)菌后的制品需要(yao)較長時間(jian)放(fang)置，讓環(huan)(huan)氧乙(yi)烷散去，目前已逐(zhu)漸為其(qi)他滅(mie)菌方式所代替。

滅菌效果：不(bu)同消毒(du)劑的(de)殺滅效果是有區(qu)別的(de)，粗略地可以分(fen)為低(di)效消毒(du)劑、中，高效消毒(du)劑。環氧乙烷是一種(zhong)高效消毒(du)劑，能殺死含有芽(ya)孢等一切(qie)微生物。

注意事項：此(ci)類滅(mie)(mie)菌(jun)方式通(tong)常會有(you)殘留(liu)，且對環境(jing)有(you)污(wu)染(ran)，因此(ci)一(yi)般不(bu)適合(he)用于直接進行微生(sheng)物培養(yang)相(xiang)關(guan)器皿滅(mie)(mie)菌(jun)；殺菌(jun)能力越(yue)(yue)強(qiang)的(de)消毒(du)劑，刺激性、腐(fu)蝕性、毒(du)性往往越(yue)(yue)大，使用時需注意防護(hu)。

二、培養基滅菌用哪種方法好

培養(yang)(yang)基的(de)滅(mie)菌(jun)方(fang)(fang)法(fa)眾多，采用不(bu)適當的(de)滅(mie)菌(jun)方(fang)(fang)法(fa)可(ke)能會(hui)破壞培養(yang)(yang)基的(de)質量(liang)，會(hui)改變顏色、透明度降低、pH變化等，那(nei)么哪(na)種方(fang)(fang)法(fa)比(bi)較(jiao)好呢？

由(you)于不(bu)同(tong)微生物培(pei)(pei)養需要的(de)培(pei)(pei)養基不(bu)同(tong)，滅菌(jun)方法的(de)選擇方面也有所不(bu)同(tong)，一般來(lai)說，培(pei)(pei)養基的(de)滅菌(jun)方法應按(an)照(zhao)說明書或驗(yan)證試驗(yan)參數來(lai)采用不(bu)同(tong)方法，常規的(de)是采用濕(shi)熱滅菌(jun)，特殊要求的(de)采用薄(bo)膜過(guo)濾等。