一、分光光度計的組成部分
分光光度計的型號(hao)繁多,但其(qi)基本(ben)結(jie)構由以下幾部(bu)分(fen)組成(cheng):光源、單色器(qi)、吸收池(chi)、檢測系統及信(xin)號(hao)顯示系統。
1、光源
在吸光度(du)的測量中(zhong),要求(qiu)光源發出的所需波長(chang)范圍內的連續光譜(pu)具(ju)有足夠的光強度(du),并能(neng)在一(yi)定時間內保持穩(wen)定。
2、單色器
單色器是能(neng)將光(guang)源(yuan)發射的連續光(guang)源(yuan)分解為單色光(guang)并從(cong)中(zhong)選出任一波長單色光(guang)的光(guang)學系統。它由(you)入射狹縫、準光(guang)器、色散原件(jian)、聚焦元件(jian)和出射狹縫等(deng)幾(ji)個(ge)部分組成(cheng)。
3、吸收池
吸收(shou)池又(you)稱比(bi)(bi)色(se)皿,用于盛裝參比(bi)(bi)溶液(ye)和待測試液(ye)。儀器一般配有(you)液(ye)層厚度為0.5cm、1cm、2cm、3cm等(deng)的長方形比(bi)(bi)色(se)皿。
4、檢測系統
檢測系(xi)統通常通過利用(yong)光(guang)電(dian)效應(ying)將透過吸(xi)收池的(de)(de)光(guang)信(xin)號轉變為可測的(de)(de)電(dian)信(xin)號,而且所產生的(de)(de)電(dian)信(xin)號應(ying)與(yu)照(zhao)射于檢測器上的(de)(de)光(guang)信(xin)號成正(zheng)比。可見分光(guang)光(guang)度(du)計(ji)常常使用(yong)光(guang)電(dian)管或光(guang)電(dian)倍(bei)增管做檢測器。
5、信號顯示系統
光(guang)電(dian)轉換器產生的各種(zhong)電(dian)信號(hao),經(jing)放大等(deng)處理后,用一定方(fang)式顯示出來,以便(bian)于計算和記錄。
二、分光光度計原理
分光(guang)(guang)(guang)光(guang)(guang)(guang)度(du)(du)計的(de)(de)原理是采用(yong)一個(ge)可以產生多個(ge)波長(chang)的(de)(de)光(guang)(guang)(guang)源(yuan)(yuan),通(tong)過系列(lie)分光(guang)(guang)(guang)裝置,從(cong)而產生特定(ding)波長(chang)的(de)(de)光(guang)(guang)(guang)源(yuan)(yuan),光(guang)(guang)(guang)線透過測試的(de)(de)樣品(pin)(pin)后,部(bu)分光(guang)(guang)(guang)線被(bei)吸收,計算樣品(pin)(pin)的(de)(de)吸光(guang)(guang)(guang)值,從(cong)而轉(zhuan)化(hua)成樣品(pin)(pin)的(de)(de)濃度(du)(du),樣品(pin)(pin)的(de)(de)吸光(guang)(guang)(guang)值與(yu)樣品(pin)(pin)的(de)(de)濃度(du)(du)成正比(bi)。
三、分光光度計的種類
1、可見分光光度計
用(yong)來測量待測物(wu)質(zhi)對(dui)可(ke)見(jian)光(guang)的吸光(guang)度并進(jin)行(xing)定量分析的儀器,稱(cheng)為可(ke)見(jian)分光(guang)光(guang)度計。
2、紫外可見分光光度計
紫(zi)外可(ke)見(jian)光(guang)(guang)譜儀用(yong)來測(ce)量待測(ce)物(wu)質(zhi)對(dui)可(ke)見(jian)光(guang)(guang)或紫(zi)外光(guang)(guang)(200-760nm)的吸(xi)光(guang)(guang)度并進行定(ding)量分析(xi)的儀器(qi),可(ke)以測(ce)定(ding)核(he)酸和蛋白的濃(nong)度,也(ye)可(ke)以測(ce)定(ding)細(xi)菌細(xi)胞密(mi)度。
3、紅外分光光度計
一般的(de)(de)紅外光(guang)譜(pu)(pu)是指大于(yu)760nm的(de)(de)紅外光(guang)譜(pu)(pu),這是研究有機化合物最常用(yong)的(de)(de)光(guang)譜(pu)(pu)區域,能分析各種(zhong)狀態(氣、液、固)的(de)(de)試(shi)樣。
4、熒光分光光度計
熒光(guang)(guang)(guang)分(fen)(fen)光(guang)(guang)(guang)光(guang)(guang)(guang)度計是用于(yu)掃描液(ye)相熒光(guang)(guang)(guang)標記物所發(fa)出的(de)熒光(guang)(guang)(guang)光(guang)(guang)(guang)譜(pu)的(de)一種儀(yi)器,應用于(yu)科(ke)研、化(hua)工、醫藥、生化(hua)、環保以及(ji)臨(lin)床檢驗(yan)、食品(pin)檢驗(yan)、教學實驗(yan)等領域,通過對這些參(can)數的(de)測(ce)定(ding),不但(dan)可以做一般的(de)定(ding)量分(fen)(fen)析,而(er)且還可以推斷(duan)分(fen)(fen)子在各種環境(jing)下的(de)構象變(bian)化(hua),從而(er)闡明(ming)分(fen)(fen)子結構與功能之間的(de)關(guan)系。