一、什么是細胞培養基

細胞培養基是培養細胞的培養基，既是供給細胞營(ying)養和促使細胞生(sheng)殖(zhi)增(zeng)殖(zhi)的基礎物(wu)質，也(ye)是培養細胞生(sheng)長(chang)和繁殖(zhi)的生(sheng)存(cun)環境，一般是鹽、碳水(shui)化合物(wu)、維生(sheng)素、氨基酸、代(dai)謝前體、生(sheng)長(chang)因(yin)子、激素和微(wei)量元素的復雜混合物(wu)。

二、常用的細胞培養基有哪些

細(xi)(xi)胞培(pei)養(yang)基(ji)的種類眾多，由于不(bu)(bu)同細(xi)(xi)胞系對這些成(cheng)分的要求各(ge)不(bu)(bu)相同，因此(ci)產生了不(bu)(bu)同類型的培(pei)養(yang)基(ji)，常用的細(xi)(xi)胞培(pei)養(yang)基(ji)主(zhu)要有：

1、MEM培養基

是一種(zhong)(zhong)(zhong)添加了(le)營養(yang)(yang)物的(de)最(zui)(zui)低必(bi)需(xu)培(pei)養(yang)(yang)基(ji)(ji)，僅含(han)有12種(zhong)(zhong)(zhong)必(bi)需(xu)氨基(ji)(ji)酸(suan)、L-谷氨酰胺和(he)8種(zhong)(zhong)(zhong)維生(sheng)素(su)，含(han)糖量為1g/L。MEM是一種(zhong)(zhong)(zhong)最(zui)(zui)基(ji)(ji)礎(chu)、最(zui)(zui)常用(yong)的(de)細(xi)胞培(pei)養(yang)(yang)基(ji)(ji)，主要應用(yong)于貼壁細(xi)胞的(de)培(pei)養(yang)(yang)，在添加血清后，可(ke)用(yong)于培(pei)養(yang)(yang)多種(zhong)(zhong)(zhong)單(dan)層生(sheng)長的(de)細(xi)胞，如(ru)成(cheng)纖維細(xi)胞。修改配方后的(de)a-MEM則可(ke)廣泛應用(yong)于各種(zhong)(zhong)(zhong)哺乳(ru)動物懸(xuan)浮和(he)貼壁細(xi)胞培(pei)養(yang)(yang)。

2、DMEM培養基

氨(an)基酸含(han)量是MEM的(de)兩(liang)倍，維生(sheng)素(su)含(han)量是MEM的(de)4倍，以(yi)及硝酸鐵、丙(bing)酮酸鈉和(he)(he)一(yi)些補充(chong)氨(an)基酸。此(ci)外，DMEM分(fen)為低糖(tang)型和(he)(he)高糖(tang)型，葡萄(tao)糖(tang)含(han)量分(fen)別(bie)為1g/L和(he)(he)4.5g/L。（低糖(tang)適(shi)于(yu)依賴性(xing)(xing)貼壁細(xi)胞培(pei)養，特別(bie)適(shi)用于(yu)生(sheng)長速度快(kuai)、附著性(xing)(xing)較(jiao)差的(de)腫(zhong)瘤細(xi)胞培(pei)養；高糖(tang)更適(shi)合高密(mi)度懸(xuan)浮(fu)細(xi)胞培(pei)養，也適(shi)用于(yu)附著性(xing)(xing)較(jiao)差，但(dan)又(you)不(bu)希望它脫離原(yuan)來生(sheng)長點的(de)克(ke)隆培(pei)養，也可(ke)用于(yu)雜交瘤中骨髓瘤細(xi)胞和(he)(he)DNA轉染(ran)的(de)轉化細(xi)胞的(de)培(pei)養。）

3、IMDM培養基

用于淋巴細(xi)胞和(he)雜(za)交(jiao)瘤細(xi)胞的生長。與DMEM相比，添(tian)加了HEPES和(he)硒，硝酸鉀(jia)取(qu)代(dai)了硝酸鐵，并且含有更多的氨基酸、維(wei)生素和(he)無機(ji)鹽。

4、Ham 's F-12K培養基

用于支(zhi)持原代(dai)細胞(bao)的生(sheng)長和分化。F-12K增加(jia)了氨基酸、丙酮(tong)酸、生(sheng)物素(su)、鈣、鎂、腐胺(an)和酚紅(hong)的含(han)量。

5、DMEM/F12培養基

DMEM和F12的1:1混合物，能夠在低血清(qing)條件下支持多(duo)種(zhong)哺乳動物細(xi)(xi)胞的培(pei)養(yang)，在此培(pei)養(yang)基中(zhong)成功培(pei)養(yang)的細(xi)(xi)胞包(bao)括：MDCK、神經(jing)膠質細(xi)(xi)胞、成纖維細(xi)(xi)胞和人內皮細(xi)(xi)胞等。

6、McCoy’s 5A培養基

廣泛用于(yu)多種原代細(xi)胞(bao)及細(xi)胞(bao)系的培養，如來源于(yu)骨髓、皮(pi)膚、脾臟、腎臟和肺等組織的哺(bu)乳動物(wu)原代細(xi)胞(bao)。

7、RPMI-1640培養基

是在McCoy’5A的(de)基礎上(shang)進行改(gai)良研發(fa)出的(de)，最初用于(yu)人白血病細胞的(de)懸浮培養，后來發(fa)現(xian)也適用于(yu)HeLa、MCF-7、PC12、外周(zhou)血單核細胞（B/T淋巴細胞）和(he)星形細胞的(de)培養。RPMI 1640與其它培養基的(de)區別是含有(you)還原(yuan)型(xing)谷胱甘肽和(he)高濃度(du)維生素(su)。此外還含有(you)含有(you)MEM、DMEM中不含的(de)生物素(su)、維生素(su)B12和(he)對氨基苯。

8、L15培養基

L-15培(pei)養(yang)基的(de)配方中不含用(yong)于CO2平衡環境的(de)碳酸(suan)(suan)鹽緩(huan)沖系統(tong), 而是(shi)用(yong)磷酸(suan)(suan)鹽、L-精氨(an)酸(suan)(suan)、L-組(zu)氨(an)酸(suan)(suan)和(he) L-半胱氨(an)酸(suan)(suan)作為(wei)緩(huan)沖劑。用(yong)半乳糖(tang)和(he)丙酮酸(suan)(suan)鈉代替葡萄糖(tang)以防止(zhi)乳酸(suan)(suan)的(de)形(xing)成。可以在無(wu)CO2培(pei)養(yang)箱(xiang)中進行細(xi)胞培(pei)養(yang)，或者擰緊瓶蓋培(pei)養(yang)。

三、細胞培養基的品質要求

細(xi)胞培養(yang)(yang)(yang)基(ji)有多(duo)種(zhong)，不同種(zhong)類的細(xi)胞培養(yang)(yang)(yang)基(ji)用于培養(yang)(yang)(yang)不同細(xi)胞，一般來(lai)說，好的細(xi)胞培養(yang)(yang)(yang)基(ji)，需要滿足以下(xia)幾點要求：

1、外觀

顏色(se)、粉末細(xi)度(du)須均勻。

2、溶解性

培(pei)養(yang)(yang)基完全溶解，可以避免培(pei)養(yang)(yang)基內(nei)營(ying)養(yang)(yang)成分(fen)的流(liu)失。

3、pH值

哺乳類動物細胞(bao)生長需要合適(shi)的酸堿(jian)度，同(tong)時pH值的測(ce)定也可以檢查(cha)培養基(ji)的批間差(cha)異。

4、水分

培養基的(de)(de)營養成份(fen)很(hen)豐富，利于微(wei)生物的(de)(de)滋長，因(yin)此水分(fen)的(de)(de)含量控制可(ke)以(yi)延(yan)長有效期。

5、冰點滲透壓

細胞必須生活在合適(shi)的滲透(tou)壓環境(jing)中，同(tong)時滲透(tou)壓值的測定也可以檢(jian)查培養基的批間差異。

6、菌落總數

粉末培養基不是無菌制劑，培養基本(ben)身的(de)營養(yang)成分(fen)很豐富(fu)，容(rong)易滋生微生物，因此(ci)菌(jun)落的(de)控制可以延(yan)長有效(xiao)期(qi)

7、細胞生長試驗

可檢(jian)查細胞(bao)培(pei)養基是(shi)否有(you)促(cu)生長(chang)的能力，以及(ji)是(shi)否有(you)不利細胞(bao)生長(chang)的毒素(su)。

8、細菌內毒素

為(wei)(wei)滿足(zu)生(sheng)物(wu)制品細菌內毒素(su)(su)的(de)控(kong)制要求，作(zuo)為(wei)(wei)生(sheng)物(wu)制品生(sheng)產原料(liao)的(de)培養基同樣需要細菌內毒素(su)(su)控(kong)制。

9、穩定性

確(que)定產品的(de)儲(chu)存、運輸(shu)條(tiao)件，產品的(de)保質期限。

10、一致性

驗證產品的均一性。